在工业工艺中快速检测细菌孢子的方法技术

描述一种通过测量随时间变化的微生物代谢活性来检测细菌孢子存在的方法。通过检测指示孢子萌发的代谢活性的爆发，将孢子与营养细胞和其它微生物区分开来。这种方法可用于在典型工作班次的时间范围内检测诸如造纸系统的商业工艺系统中的细菌孢子。

Rapid detection of bacterial spores in industrial process

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在工业工艺中快速检测细菌孢子的方法相关申请的交叉引用本申请作为PCT国际专利申请于2017年7月12日提交，并且与本申请同时(在中国受理局)提交的美国专利申请“一种用于检测细菌孢子的快速方法”序列号(律师代理案号：00163.3220W001)所公开的主题有关，其主题通过引用并入本申请。
技术介绍
内生孢子是由厚壁菌门中的特定细菌种类产生的休眠、坚韧、非生殖结构。当处于营养状态的细菌细胞受到胁迫或缺乏营养时，就会产生内生孢子或孢子。内生孢子具有非常低的代谢率，并因此不能通过典型地用于快速检测营养细菌细胞的方法进行检测。进一步地，孢子极难杀死，因为它们进化成能在诸如UV、热、消毒剂、干燥和饥饿等恶劣条件下生存。一旦暴露于有利的条件和营养下，所述孢子萌发产生营养细胞。产孢子细菌是有问题的，因为它们会引起人类和动物疾病、食品和饮料变质并导致生物膜的持久化。引起特别关注的产孢子细菌菌株是在芽孢杆菌和梭状芽胞杆菌属中的产孢子细菌菌株。两者都是革兰氏阳性、杆状细菌，其包括对人类有害的种类。炭疽杆菌产生炭疽毒素，并且蜡状芽孢杆菌引起食品中毒。肉毒梭菌引起肉毒中毒(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测样品中的细菌孢子并将其与营养细胞和其它微生物区分开来的方法，包括：/n制备供测试细菌孢子的存在的样品；/n测量所述样品中微生物代谢活性的基线水平；/n在启动萌发的条件下孵育所述样品；/n监测所述样品中随后的微生物代谢活性的水平；以及/n孵育约5至8小时后，检测所述样品中是否存在微生物代谢活性的爆发。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种检测样品中的细菌孢子并将其与营养细胞和其它微生物区分开来的方法，包括：
制备供测试细菌孢子的存在的样品；
测量所述样品中微生物代谢活性的基线水平；
在启动萌发的条件下孵育所述样品；
监测所述样品中随后的微生物代谢活性的水平；以及
孵育约5至8小时后，检测所述样品中是否存在微生物代谢活性的爆发。


2.根据权利要求1所述的方法，其中通过测量三磷酸腺苷(ATP)确定微生物代谢活性。


3.根据权利要求1所述的方法，其中通过代谢染料检测微生物代谢活性。


4.根据权利要求1所述的方法，其中所述制备包括：
收集包含未知量的孢子、营养细胞或孢子和营养细胞两者的样品；
如果是固体，则分解所述样品；以及
将所述样品放置在盘子或容器中。


5.根据权利要求4所述的方法，其中从硬表面、液体、浆液(淀粉、碳酸盐、粘土或TiO2)或纸制品中收集所述样品。


6.根据权利要求5所述的方法，其中所述硬表面选自由食品和饮料加工设备、管道、储罐、蒸发器、喷嘴、乳品加工设备、储奶罐、牛奶车、挤奶设备、工作台面、烹调器具表面、诸如洗脸盆和马桶把手的浴室表面、照明开关面板、门把手、呼叫按钮、电话手柄、遥控器、台式机、患者围栏、抓杆、手术器械、包括管道、箱、压头箱、断流塔、节约装置叶片以及成型网的造纸厂内部设备组成的组。


7.根据权利要求6所述的方法，其中所述液体选自由工艺水、进水、冷却塔水、处理和未处理废水、纸料、稀原料和稠原料、白水、吸水箱水、塔盘水、水果和蔬菜水槽水、蛋白质工艺水、水培水或海鲜养殖水以及农业用水组成的组。


8.根据权利要求6所述的方法，其中所述纸制品选自由诸如用于食品接触和非食品接触等级的成品纸制品和成品板制品的纸制品；用于手术或医疗用途的盖布；无菌包装容器；塑料食品和饮料容器；食品罐；铝和PET饮料容器；袋、薄膜以及气调包装组成的组。


9.根据权利要求2中任一项所述的方法，其中所述测量包括：
添加荧光素酶和荧光素至所述样品；以及
以相对光单位(RLU)测量光发射。


10.根据权利要求1至5以及9中任一项所述的方法，其中所述孵育包...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·伦德，L·赖斯，
申请(专利权)人：埃科莱布美国股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US