用于培养皿的盖制造技术

一种包括培养皿和可移除的盖的装置，其中，培养皿包括具有侧壁的主体，该侧壁限定用于接收一定量的液体培养基的贮存区域，并且可移除的盖被布置为在正常使用期间覆盖该贮存区域，其中，盖包括透气材料，并且包括由弹性材料形成的接合部分，该接合部分适于与培养皿的主体的侧壁配合地接合，从而在将可移除的盖耦接到培养皿时抵靠侧壁压缩可移除的盖的接合部分的一部分。装配到培养皿的盖使大部分培养基可以保留在封闭于贮存器和盖之间的环境中，而无需使用覆盖介质来限制蒸发，同时允许通过其进行气体交换。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于培养皿的盖
本专利技术涉及培养皿。更具体地，某些实施例涉及用于孵育胚胎的培养皿。
技术介绍
不孕影响全世界超过8000万人。据估计，10％的夫妇经历原发性或继发性不孕。体外受精(IVF)是一种选择性医学治疗，其可以为否则不能怀孕的一对夫妇提供建立怀孕的机会。它是以下一个过程：其中卵子(卵母细胞)取自女性的卵巢并且然后在实验室中用精子受精。然后将在该过程中产生的胚胎置于子宫中用于潜在植入。在受精(授精)和转移之间，胚胎典型地在孵育器的孵育室中储存2-6天，在此期间可以例如通过成像定期监测它们以评估它们的发育。通常为了模拟输卵管和子宫中的条件，控制孵育器内的条件，例如温度和大气组成。用于孵育的胚胎典型地置于培养皿中，所述培养皿然后可以储存在孵育器中。培养皿也可以称为载玻片、载体或托盘。用于孵育胚胎并且也提供时移胚胎成像以评估胚胎发育的一种公知装置是由VitrolifeA/S(奥尔胡斯，丹麦)开发并且可从其获得的具有其相关的EmbryoViewer(RTM)软件的EmbryoScope(RTM)设备。EmbryoScope(RTM)D装置具有在由载玻片载体支撑的、称为载玻片的六个可移动培养皿中孵育胚胎的能力。每个载玻片(皿)包括容器的3×4阵列并且因此能够保存多达12个胚胎。对于EmbryoScope(RTM)+装置，有15个可移动培养皿和4×4的容器阵列，用于在每个培养皿中保存多达16个胚胎。在使用中，将待孵育的每个胚胎放置在独立容器中的、其自己的独立于其它容器的培养基液滴中，或在与其他胚胎共享的液滴中，并且在这两种情况下都覆盖有较大体积的矿物油，以防止在孵育过程中蒸发。EmbryoScope(RTM)装置具有内置的显微镜和平移台以允许胚胎在它们的整个孵育过程中在不同阶段顺序地成像。图1是典型地在EmbryoScope(RTM)D设备中使用的类型的胚胎皿/载玻片2的示意性透视图。皿2具有大约7.5cm(长度)×2.5cm(宽度)×1.5cm(高度)的总尺寸，并且成形为塑料材料(例如透明聚酯材料)的单注射模制成形。载玻片2包括主体4、用于保持皿的手柄6、和贴标签区域8，具有关于载玻片上的胚胎的信息(例如患者ID和孵育协议信息)的标签可以粘贴在所述贴标签区域上。3×4阵列的用于接收用于培养的单独胚胎的容器(孔)10设置在主体4的凹部12内。凹部12由容器10设在其中的凹部底板14和凹部壁16限定。凹部具有大约3.5cm(长度)×2.0cm(宽度)×0.8cm(深度)的尺寸。在使用期间载玻片2的正常取向是凹部底板14水平并且凹部壁16竖直。容器10在凹部底板处具有大约4mm的直径，并且具有从凹部底板向下延伸大约2.5mm的竖直壁之后渐缩到更小的亚毫米(例如大约0.3mm直径)的孔18，胚胎位于所述孔中以便培养。在凹部12内也设有四个(每个端部两个)冲洗贮存器20。这些可以用于储存在根据所遵循的任何方案准备用于培养/孵育胚胎时使用的液体，例如清洗培养基。在正常使用中，单独的胚胎位于容器10的底部处的亚毫米孔18中的相应的一个中。在任何给定载玻片上包含胚胎的孔10的数量将取决于将使用该载玻片孵育的胚胎的数量。通常避免在同一载玻片上混合来自不同患者的胚胎，因此如果没有来自患者的足够胚胎来填充完整的载玻片，则载玻片的剩余容器将一般保持未使用。包含胚胎的每个容器10由用于胚胎的水基培养基填充(达到凹部底板14下方的水平)。凹部12然后至少部分地填充有覆盖容器10中的培养(生长)基的油层。油层提供屏障以帮助减少胚胎位于其中的培养基的蒸发。还存在油覆盖层，以通过充当对病毒、细菌、真菌和潜在有毒的挥发性有机化合物(VOC)的疏水屏障来帮助防止或基本上减少污染。当在干式孵育器中孵育时，必须使用油覆盖以防止蒸发，蒸发会引起渗透胁迫，但在加湿环境中孵育时可以将油覆盖省去。但是，加湿的孵育器更容易受到真菌和细菌的污染，这些真菌和细菌可能会在这样的环境中繁殖，并且因而，许多IVF实验室因此更倾向于使用油覆盖在干式孵育器中孵育胚胎。EmbryoScope(RTM)是干式孵育器的一个示例。不幸的是，油层也也可能是有害的毒素来源，因此通常从专门的供应商处购买高纯度和IVF测试的油，并将其用于胚胎培养。图1中所示的皿2的几何形状和尺寸适合于匹配特定装置的几何形状和尺寸，其中使用载玻片在该特定装置中孵育胚胎。然而，培养皿/胚胎载玻片的广泛的相应设计可以用于其它孵育器/培养装置。关于适合用于胚胎孵育的已知培养皿的特征的更多细节可以在例如以下文献中找到：WO09/003487(UnisenseFertilitechA/S)[1]、WO01/002539(TheDanishInstituteofAgriculturalSciences)[2]和WO2015/169499(UnisenseFertilitechA/S)[3]。尽管未在图1中示出，但是载玻片2具有分离的盖，该分离的盖放置在包含凹部12的主体4上。分离的盖通常由透明聚合物材料形成并且具有包括凹入部分的长方体形状。凹入部分的尺寸设置为接收培养皿的主体4，并且在胚胎已经放置在孔18中并且将培养基和油分别放置在容器10和凹部12中之后，将凹入部分松散地装配在主体4上方。载玻片2内的环境(即，凹部12内)和载玻片2外的环境之间的氧气和二氧化碳交换可通过盖和主体4的松散装配来发生，例如通过主体4和盖之间的空间/间隙。这种气体交换对于胚胎发育是必需的。胚胎发育需要两种气体：氧气和二氧化碳，并且大多数孵育器提供这两种气体和氮气的受控混合物(例如，6％CO2、5％O2和89％N2)，因此通常被称为三气孵育器，但应注意，正在生长的胚胎不会消耗氮气。胚胎在发育过程中会消耗氧气。然而，消耗的量很小，并且容易通过培养皿内所含大量氧气的分子扩散而得到补充。科学文献中仍然有充分的迹象表明，输卵管(胚胎通常所在的位置)中的氧张力已从大气中的氧气水平(约20％的O2)降低了，并且在氧气浓度降低的情况下进行IVF胚胎孵育对胚胎发育有益。因此，许多IVF诊所都优选将在IVF中用于培养人类胚胎的孵育器中的氧气浓度从大气中的氧气浓度降低至5％左右。因此，必须在培养皿中进行高效的气体交换，以确保将胚胎暴露在孵育器内正确降低的氧气浓度下。胚胎不使用二氧化碳(但产生很小量二氧化碳)。但是，大多数商业培养基使用基于碳酸氢盐的缓冲系统，并且在培养基/生长培养基中维持正确的pH值(约7.2至7.4)对于胚胎发育和存活至关重要。在大多数培养基制剂中，这相当于5％至6％的CO2浓度(在海平面处)。因此，绝对需要在培养皿中进行高效的气体交换，以确保培养基的pH值在正确的范围内，这可以通过将培养基暴露于孵育器内的正确二氧化碳浓度来控制。由于培养基的制剂并且甚至是同一供应商的不同批次的培养基可能会有所不同，因此对于IVF诊所而言重要的是，对于任何给定的CO2浓度设置，IVF诊所都要测量和验证在孵育器中孵育的培养基样品的pH值。验证pH值的普通的常规程序包括：将培养皿中没有胚胎的培养基样品放入孵育器中，平衡至少24小时，然后取出样品并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包括培养皿和可移除的盖的装置，其中，所述培养皿包括具有侧壁的主体，所述侧壁限定用于接收一定量的液体培养基的贮存区域，并且所述可移除的盖被布置为在正常使用期间覆盖所述贮存区域，/n其中，所述盖包括透气材料，并且包括由弹性材料形成的接合部分，所述接合部分适于与所述培养皿的所述主体的所述侧壁配合地接合，从而在将所述可移除的盖耦接到所述培养皿时抵靠所述侧壁压缩所述可移除的盖的所述接合部分的一部分，以形成对于所述贮存区域的不透蒸气的密封。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170608 GB 1709140.61.一种包括培养皿和可移除的盖的装置，其中，所述培养皿包括具有侧壁的主体，所述侧壁限定用于接收一定量的液体培养基的贮存区域，并且所述可移除的盖被布置为在正常使用期间覆盖所述贮存区域，
其中，所述盖包括透气材料，并且包括由弹性材料形成的接合部分，所述接合部分适于与所述培养皿的所述主体的所述侧壁配合地接合，从而在将所述可移除的盖耦接到所述培养皿时抵靠所述侧壁压缩所述可移除的盖的所述接合部分的一部分，以形成对于所述贮存区域的不透蒸气的密封。


2.根据权利要求1所述的装置，其中，所述盖是弹性材料的单个模制件，并且包括主体部分和侧壁部分，其中，所述侧壁部分构造成与所述培养皿的所述主体的所述侧壁弹性地接合，以形成不透蒸气的密封。


3.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述盖对于二氧化碳和/或氧气可渗透。


4.根据权利要求3所述的装置，其中，所述盖具有选自包括以下的组的对二氧化碳和/或氧气的渗透系数：100Barrer以上、500Barrer以上或3000Barrer以上。


5.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述盖具有选自包括以下的组的对从所述一定量的培养基蒸发的水蒸气的渗透系数：100000Barrer以下、10000Barrer以下或1000Barrer以下。


6.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述盖被构造成使得在使用中，当将所述设备置于生理温度下的干燥环境中时，每天小于培养基体积的5％、优选地每天小于培养基体积的2％或更优选地每天小于培养基体积的0.5％能够渗透过所述盖。


7.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述盖在所述盖与所述培养皿的所述主体部分的贮存器之间封闭一定体积的空气，并且其中，所述盖具有对从所述液体培养基蒸发的水蒸气的渗透性，所述渗透性使封闭的空气体积变得水蒸气饱和。


8.根据权利要求7所述的装置，其中，所述盖对水蒸气的渗透性基于以下至少一项来进行选择：要储存在贮存器中的液体培养基的体积、当储存在贮存器中时所述一定量的液体培养基的被暴露的表面积、贮存器的形状以及所述主体的接合部分被构造成与之弹性地接合的部分的形状。


9.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述贮存器被构造成保存总量为0.5mL以上、优选地为1mL以上、更优选地为2mL以上、甚至更优选地为3mL以上的培养基。


10.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述一定量的液体培养基包括一定量的培养基和单独的一定量的包括水的液体，并且其中，所述贮存区域包括用于保存所述一定量的培养基的第一贮存器和用于保存所述单独的一定量的包括水的液体的第二贮存器。


11.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述弹性材料包括弹性体，例如硅树脂。


12.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述盖包括具有减小的厚度的至少一个区域，使得在所述至少一个区域处的对气体的渗透性高于除了在所述至少一个区域之外的对气体的渗透性。

【专利技术属性】
技术研发人员：尼尔斯·B·拉姆辛，特勒尔斯·科夫德·梅尔，K·L·马德森，L·K·朗伯格，乔纳斯·莱尔赫·汉森，
申请(专利权)人：维特罗莱夫公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK