【技术实现步骤摘要】
一种诊断猫传染性腹膜炎的新方法
本专利技术属于专利
,具体涉及引物诊断猫冠状病毒,然后用两处氨基酸位点的差异鉴别FECV与FIPV,本专利技术属于病毒检测
技术介绍
猫传染性腹膜炎(FIP)是由猫传染性腹膜炎病毒引起的一种进行性、致死性疾病,以腹腔和胸腔大量积水为主要特征,是引起猫科动物死亡的主要传染病之一。目前国内诊断的方法包括病理学检查、血清学检测和RT-PCR检测等。仅通过临床症状进行诊断的方法,需要依赖典型的临床症状表现及诊断者的经验,而患传染性腹膜炎的猫初期症状不明显,病程进展有较大差异,导致获得的结果容易不准确,往往因误诊而贻误治疗最终导致病猫死亡。确诊主要是采用RT-PCR的方法并结合临床症状,由于该种病毒高突变,不同患猫的病毒基因常不一致,所以设计的引物需要在很保守的区段,这造成现有的引物多是只能检测到猫冠状病毒,尽管有些引物可针对FIPV,但对这种引物适用的通常只有少数情况。因此我设计的引物是在对FIPV和FECV都很保守的序列,这样可以保证引物适用范围较大,且在这段目的基因 ...
【技术保护点】
1.一种诊断猫传染性腹膜炎的新方法,其特征在于:运用新设计的RT-PCR引物组扩增目的基因,之后通过测序比对两处FIPV与FECV不同的氨基酸位点,所述引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2所示,所述的两处FIPV与FECV不同的氨基酸序列如SEQ ID NO.3-4所示。/n
【技术特征摘要】
1.一种诊断猫传染性腹膜炎的新方法,其特征在于:运用新设计的RT-PCR引物组扩增目的基因,之后通过测序比对两处FIPV与FECV不同的氨基酸位点,所述引物组的核苷酸序列如SEQIDNO.1-2所示,所述的两处FIPV与FECV不同的氨基酸序列如SEQIDNO.3-4所示。
2.一种诊断猫传染性腹膜炎的新方法,该方法包括如下步骤:
(1)提取待测样本的总RNA;
(2)对所述总RNA进行逆转录获得PCR模板;用SEQIDNO.1-2所示的引物对所述PCR模板进行扩增;
(3)对扩增产物核酸电泳获得FECV或FIPV的目的条带;
(4)将目的条带胶回收测序;
(5)通过比对两个FECV与FIPV的氨基酸差异处的序列,得到结果。
3.根据权利要求2所述的检测方法,其中PCR扩增的反应程序为:
a:9...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘紫微,
申请(专利权)人:武汉康湃特生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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