一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，包括醇提、粗滤、微滤、超滤膜纯化、纳滤膜浓缩、浓缩液干燥处理等步骤。本方法采用膜分离技术，不仅能避免传统植物提取物分离纯化过程繁琐、有机溶剂用量大、能耗高的缺点，且能提高广金钱草总苷的纯化效率及其总苷提取物中芹菜素碳苷类成份的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法
本专利技术属于膜分离
，具体涉及一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法。
技术介绍
广金钱草Desmodiumstyracifolium(Osbeck)Merr，豆科马蹄金属植物，又名落地金钱、铜钱草、马蹄香等，主要分布在广东、广西、福建、湖南等省区。常用其地上部分，具有清热利湿、利尿通淋的效用，用于肾炎水肿、尿路结石、尿路感染、胆囊结石、黄疸肝炎等症的医治。食品医药行业常对广金钱草干燥地上部分进行提取分离纯化，生产出含有广金钱草固有特性或活性成份的总苷类提取物，以进行后续的产品开发和生产。黄酮碳苷是指其糖配基直接连接在C6-C3-C6骨架的黄酮苷类化合物，其大多连接在A环的C-6和C-8位，因母核各异，其种类也不尽相同。近年来，黄酮碳苷的生物活性引起了越来越多的关注。从文献报道来看，芹菜素碳苷和木犀草素碳苷较为常见，其糖配基以葡萄糖、鼠李糖、木糖或阿拉伯糖等居多，通常具有较好的抗炎、保肝、降糖和抗肿瘤等生理活性。芹菜素碳苷类成份在广金钱草总苷中含量较多；其中典型的化合物包括：维采宁-2（Vicenin-2），夏佛塔苷（Schaftoside），异牡荆苷（Isovitexin）等。此类化合物具有抗氧化、抗炎、抗血小板凝聚、抗痉挛、改善功能性胃肠道不适、抗急慢性肝损伤等活性。目前，广金钱草总苷的提取通常采用下述工艺：原料粗碎、用水或低碳醇溶剂浸泡、加热回流提取或超声提取、过滤和离心、沉淀、浓缩、大孔树脂吸附分离、溶剂萃取等，最后减压蒸发浓缩与溶剂回收、真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥。这种传统提取分离工艺存在提取过程繁琐、有机溶剂用量大、产品得率低、耗能大、污染重、成本高等缺陷。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的不足，本专利技术的首要目的在于提供一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，该方法不仅能避免传统植物提取物分离纯化过程繁琐、有机溶剂用量大、能耗高的缺点，且能提高广金钱草总苷的纯化效率及其总苷提取物中芹菜素碳苷类成份的含量。本专利技术是通过以下技术方案实现：一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，包括如下步骤：（1）将广金钱草药材粗碎，按固液比1:10~20加入质量浓度为50~80%乙醇提取1~2次，得到提取液，静置；（2）采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，滤液再以0.2~0.45µm微滤膜过滤，获得微滤液；（3）选取截留分子量3-10万的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液；（4）选用截留分子量在100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液；（5）将膜浓缩液干燥处理，得到广金钱草总苷。本专利技术先采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，以除去提取液中的细小颗粒；滤液再通过0.2~0.45µm微滤膜过滤以除去悬浮粒子、多糖、蛋白、果胶、纤维等大分子成分，目的是防止悬浮颗粒以及大分子对后续超滤膜造成不可逆的破坏。本专利技术在粗滤和微滤后，进一步采用超滤膜进行分离纯化，超滤膜的截留分子量对分离纯化的效果有较大影响。本专利技术通过研究表明，当分子量>10万，几乎与微滤效果相当，起不到分离纯化的作用；分子量<3万，不利于一些较大分子量的活性成分的富集。因此，本专利技术超滤膜的截留分子量优选为3-10万。本专利技术在超滤后再选择截留分子量为100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，以用来去除溶剂或无机盐类，研究表明，本专利技术的广金钱草总苷在纳滤膜过滤时损失很少，而溶剂膜通量高，膜浓缩效果好。优选地，步骤（1）中，所述提取方式为加热回流提取或浸提，所述提取的温度为80~95℃，提取时间为1~2h。优选地，步骤（3）中，所述超滤处理的温度为20-25℃，压力为1.0~3.0MPa，膜通量为50-180L/m2·h。优选地，步骤（4）中，所述浓缩操作的温度为25-35℃，压力为1.0~5.0MPa，膜通量在50-120L/m2·h。优选地，步骤（5）中，所述干燥处理为喷雾干燥或冷冻干燥。更优选地，所述喷雾干燥的的进风温度设为210~215℃，喷雾空气流量500~540L·h-1；进料温度为25~30℃，抽气机输出80~85%；泵输出10~15%。更优选地，所述冷冻干燥的冷阱温度-45~-55℃，真空度为0.1~0.2MPa。本专利技术与现有技术相比，具有如下有益效果：本专利技术工艺基于膜分离技术，包括醇提、粗滤、微滤、超滤膜纯化、纳滤膜浓缩、浓缩液干燥处理等步骤，避免了传统蒸发浓缩工艺的能耗高的缺点，提高了广金钱草总苷提取物的加工效率；本专利技术的膜分离技术在不改变目标产品的特征成份的前提下，可以提高广金钱草总苷部位中芹菜素碳苷类有效成份的纯度；本专利技术的膜分离技术所用的膜精度高，广金钱草中有效成份损失少，主要特征成份维采宁-2，夏佛塔苷，异牡荆苷的纯度较高；本专利技术避免了传统分离纯化工艺中所需的大量有机溶剂，采用膜处理方法，生态环保、能耗小、提取得率高、工艺简单、分离效率高。具体实施方式下面通过具体实施方式来进一步说明本专利技术，以下实施例为本专利技术具体的实施方式，但本专利技术的实施方式并不受下述实施例的限制。实施例1：（1）称取0.5kg广金钱草粗碎约为1-2cm，置于10L圆底烧瓶，加入7.5L70%乙醇水溶液后，电热套加热并维持在80-90℃，间歇振摇，浸提时间2h，稍冷，倾倒出一次浸提液；继续将上述广金钱草残渣进行二次浸提，采用固液比1:15，加入70%乙醇水溶液，加热，控制温度在80-90℃，浸取过程中间歇振摇，浸提时间为1.5h，稍冷，倾倒出二次浸提液；合并两次浸提液，静置，过夜；（2）采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对上述浸提液进行浸入式粗滤处理，滤液再以0.2µm微滤膜过滤，获得微滤液，其中固形物含量≥2.5％；（3）选取截留分子量3万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液，其中固形物含量≥1.2％，超滤处理的温度为25℃，压力为2.0MPa，膜通量为100L/m2·h；（4）选用截留分子量在1000Da纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液，其中固形物含量≥3.2％，浓缩操作的温度为25℃，压力为3.0MPa，膜通量在80L/m2·h；（5）将膜浓缩液采用离心浓缩后冷冻干燥，冷冻干燥的冷阱温度-55℃，真空度为0.1MPa，得到广金钱草总苷11.66g。本实施例对不同膜过滤前后的滤液进行了HPLC指纹图谱分析，由结果分析表明，膜浓缩保留了绝大部分的活性成分，而纳滤膜处理损失的活性成分很少。实施例2：选取截留分子量5万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，其余同实施例1，得到广金钱草总苷13.9g。实施例3：选取截留分子量10万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，其余同实施例1，得本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）将广金钱草药材粗碎，按固液比1:10~20加入质量浓度为50~80% 乙醇提取1~2次，/n得到提取液，静置；/n（2）采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，滤液再以0.2~0.45µm微滤膜过滤，获得微滤液；/n（3）选取截留分子量3-10万的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液；/n（4）选用截留分子量在100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液；/n（5）将膜浓缩液干燥处理，得到广金钱草总苷。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将广金钱草药材粗碎，按固液比1:10~20加入质量浓度为50~80%乙醇提取1~2次，
得到提取液，静置；
（2）采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，滤液再以0.2~0.45µm微滤膜过滤，获得微滤液；
（3）选取截留分子量3-10万的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液；
（4）选用截留分子量在100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液；
（5）将膜浓缩液干燥处理，得到广金钱草总苷。


2.根据权利要求1所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述提取方式为加热回流提取或浸提。


3.根据权利要求2所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述提取的温度为80~95℃，提取时间为1~2h。


4.根据权利要求1所述的一种基于膜分离技术制...

【专利技术属性】
技术研发人员：李坤平，杨坤，郭姣，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44