一种用于PD-L1表达水平检测的试剂盒制造技术

本发明专利技术属于PD‑L1表达检测技术领域，具体涉及一种用于PD‑L1表达水平检测的试剂盒。所述试剂盒包括PD‑L1特异性引物、GAPDH特异性引物、PD‑L1探针、GAPDH探针。与现有技术相比，本发明专利技术提供的试剂盒是基于数字PCR检测系统，上样后全自动检测，减少人为操作干扰，结果稳定，准确度高，数据扩增效果好，能够更便捷的用于辅助诊断与临床治疗指导。

A kit for detection of PD-L1 expression level

【技术实现步骤摘要】
一种用于PD-L1表达水平检测的试剂盒
本专利技术属于PD-L1表达检测
，具体涉及一种用于PD-L1表达水平检测的试剂盒。
技术介绍
随着国家食品药品监督总局(CFDA)正式批准国内首个PD-1抑制剂纳武单抗的上市，预示着我国进入了免疫治疗新时代。肿瘤免疫治疗是通过调动机体自身的免疫系统，增强抗肿瘤免疫力，从而抑制和杀伤肿瘤细胞，它的出现改变了肿瘤传统的手术治疗、放化疗的格局，是当前肿瘤治疗领域中最具前景的研究方向之一。在肿瘤细胞和免疫效应细胞的相互作用中，肿瘤细胞表面的程序化死亡受体的配体(programmedcelldeath-ligand1，PD-L1)与免疫效应细胞(T淋巴细胞)表面的程序化死亡受体-1(programmedcelldeath-1，PD-1)的结合，传递免疫抑制信号，是肿瘤细胞逃避淋巴细胞杀伤的重要机制。研究表明，PD-1/PD-L1在多种肿瘤组织中发生明显表达上调，是一种广泛表达的生物标志物。以PD-1及PD-L1为靶点的免疫抑制剂，可以阻断PD-1与PD-L1的结合，阻断负向调控信号，使T细胞恢复活性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于PD-L1表达水平检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括PD-L1特异性引物、GAPDH特异性引物、PD-L1探针、GAPDH探针；/n所述PD-L1特异性引物包括如下核苷酸序列/n上游引物:5-CCGCTGCATGATCAGCTATGG-3SEQ ID NO:1；/n下游引物:5-GAGGTGACTGGATCCACAACC-3SEQ ID NO:2；/n所述PD-L1探针包括如下核苷酸序列/n5-CAAGGACCTATATGTGGTAG-3SEQ ID NO:3；/n所述GAPDH特异性引物包括如下核苷酸序列/n上游引物:5-CTCTGCTCCTCCTGTTCGAC-3SEQ ...

【技术特征摘要】
1.一种用于PD-L1表达水平检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括PD-L1特异性引物、GAPDH特异性引物、PD-L1探针、GAPDH探针；
所述PD-L1特异性引物包括如下核苷酸序列
上游引物:5-CCGCTGCATGATCAGCTATGG-3SEQIDNO:1；
下游引物:5-GAGGTGACTGGATCCACAACC-3SEQIDNO:2；
所述PD-L1探针包括如下核苷酸序列
5-CAAGGACCTATATGTGGTAG-3SEQIDNO:3；
所述GAPDH特异性引物包括如下核苷酸序列
上游引物:5-CTCTGCTCCTCCTGTTCGAC-3SEQIDNO:4；
下游引物:5-ATGGTGTCTGAGCGATGTGG-3SEQIDNO:5；
所述GAPDH探针包括如下核苷酸序列
5-CCTGGCCAAGGTCATCCATGACAACTT-3SEQIDNO:6。


2.根据权利要求1所述的用于PD-L1表达水平检测的试剂盒，还包括PCR扩增预混液，所述扩增预混液包括





3.根据权利要求1或2所述的用于PD-L1表达水平检测的试剂盒，所述PD-L1探针的荧光报告基团为CY3，荧光淬灭基团为BHQ1；所述GAPDH探针的荧光探针的荧光报告基团为FAM，荧光淬灭基团为BHQ1。


4.采用如权利要求1-3任一项所述的试剂盒对PD-L1表达水平进行检测的方法，其包括如下步骤：
S1针对选定的PD-L1和GAPDH序列，设计PD-L1特异性引物和探针以及GAPDH特异性引物和探针；
S2提取检测样本的RNA；
S3在逆转录PCR反应体系中将RNA逆转录成cDNA；
S4在PCR扩...

【专利技术属性】
技术研发人员：金鑫浩，刘一博，隋硕，任鲁风，张未来，俞育德，于军，
申请(专利权)人：宁波胤瑞生物医学仪器有限责任公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33