使用组织样本的癌的检测方法技术

本发明专利技术提供使用组织样本的癌的检测方法。具体而言，例如提供一种在具有癌的内脏器官或组织中检测癌的方法，其包括：准备从所述内脏器官或组织中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。

Cancer detection using tissue samples

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用组织样本的癌的检测方法
本专利技术提供使用组织样本的癌的检测方法。
技术介绍
已知线虫对癌患者的尿样显示出引诱行为、对健康人的尿样显示出回避行为，已开发出基于线虫的趋性行为的癌的诊断方法(专利文献1)。在该评价系统中，将尿样稀释至约10倍，在线虫对稀释后的样品显示出引诱行为的情况下，可以评价为该样品所来源的对象具有癌。另外，在稀释倍率高的情况下，评价的精度当然大幅降低(专利文献1)。现有技术文献专利文献专利文献1：WO2015/088039
技术实现思路
本专利技术人认为需要能够进行癌组织与正常组织的鉴别(例如，癌与癌周围的正常组织的鉴别)的技术开发。本专利技术提供使用组织样本的癌的检测方法。本专利技术人使用癌的组织样本，以癌和癌周围的正常组织的细胞溶解物作为被测试样，对线虫的趋性行为进行了确认。其结果是，线虫对癌组织的细胞溶解物显示出引诱行为，另一方面，对癌周围的正常组织的细胞溶解物显示出回避行为。本专利技术是基于这样的见解的专利技术。即，根据本专利技术，提供例如以下的专利技术。[1]一种在组织样本中检测癌的方法，其包括：准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。[2]一种在组织样本中检测非癌的部分(非癌部)的方法，其包括：准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。[3]一种在组织样本中对癌的区域与非癌的区域进行鉴别的方法，其包括：准备从上述组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物和预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。[4]一种鉴别细胞溶解物是由包含癌细胞的组织样本得到、还是由不含癌细胞的组织样本得到的方法，其包括：准备组织样本的细胞溶解物；以及评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。[5]一种确定组织样本不含癌的方法，其包括：准备上述组织样本的细胞溶解物；以及评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。[6]如上述[1]～[5]中任一项所述的方法，其中，评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为是指：以相对于10μm的组织切片为1～10mL的比例将组织切片与溶剂混合，得到细胞溶解物；以及以105～107的范围的稀释倍率对细胞溶解物进行稀释，评价线虫对所得到的各稀释物的趋性行为。附图说明图1示出实施例1中实施的使用线虫的引诱行为的评价系统的示意图。在该评价系统中，在含有琼脂培养基的培养皿上评价线虫对尿样的趋性行为。图2示出实施例1中使用的肿瘤样本的切片。图3示出癌组织的细胞溶解物对线虫的引诱行为的评价结果。具体实施方式本说明书中，“线虫”是指秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans)。线虫是在生物研究中作为模型生物在世界范围内广泛饲养、研究的常见生物，具有容易饲养、嗅觉优良的特征。本说明书中，“癌”是指肾癌、胃癌、子宫癌、肝癌、乳腺癌、直肠结肠癌、食道癌、胰腺癌、前列腺癌、胆管癌、肺癌、血癌、白血病、淋巴瘤等癌种。本说明书中，“对象”是指哺乳动物、例如人。对象可以是具有癌的对象、或者疑似具有癌的对象(以下有时仅称为“疑似为癌的对象”)。本专利技术中，“组织样本”是指从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分、特别是从对象获得的内脏器官或组织的一部分。作为组织样本，可以列举通过活检(例如，内窥镜检查时得到的活检)得到的样本、以及手术时可得到的样本(例如，通过手术被摘除的内脏器官或组织)。组织样本可以为分离出的细胞或细胞团块。多数情况下，“组织样本”可以是疑似为癌的内脏器官或组织的全部或一部分。本说明书中，“组织样本”可以包含由单个的内脏器官或组织分离出的单个或多个部分，也可以包含由多个内脏器官或组织(同一患者或不同患者)分别得到的单个或多个部分。本说明书中，“约”是指包含其后所接续的数值的上下10％以内的数值、或者上下5％以内的数值。本说明书中，“趋性行为”是指引诱行为或回避行为。引诱行为是指缩小与某种物质的物理距离的行为，回避行为是指扩大与某种物质的物理距离的行为。将诱发引诱行为的物质称为引诱物质，将诱发回避行为的物质称为回避物质。线虫(C.elegans)具有通过嗅觉被引诱物质引诱、并避开回避物质的性质。将被引诱物质引诱的行为称为引诱行为，将避开回避物质的行为称为回避行为。另外，将引诱行为和回避行为合称为趋性行为。线虫对癌患者的尿样显示出引诱行为，另一方面，对健康人的尿样显示出回避行为。本说明书中，“检测癌的方法”或类似的表述可以换称为“用于癌检测的线虫的趋性行为的评价方法”、“得到与癌的有无相关的预备信息的方法”、“得到用于癌的诊断的预备信息的方法”、“癌的诊断的预备方法”、或者“检测癌细胞的方法”。本专利技术中得到的信息可作为中间信息成为医生的诊断基础。[1]根据本专利技术，提供一种在组织样本中检测癌的方法(或者得到与癌的有无相关的预备信息的方法、得到用于癌的诊断的预备信息的方法、癌的诊断的预备方法、检测癌细胞的方法或癌的诊断方法)，其包括：(1)准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及(2)评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。本专利技术中，组织样本可以是从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分。在本专利技术的某一方式中，对象可以设定为人对象。在本专利技术的某一方式中，对象可以是例如疑似为癌的对象。在本专利技术的某一方式中，对象可以是例如具有癌的对象。在本专利技术的某一方式中，可以是需要考察癌的有无的对象。在本专利技术的特定的对象中，对象可以是手术中的对象、特别是癌摘除手术中的对象。(1)准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物上述(1)中，疑似为癌的区域可以由从对象摘除的组织样本中分离。在某一方式中，疑似为癌的区域可以由从对象摘除的疑似具有癌的组织样本中分离得到、或者由从对象摘除的具有癌的组织样本中分离得到。组织样本只要以约(数mm)×(数mm～数10mm)×10μm厚的量存在，就足以进行评价。例如，在厚度为10μm的情况下，切片的面积可以设定为1mm2以上、2mm2以上、3mm2以上、4mm2以上、5mm2以上、6mm2以上、7mm2以上、8mm2以上、9mm2以上、10mm2以上、15mm2以上、20mm2以上、30mm2以上、40mm2以上或50mm2以上，并可以设定为1000mm2以下、900mm2以下、800mm2以下、700mm2以下、600mm2以下、500mm2以下、400mm2以下、300mm2以下、200mm2以下或100mm2以下。上述(1)中，细胞溶解物可以通过本领域技术人员公知的各种方法而得到。根据本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在组织样本中检测癌的方法，其包括：/n准备所述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及/n评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170711 JP 2017-1351741.一种在组织样本中检测癌的方法，其包括：
准备所述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。


2.一种在组织样本中检测非癌的部分(非癌部)的方法，其包括：
准备所述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。


3.一种在组织样本中对癌的区域与非癌的区域进行鉴别的方法，其包括：
准备从所述组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物和预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线...

【专利技术属性】
技术研发人员：广津崇亮，西俣宽人，吉永拓真，
申请(专利权)人：广津生物科学株式会社，公益社团法人鹿儿岛共济会南风病院，
类型：发明
国别省市：日本;JP