转双价抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种转OsPGIP1和GAFP2双价基因抗纹枯病水稻品系WYJ24‑PG‑10‑1的检测方法，属于生物技术领域。本发明专利技术是利用转化体WYJ24‑PG‑10‑1中含外源基因OsPGIP1和GAFP2的T‑DNA表达框在水稻染色体上插入片段序列和插入片段RB端旁侧特异序列SEQ ID NO:1，并基于SEQ ID NO:1序列，建立的特异性PCR 扩增鉴定技术。PCR所用正向载体引物PG‑S1依据SEQ ID NO:1中1‑1301位序列设计，反向基因组引物 PG‑S2依据SEQ ID NO:1中1302‑1900位序列设计，正向基因组引物PG‑S3依据T‑DNA插入位置上游699bp处设计。根据是否扩增得到PG‑S1 PG‑S2引物组合M、PG‑S3 PG‑S2引物组合N的目标片段判断株系中是否含外源OsPGIP1和GAFP2双价基因，该PCR方法可作为鉴定转基因水稻品系WYJ24‑PG‑10‑1及该品系的衍生系的有效手段。

Detection method of transgenic rice line wyj24-pg-10-1 with bivalent resistance to sheath blight

【技术实现步骤摘要】
转双价抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1的检测方法
本专利技术属于生物
，特别是涉及鉴定OsPGIP1和GAFP2双价基因抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1及其衍生品系的检测方法及其所依赖的转化体特异序列。
技术介绍
水稻是全球主要的粮食作物之一，在热带和亚热带地区广泛种植。我国水稻年产量约占全国粮食总产量的一半。水稻病害造成了水稻减产，并且严重影响了水稻的品质和商品价值。水稻纹枯病是危害水稻的一个重要病害，在世界各产稻区广泛分布。伴随着矮秆品种的推广和肥料的大量使用，纹枯病的发生日益严重。纹枯病主要危害叶鞘和叶片，使水稻结实率降低，瘪粒增加，一般可造成15％～20％的减产，严重时甚至减产60％～70％。目前纹枯病的防治主要依赖化学农药，但在田间实际操作时发现，水稻纹枯病一般在分蘖期和抽穗期前后危害严重，在这个时期水稻群体比较茂密，药剂使用时难以喷施到中下部叶鞘，以至于防治效果不佳。有研究显示，近年来纹枯病在中国南方部分水稻种植区已经上升为水稻第一大病害，对水稻产量和品质带来了很大影响。而在水稻品种及野生稻中可以利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种转OsPGIP1和GAFP2双价基因抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1的检测方法，其特征在于，利用转化体WYJ24-PG-10-1 中含外源基因OsPGIP1和GAFP2的T-DNA表达框在水稻染色体上插入片段序列和插入片段RB 端旁侧序列SEQ ID NO: 1，并基于SEQ ID NO: 1序列，建立特异性PCR扩增引物；再利用特异性PCR 扩增引物进行检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种转OsPGIP1和GAFP2双价基因抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1的检测方法，其特征在于，利用转化体WYJ24-PG-10-1中含外源基因OsPGIP1和GAFP2的T-DNA表达框在水稻染色体上插入片段序列和插入片段RB端旁侧序列SEQIDNO:1，并基于SEQIDNO:1序列，建立特异性PCR扩增引物；再利用特异性PCR扩增引物进行检测。


2.根据权利要求1所述的一种转OsPGIP1和GAFP2双价基因抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1的检测方法，其特征在于，所述特异性PCR扩增引物包括：
正向载体引物PG-S1:5'-CACCCCCATATGACTTATCCTACTGGATTC-3'；
反向基因组引物PG-S2:5'-CCAGCACTTACTGTTCGGTTT-3'；
正向基因组引物PG-S3:5'-GGCTGGAAGTAGTTGAAGGC-3'。


3.根据权利要求2所述的一种转OsPGIP1和GAFP2双价基因抗纹枯病水稻品系WYJ24-PG-10-1的检测方法，其特征在于，
所述正向载体引物PG-S1为依据SEQIDNO:1中1-1301位序列设计的正向载体引物；
所述反向基因组引物PG-S2为依据SEQIDNO:1中1302-1900位序列设计的反向基因组引物；
所述正向基因组引物PG-S3为依据T-DNA插入位置上游699bp处设计的正向基因组引物；
所述正向载体引物PG-...

【专利技术属性】
技术研发人员：左示敏，单文峰，冯志明，张亚芳，陈宗祥，尚红岩，潘学彪，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32