基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法技术

本发明专利技术公开了一种基于ES‑DMA‑CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法，包括如下步骤：1)准备待测目标蛋白；2)待测蛋白样品用乙酸铵缓冲液稀释；3)配制蔗糖溶液，样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率纳米柱；使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算；4)将蛋白样品分别通过进样泵注入电喷雾气溶胶颗粒发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率分析，由粒子计数器获得蛋白样品的粒径分布；5)线性回归拟合获得单体Cp

【技术实现步骤摘要】
基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法
本专利技术涉及生物化学检测
，特别是涉及一种高准确度蛋白质标准物质定值方法。
技术介绍
对通过均匀性、稳定性检验合格样料的特性值进行测量，在标准物质
称为表征化(原文为characterize，即对材料特性进行测量)；由计量权威部门对表征化获得的样料特性的量值进行计量学溯源性(以下简称溯源性)确认和相应测量不确定度评定合理性确认，在标准物质
称为定值(原文为certify，即对测量获得的结果进行认证确认，在其它
一般称为认证)。因此，对有证标准物质的定值，实际上应分为两步：首先是对经过均匀性、稳定性检验合格的样料特性值进行测量，也就是表征化；然后是对测量结果的溯源性和测量不确定度评定的合理性进行有效性确认。随着生命科学和生物产业的发展，蛋白质标准物质的应用越来越广泛，需求也越来越大。蛋白质含量标准物质被广泛应用于农业、食品、临床等各个领域，蛋白质的准确测量关系到国家安全、大众健康和贸易公平，在临床检验、生物医药等重要领域起着关键作用。面对动态的生命活动过程本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)准备待测目标蛋白；/n(2)待测的蛋白样品用乙酸铵缓冲液进行稀释；/n(3)配制蔗糖溶液，将样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率纳米柱；使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算；/n

【技术特征摘要】
1.一种基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)准备待测目标蛋白；
(2)待测的蛋白样品用乙酸铵缓冲液进行稀释；
(3)配制蔗糖溶液，将样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率纳米柱；使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算；



其中，Dd是液滴直径，Ds是干燥的蔗糖颗粒直径，通过电喷雾-差分电迁移率-粒子计数进行测量；Cs是溶液中已知的蔗糖浓度(V/V)；
(4)将配置的蛋白样品分别通过进样泵注入电喷雾气溶胶颗粒发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率分析，由粒子计数器获得蛋白样品的粒径分布；蛋白样品呈现单体，二聚体和三聚体的粒径分布；
(5)根据电喷雾-差分电迁移率-粒子计数对蛋白样品的单体和二聚体以及三聚体的测量以及液滴尺寸的测量；根据泊松分布，可以通过线性回归拟合获得单体Cp1和二聚体Cp2的绝对数浓度，二聚体数No2与单体数No1之比与溶液中蛋白质浓度之间的关系如式2所示，然后使用式3确定三聚体浓度Cp3；通过求和来确定待测目标蛋白质样品的原始浓度，参照式4；



其中，m是稀释因子；Cp1和Cp2分别是溶液中的固有单体和二聚体蛋白质数量浓度；对于式2，不同稀释度下，观察到的No2/No1与1/2m的线性关系曲线产生斜率VdCp1和截距Cp2/Cp1；



Cp＝Cp1+2Cp2+3Cp3(4)


2.根据权利要求1所述的基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：米薇，胡志上，刘洋，武利庆，王晶，
申请(专利权)人：中国计量科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11