一种人呼吸道合胞病毒粘膜疫苗及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种人呼吸道合胞病毒粘膜疫苗及其制备方法和应用。本发明专利技术应用大肠杆菌BL21表达纯化了由粘膜佐剂CTA1‑DD和融合前构象的F蛋白构成的融合蛋白CTA1‑DD‑F，滴鼻免疫小鼠发现，该融合蛋白可刺激特异性体液免疫应答(IgG1、IgG2a、IgA及中和抗体)和细胞免疫应答，与FI‑RSV相比，滴鼻免疫引起Th1类的免疫应答并且引起很小的肺脏病理损伤。此外，与添加CpG佐剂的F蛋白免疫组相比，CTA1‑DD‑F鼻内免疫诱导的血清中和抗体滴度更高，能够有效清除小鼠肺部的病毒。因此，CTA1‑DD粘膜佐剂适用于RSV粘膜疫苗，CTA1‑DD‑F是预防hRSV的潜在候选疫苗。

【技术实现步骤摘要】
一种人呼吸道合胞病毒粘膜疫苗及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种由粘膜佐剂CTA1-DD和融合前构象的F蛋白构成的融合蛋白及其制备方法，还涉及由该融合蛋白制备而成的人呼吸道合胞病毒粘膜疫苗和应用。本专利技术属于医药

技术介绍
人呼吸道合胞病毒(Humanrespiratorysyncytialvirus,hRSV)是1957年美国科学家从患有肺炎的儿童体内分离，2017年国际病毒分类委员会将RSV划分到肺病毒科(Pneumoviridae)正肺病毒属(Orthopneumovirus)，包含AB两种血清亚型。RSV可以通过飞沫吸附于呼吸道粘膜，引起肺炎和支气管炎，主要感染婴幼儿和老年人，感染婴幼儿较重，常常发生下呼吸道感染，严重导致死亡。儿童及成年人上呼吸道较轻。2005年全球大约有66000～199000个小于5岁的儿童死于RSV感染引起的急性下呼吸道感染，其中99％发生在发展中国家。2015年320万名患者因感染RSV住院，导致59600小于5岁的儿童死亡，其中包括27300名小于6个月的婴儿。在许多发达国家RSV的防控本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种由粘膜佐剂CTA1-DD和融合前构象的F蛋白构成的融合蛋白，命名为CTA1-DD-F，其特征在于，所述的融合蛋白的CTA1-DD-F的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种由粘膜佐剂CTA1-DD和融合前构象的F蛋白构成的融合蛋白，命名为CTA1-DD-F，其特征在于，所述的融合蛋白的CTA1-DD-F的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示。


2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白CTA1-DD-F由SEQIDNO.3所示的核苷酸序列编码。


3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白CTA1-DD-F由SEQIDNO.3所示的核苷酸序列通过大肠杆菌表达系统表达、纯化后获得。


4.一种制备如权利要求1-3任一项所述的融合蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)融合蛋白CTA1-DD-F由粘膜佐剂CTA1-DD和融合前构象的F蛋白构成，CTA1-DD-F基因由CTA1-DD和F基因通过融合PCR获得，其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，应用EcoR1和Not1两个酶切位点连在pET28a载体上，得到的表达质粒命名为pET28a-CTA1-DD-F；...

【专利技术属性】
技术研发人员：许文波，李海，曹蕾，任虎，张燕，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：北京;11