一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，只需要廉价的双面胶带，免去样品袋等采样器具，还可节约成本。与传统采样方法相比，本发明专利技术至少可使采样工作效率提高约200％。

A method of collecting rice leaf samples with tape

【技术实现步骤摘要】
一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法
本专利技术属于水稻分子育种
，涉及一种分子育种过程中利用胶带采集水稻叶片样品的方法。
技术介绍
水稻育种者在实施分子标记辅助选择、转基因、基因编辑等分子育种工作中往往需要对大量田间植株进行分子鉴定，在这些工作中常以叶片作为DNA制备的组织，因此需要进行大量的田间叶片采集工作(俗称采样)。传统叶片的采集一般需要利用自封袋、离心管等采样器具进行，工作时先将样品袋或样品管预先编号并标记，采样时往往又需要二人协作完成，有时还需要携带冰块以保持叶片中所关注物质免遭破坏，这些工作需要耗费大量时间，效率不高。如果需要使叶片保持鲜活以进行离体叶片的相关检测，采样更加麻烦。因此实践中需要更加简便的叶片采集方法。
技术实现思路
针对传统水稻叶片采集方法耗时费力的缺点，本专利技术提供了一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，具有简单、高效、低成本的优势。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的：一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，包括如下步骤：1)采样前，在胶带起始端胶粘面上书写样品编号；2)用非利手握住胶带，食指位于非胶粘面下方，摘取5-20cm长度的水稻叶片，利用拇指与食指的力量将叶片近伤口端粘在胶粘面上，叶片样品在胶带上依次由起始端向内粘贴，同组样品的叶片紧邻，不同组样品之间设置间隔；3)样品在胶带上排布长度达20-40cm时将胶带截断再进行下一组采样，胶带截断后将末端胶粘面反折至叶片上，以免空白胶粘面发生不必要的粘附；4)将粘附在一段胶带上的所有叶片伤口端浸没在清水中使叶片保持鲜活，然后继续下一组采样，直至采样完成。优选地，所述胶带的宽度为1-2cm，更优选为1.5cm。优选地，所述胶带具有以下特征：胶带粘住水稻叶片后用手臂用力甩动叶片不发生脱落；胶带与叶片粘附后遇水粘性不被破坏；胶带与叶片粘附后置于-4～-80℃低温放置叶片不发生脱落。优选地，所述胶带应具有一定刚性，以自由末端胶粘面朝上水平伸出10cm不因自身重量而弯曲为宜。优选地，所述胶带可用手撕的方式截断。更优选地，所述胶带为双面胶带。优选地，所述胶带整体呈中空卷筒状。优选地，步骤1)中采用如下方法书写样品编号：非利手握住胶带，使用油性记号笔在胶带起始端胶粘面上以从左到右的顺序书写样品编号，将写有样品编号的胶带起始端以胶粘面相对的方式回折，折痕应在写有编号靠内侧的空白位置，使得从粘在一起的两层胶带的空白胶粘面一侧对光观察能看见从左到右正写的编号字体。优选地，步骤2)中，粘贴在同一段胶带上的不同组样品无需在间隔处做任何标记即可推知其样品编号。相应地，不同组样品间隔处便无需书写编号。优选地，步骤2)中，当以空白作为不同组样品之间的间隔时，将不同组样品胶带从空白胶粘面中间处对折，以免空白胶粘面发生不需要的粘附。优选地，还包括步骤5)采样完成后保存样品，保存样品采用如下方法：将样品浸没在清水中室温(15-40℃)短期保存(2天)；或将样品放置于样品袋中在-20℃或-80℃环境下长期保存。有益效果应用本专利技术提供的方法，一个人1个小时大约可以采样300份，而传统方法算上前期样品袋及样品管的编号书写工作所需时间，以效率较高的两人合作的方式计算，平均一个人1个小时大约只能采样100份，因此与传统采样方法相比，本专利技术至少可使采样工作效率提高约200％。本专利技术提供的采样方法只需要廉价的双面胶带，免去样品袋等采样器具，还可节约成本。附图说明图1：展示编号书写过程，上图为胶带末端胶粘面上书写完编号的正面(胶粘面)观效果，中图和下图为将上图中书写有编号胶带段回折后的正面观和反面观效果。图2：展示采样时一种左手握住双面胶带的姿势。图3：展示一段粘附有两行16株水稻叶片样品的胶带。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。实施例1、对水稻叶片采样以进行潮霉素抗性检测转基因相关试验中，为了检测植株是否携带转基因成分，需对转基因植株进行鉴定。若转基因试验中利用潮霉素磷酸转移酶作为抗性筛选标记，常常利用离体叶段潮霉素浸泡法进行检测。田间材料以8株每行的方式种植，在移栽后1个月至抽穗前进行采样，田间采样方法如下：1、准备胶带：市场中购置1.5cm宽办公常用双面胶带(品牌为佳立，生产商为南昌佳立胶粘制品有限公司)作为采样工具；2、书写编号：每用一段胶带采样前，左手握住双面胶带，使用油性记号笔在双面胶带末端胶粘面从左到右书写样品编号，将写有样品编号的胶带末端以胶粘面相对的方式回折，折痕应在写有编号靠内侧的空白位置，使得从粘在一起的两层胶带的空白胶粘面一侧对光观察能看见从左到右正写的编号字体，书写有编号的胶带末端效果参见图1。3、进行采样：采样时，用如图2所示的方法左手握住胶带，摘取5-20cm长度的水稻叶片，将其从外到内顺次粘附在胶带上，每取一样品时，利用拇指与食指的力量在近伤口端将叶片正面与胶带粘紧，须使叶片与叶片之间尽量减少空隙，以免胶粘面暴露发生不需要的粘附；将2行样品粘贴在一段胶带上，两行样品保留一定空白以间隔，间隔处无需书写编号；采集完两行样品后，将胶带截断，并将末端胶粘面反折至叶片上，以免空白胶粘面发生不需要的粘附，同时将胶带在两行样品间隔的空白胶带部分对折，以免空白胶粘面发生不需要的粘附；图3展示了采集好2行16片叶片的一段胶带。4、暂时保存样品：将粘附在胶带上的所有叶片以伤口端浸没在清水(装在小桶中)中使叶片保持鲜活，然后继续下一组编号及采样操作，直至采样完成。5、进行检测：将样品保存在清水中于室温下直至检测，试验须在采样后48h内完成，进行潮霉素抗性检测时参照刘巧泉等的方法[刘巧泉，陈秀花，王兴稳，彭凌涛，顾铭洪.一种快速检测转基因水稻中潮霉素抗性的简易方法.农业生物技术学报，2001,9(03):264-268]，具体地，利用24孔酶标板(孔呈4行6列排布)作为液体盛器，样品孔中预先加入50μg/L潮霉素溶液1.5ml，将粘有样品的一段胶带从清水中移出，将对折粘贴在一起的部分分开，将一段胶带上的所有叶片用剪刀从叶片中间剪掉叶尖部分使齐平，顺次将1cm左右末端叶段剪入对应样品孔中，3-5天后检测抗性结果。需要说明事项：1、采样时也可以用叶片反面与胶带相粘，但以正面与胶带相粘的方式采样叶片失水卷缩时更不容易脱落。2、双面胶带的隔离纸(离型纸)在任何时候都无需撕离。3、采样前需确认胶带粘性，高温下存放较久的胶带粘性较差，不能使用。4、为了便于区分不同样品，只有无需在间隔处做任何标记即可推知其样品编号的情形下方可将不同组样品粘贴在同一段胶带上。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，包括如下步骤：/n1)采样前，在胶带起始端胶粘面上书写样品编号；/n2)用非利手握住成卷胶带，食指位于非胶粘面下方，摘取5-20cm长度的水稻叶片，利用拇指与食指的力量将叶片近伤口端粘在胶粘面上，样品在胶带上依次由起始端向内粘贴，同组样品的叶片紧邻，不同组样品之间设置间隔；/n3)样品在胶带上排布长度达20-40cm时将胶带截断再进行下一组采样，胶带截断后将末端胶粘面反折至叶片上，以免空白胶粘面发生不必要的粘附；/n4)将粘附在一段胶带上的所有叶片伤口端浸没在清水中使叶片保持鲜活，然后继续下一组采样，直至采样完成。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，包括如下步骤：
1)采样前，在胶带起始端胶粘面上书写样品编号；
2)用非利手握住成卷胶带，食指位于非胶粘面下方，摘取5-20cm长度的水稻叶片，利用拇指与食指的力量将叶片近伤口端粘在胶粘面上，样品在胶带上依次由起始端向内粘贴，同组样品的叶片紧邻，不同组样品之间设置间隔；
3)样品在胶带上排布长度达20-40cm时将胶带截断再进行下一组采样，胶带截断后将末端胶粘面反折至叶片上，以免空白胶粘面发生不必要的粘附；
4)将粘附在一段胶带上的所有叶片伤口端浸没在清水中使叶片保持鲜活，然后继续下一组采样，直至采样完成。


2.根据权利要求1所述的一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，其特征在于，所述胶带的宽度为1-2cm。


3.根据权利要求1或2所述的一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，其特征在于，所述胶带具有以下特征：胶带粘住叶片后用手臂用力甩动叶片不发生脱落；胶带与叶片粘附后遇水粘性不被破坏；胶带与叶片粘附后置于-4～-80℃低温放置叶片不发生脱落。


4.根据权利要求3所述的一种利用胶带采集水稻叶片样品的方法，其特征在于，所述胶带自由末端胶粘面朝上水平伸出10cm不因自身重量而弯曲。


5.根据权利要求4所述的一种利用胶带采集水稻叶片样品...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙起樟，王会民，万建林，黄永兰，唐秀英，芦明，
申请(专利权)人：江西省超级水稻研究发展中心江西省农科院海南水稻育种中心，
类型：发明
国别省市：江西;36