一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法。本发明专利技术将差向异构酶加入到二肽对映异构体初始溶液中进行催化反应，利用圆二色光谱检测催化反应前后二肽对映异构体溶液的CD信号强度变化，若有变化，代表差向异构酶有活性，若无变化，代表差向异构酶无活性。本发明专利技术利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法无需衍生反应、操作简便、重现性好、误差范围小、灵敏度高、线性范围宽、连续可测、可用于原位检测，为手性识别的研究提供了一个新的领域。

A method for rapid measurement of epiisomerase activity by circular dichroism

【技术实现步骤摘要】
一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法
本专利技术涉及一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法，属于生物

技术介绍
大多数氨基酸具有手性中心，以D/L型对映异构体的形式存在。两种对映异构体的生物化学性质、生理活性不同，在生物过程中发挥不同的作用。小肽指由2～3个氨基酸组成的寡肽，由于氨基酸的手性不同，小肽也以D/L型对映异构体的形式存在，如L-Ala-D-Glu与L-Ala-L-Glu互为对映异构体。差向异构酶是催化结合于同一碳原子的基团的立体构型发生转位反应的一类酶，其中，L-Ala-D/L-Glu差向异构酶催化L-Ala-D-Glu与L-Ala-L-Glu的互变。大肠杆菌K12的基因YcjG编码一个典型的L-Ala-D/L-Glu差向异构酶YcjG。目前常用的L-Ala-D/L-Glu差向异构酶活性的检测方法有核磁共振法(1HNMRAssay)、电喷雾电离质谱法(ESI-MSAssay)、酶联反应法(CoupledEnzymeAssay)。这些传统方法需要复杂的前处理、实验步骤繁琐、分析时间长，需要专业的技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用圆二色光谱定量测定二肽对映异构体的方法，其特征在于，包括步骤如下：/n(1)利用圆二色光谱测定已知浓度的二肽对映异构体标准溶液的CD信号强度，按照式1绘制CD信号强度-二肽对映异构体浓度的标准曲线：/nCD＝a×(C

【技术特征摘要】
1.一种利用圆二色光谱定量测定二肽对映异构体的方法，其特征在于，包括步骤如下：
(1)利用圆二色光谱测定已知浓度的二肽对映异构体标准溶液的CD信号强度，按照式1绘制CD信号强度-二肽对映异构体浓度的标准曲线：
CD＝a×(CL-form-CD-form)+b(式1)，
式1中，CD为CD光谱峰值处的CD信号强度，CL-form为L型二肽的浓度，CD-form为D型二肽的浓度，a、b为线性系数；
(2)利用圆二色光谱测定待检测二肽对映异构体溶液的CD信号强度，测定待检测二肽对映异构体溶液中二肽对映异构体的总浓度，按照式3和式4计算得出待检测二肽对映异构体溶液中L型二肽和D型二肽的浓度；
CL-form＝[Cinitial+(CD–b)/a]/2(式3)，
CD-form＝[Cinitial–(CD–b)/a]/2(式4)，
式3和式4中，CD为CD光谱峰值处的CD信号强度，Cinitial为二肽对映异构体的总浓度，CL-form为L型二肽的浓度，CD-form为D型二肽的浓度，a、b为线性系数，与式1中数值相同。


2.如权利要求1所述的利用圆二色光谱定量测定二肽对映异构体的方法，其特征在于，所述二肽对映异构体中D...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈秀兰，杨洁，钟帅，于洋，宋晓妍，张玉忠，苏海楠，秦启龙，李平一，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37