胃癌血清检测标志物及其检测方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种胃癌血清检测标志物，该标志物为序列如SEQ ID NO:1所示的多肽分子。本发明专利技术还公开了该标志物的检测方法、包含该标志物的试剂盒以及该标志物的用途。本发明专利技术通过筛查获得了在早期胃癌患者血清中呈现特异性高表达的多肽分子片段，该多肽分子片段可作为血清检测标志物，用于早期胃癌的辅助诊断检测，从而为胃癌的早期发现、诊断和治疗提供了可能。

【技术实现步骤摘要】
胃癌血清检测标志物及其检测方法和应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及胃癌的检测，更具体的说，是涉及与胃癌相关的血清多肽分子及其检测方法和应用。
技术介绍
胃癌发病率和死亡率均占我国恶性肿瘤的首位，而当前我国胃癌防治的现状是“二高三低”，即发病率高、死亡率高、早期诊断率低、手术根治率低、5年生存率低。确诊的胃癌病例中，早期胃癌仅占2％-10％，与国际胃癌防治水平先进的日本、韩国比较，中国在胃癌防治方面还有相当大的差距。据统计，2004年以来，在日本早期胃癌检诊协会所属医疗机构中，检出的胃癌中超过70％为早期胃癌，如此高的早期胃癌检出率得益于对无症状的日本人群进行胃癌筛选。迫切需要进行早期胃癌有效的筛查，建立早期胃癌的预警系统，提高胃癌早期诊断率，早期胃癌标志物的筛选及建立有着非常重要的作用。血清检测是一种微创的检测方式，通过检测血清中的标志物，特别是其中的蛋白标志物，可以评判肿瘤的发生和发展情况，为诊断和治疗提供一种可靠的辅助手段，特别是对照早期诊断和治疗，有重要作用。血清中目前公认的肿瘤标记物如CEA、CA125、AFP等，在肿本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.胃癌血清检测标志物，其特征在于，所述标志物为一多肽分子，该多肽分子的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。/n

【技术特征摘要】
1.胃癌血清检测标志物，其特征在于，所述标志物为一多肽分子，该多肽分子的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。


2.权利要求1所述标志物的检测方法，其特征在于，采用间接竞争ELISA法，步骤包括：
1)按照SEQIDN0:1所示序列合成多肽，包被到酶标板上；
2)在酶标板的每个孔中加封闭液进行封闭；
3)将稀释后的血清样本加入到上述已封闭的反应孔中；将阳性对照和阴性对照分别加入到阳性对照孔和阴性对照孔中；将稀释的酶标多肽抗体加入到酶标板上相应的孔中；
4)配制TMB显色剂，并加入到酶标板各反应孔中进行反应；
5)向酶标板各反应孔中加入终止液，终止反应；
6)将酶标板置于酶标仪中进行读数，并根据读数值，对检测结果进行评价，判断样本中是否含有SEQIDN0:1所示序列的多肽分子标志物。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)，包被方法为：用包被缓冲液将所述多肽稀释至1μg/ml，向酶标板中加50μl，4℃过夜，次日弃去孔内溶液，用1xTBST洗涤缓冲液以每孔180μl洗1次，拍干；所述包被缓冲液成分为：NaHCO32.93g，Na2CO31.59g，加去离子水至1L。


4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3)，所述酶标多肽抗体为标记有HRP的多肽抗体。


5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤4)，所述TMB显色剂由显色液A和显色液B按1:1的体积比混合而成，所述显色液A的成分包括：0.2MNa2HPO425.7ml、0.1M...

【专利技术属性】
技术研发人员：靖大道，金杰，祝青青，张庆华，徐敏，陆颖影，李继坤，王兴鹏，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，上海华盈生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31