一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法技术

本发明专利技术属于指纹图谱建立方法技术领域，具体涉及一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法。本发明专利技术提供了一种小儿解表颗粒特征图谱的构建方法，包括配制黄芩苷对照品溶液及小儿解表颗粒供试品溶液，进一步的，通过高效液相色谱测定小儿解表颗粒及对照品液相色谱，色谱条件：采用C18柱、DAD检测器，流动相为以乙睛‑0.1％磷酸溶液，波长为220‑350nm，柱温25‑45℃，通过高效液相色谱法测定，得到小儿解表颗粒的特征图谱，本发明专利技术的优点是能有效的监控不同批次间小儿解表颗粒的质量，方法具有精密度高、重现性好等特点，有利于全面监控产品的质量。

HPLC fingerprint of Xiaoerjiebiao granules

【技术实现步骤摘要】
一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法
本专利技术属于指纹图谱建立方法
，具体涉及一种中成药小儿解表颗粒HPLC指纹图谱的构建方法。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。小儿解表颗粒是纯中药制剂，由金银花、连翘、牛蒡子(炒)、蒲公英、黄芩、防风、紫苏叶、荆芥穗、葛根、人工牛黄十种药材构成。具有宣肺解表，清热解毒的功效。主要用于小儿外感风热所致的感冒，症见发热恶风、头痛咳嗽、鼻塞流涕、咽喉痛痒。现行标准收载于《中国药典》2015年版一部。标准只有黄芩苷一种成分的含量测定，测量成分单一，难以全面有效的控制小儿解表颗粒的质量。
技术实现思路
本专利技术对小儿解表颗粒进行了指纹图谱试验研究，建立了指纹图谱的质量检测方法，并对所建立方法进行了精密度、重复性等方法学验证试验，结果表明本专利技术中检测方法稳定可行。本专利技术克服了小儿解表颗粒现在执行标准中缺少质量检测方法的不足，以及现有技术中检测方法只能反映极少药物成分质量情况的片面性，建立的指纹图谱测定方法是小儿解表颗粒质量控制方法的有效补充，能反映出所含化学成分的种类和数量，能有效表征其质量，有利于全面控制产品的质量基于上述研究结果，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术第一方面，提供一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，所述指纹图谱建立方法包括以下步骤：(1)对照品溶液及供试品溶液的配制<br>对照品溶液的配制：称定绿原酸、咖啡酸、葛根素、大豆苷、升麻苷、野黄芩苷、大豆苷元、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷、黄芩素、芒柄花素、汉黄芩素对照品，加入甲醇溶液进行配制；供试品溶液的配制：称定小儿解表颗粒加入甲醇进行超声提取，之后取续滤液作为供试品溶液；(2)分别通过高效液相色谱进行对供试品及对照品进行测定。优选的，所述供试品溶液的制备，具体步骤如下：取小儿解表颗粒研细，取1～4g小儿解表颗粒加入20～50mL甲醇，超声处理30-60分钟后放冷，再次称重加入甲醇补齐失重的部分，用0.22-0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，得到所述供试品溶液。优选的，所述高效液相采用C18色谱柱、DAD检测器。进一步优选的，所述色谱柱为AgilentZORBAXXDB-C18柱。优选的，所述高效液相检测波长为220-350nm，柱温25-45℃，理论板数均不低于10000。进一步优选的，所述检测波长为250nm。本专利技术的最佳紫外吸收波长为250nm。采用本专利技术中方法用检测器对小儿解表颗粒进行测定，根据三维扫描图中所有色谱峰出现最大吸收的检测波长结果分别调取各波长下色谱图，当检测波长250nm为时，特征峰数目较多，各峰面积较高且各特征峰之间分离效果也最好。优选的，所述高效液相流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)。优选的，所述高效液相采用梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下：0～5min，7％A；5～20min，7％A～10％A；20～23min，10％A～14％A；23～45min，14％A～15％A；45～58min，15％A～19％A；58～65min，19％A～22％A；65～75min，22％A～28％A；75～90min，28％A～37％A；90～100min，37％A～80％A；100～110min，80％A～7％A。本专利技术目的在于提供一种小儿解表颗粒的指纹图谱建立方法，为了获得对药品具有质量评价意义的分析条件，本专利技术中针对小儿解表颗粒的液相色谱分析条件进行了深入了研究，通过进一步优化流动相及洗脱条件，能够分析得到36个共有峰，这在指纹图谱构建领域也属于非常良好的技术效果。目前现行的小儿解表质量评价方法中，仅采用黄芩苷一种成分作为指标性成分含量测定的控制，难以全面表现药物制剂的质量状况。本专利技术在获得36个共有峰的基础上，进一步筛选了绿原酸、咖啡酸、葛根素、大豆苷、升麻苷、野黄芩苷、大豆苷元、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷、黄芩素、芒柄花素、汉黄芩素等13种成分作为参照对象，并且上述成分在该检测条件下具有良好检测精确度，对于全面评价小儿解表颗粒的质量具有重要的意义。本专利技术第二方面，提供第一方面所述小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法得到的小儿解表颗粒的指纹图谱在质量控制方面的应用。本专利技术第三方面，提供一种小儿解表颗粒的质量控制方法，所述质量控制方法包括以下步骤：(1)按照第一方面所述指纹图谱建立方法获取小儿解表颗粒的指纹图谱及待测样品图谱；(2)将待测样品图谱与小儿解表颗粒指纹图谱进行相似度比较，相似度不低于0.90为质量合格产品。优选的，所述指纹图谱建立需要采集至少10批次的样品进行建立。优选的，所述相似度比较采用国家药典委员会相似度评价系统(2012版)。与现有技术相比，本公开的有益效果是：(1)用本专利技术所提供的方法能有效的监控不同批次间小儿解表颗粒的质量，方法具有精密度高、重现性好等特点，有利于全面监控产品的质量。(2)本专利技术的质量检测方法以绿原酸、咖啡酸、葛根素、大豆苷、升麻苷、野黄芩苷、大豆苷元、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷、芒柄花素、黄芩素和汉黄芩素为对照，建立的小儿解表颗粒特征图谱注重各个特征峰的顺序和关系，能全面监控产品的整体质量面貌特征，方法科学可靠。附图说明构成本公开的一部分的说明书附图用来提供对本公开的进一步理解，本公开的示意性实施例及其说明用于解释本公开，并不构成对本公开的不当限定。图1为实施例1中13种对照的HPLC图谱。图2为实施例1中小儿解表颗粒15批次HPLC特征图谱匹配叠加图。图3为实施例1中小儿解表颗粒HPLC对照特征图谱；其中，图中峰4为绿原酸，峰6为咖啡酸，峰7为葛根素峰，峰11为大豆苷峰，峰12为升麻苷峰，峰17为野黄芩苷峰，峰24为大豆苷元峰，峰26为黄芩苷峰，峰27为连翘苷峰，峰28为牛蒡苷峰，峰33为黄芩素峰，峰34为芒柄花素峰，峰36为汉黄芩素峰。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。正如
技术介绍
所介绍的，针对现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法。为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本专利技术的技术方案。实施例1小儿解表颗粒HPLC特征图谱测定方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述指纹图谱建立方法包括以下步骤：/n(1)对照品溶液及供试品溶液的配制/n对照品溶液的配制：称定绿原酸、咖啡酸、葛根素、大豆苷、升麻苷、野黄芩苷、大豆苷元、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷、黄芩素、芒柄花素、汉黄芩素对照品，加入甲醇溶液进行配制；/n供试品溶液的配制：称定小儿解表颗粒加入甲醇进行超声提取，之后取续滤液作为供试品溶液；/n(2)分别通过高效液相色谱进行对供试品及对照品进行测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述指纹图谱建立方法包括以下步骤：
(1)对照品溶液及供试品溶液的配制
对照品溶液的配制：称定绿原酸、咖啡酸、葛根素、大豆苷、升麻苷、野黄芩苷、大豆苷元、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷、黄芩素、芒柄花素、汉黄芩素对照品，加入甲醇溶液进行配制；
供试品溶液的配制：称定小儿解表颗粒加入甲醇进行超声提取，之后取续滤液作为供试品溶液；
(2)分别通过高效液相色谱进行对供试品及对照品进行测定。


2.如权利要求1所述小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备，具体步骤如下：取小儿解表颗粒研细，取1～4g小儿解表颗粒加入20～50mL甲醇，超声处理30-60分钟后放冷，再次称重加入甲醇补齐失重的部分，用0.22-0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，得到所述供试品溶液。


3.如权利要求1所述小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述高效液相采用C18色谱柱、DAD检测器。


4.如权利要求3所述小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述色谱柱为AgilentZORBAXXDB-C18柱。


5.如权利要求1所述小儿解表颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述高效液相检测波长为220-350nm，柱温25-45℃，理论板数均不低于10000；优选的，所述检测波长为250nm。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏明，丁力，张秋红，聂磊，张叶，
申请(专利权)人：淄博市食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：山东;37