【技术实现步骤摘要】
基于Zr-MOF催化活性的蛋白激酶电化学传感器制备方法及应用
本专利技术涉及一种电化学生物传感器及其检测方法，尤其是涉及基于Zr-MOF催化活性的蛋白激酶电化学传感器制备方法及应用，属于功能生物材料和生物传感
技术介绍
金属有机框架材料(MOF)是一类由单金属离子或金属离子簇作为金属结点，利用有机配体分子形成一个功能性扩展网络结晶框架材料，具有多孔性，可以通过改变材料的金属离子结点或者配体分子的性质和配比来调控其物理化学性质，也可以通过改变合成的条件(温度、pH、浓度、溶剂等)进行调节。通过协调金属框架材料结构中有机和无机两部分的多样性和交互性，其在存储气体、化学与物理传感、催化、质子传导、药物输送、光电子成像方面显示出前所未有的应用前景。蛋白质是生命组织的重要组成成分，是生理功能的执行者，是生命物质的基础，对蛋白质结构和功能的研究一直以来都是生命科学研究中的重点。在蛋白质中，某些氨基酸的残基可以被翻译后修饰，通过由此产生的化学结构的变化可以对蛋白质的功能进行调控亦或者进行激活。其中，蛋白激酶属于生...
【技术保护点】
1.基于Zr-MOF催化活性的蛋白激酶电化学传感器制备方法及应用，其特征在于，机理如下：本专利技术构建了一种新型电化学传感器用于蛋白激酶PKA活性的检测。首先将含有半胱氨酸的底物多肽通过Au-S键作用修饰到金电极表面，将PKA反应液滴至电极表面得到磷酸化多肽修饰电极，利用锆离子(Zr
【技术特征摘要】
1.基于Zr-MOF催化活性的蛋白激酶电化学传感器制备方法及应用，其特征在于，机理如下：本发明构建了一种新型电化学传感器用于蛋白激酶PKA活性的检测。首先将含有半胱氨酸的底物多肽通过Au-S键作用修饰到金电极表面，将PKA反应液滴至电极表面得到磷酸化多肽修饰电极，利用锆离子(Zr4+)与磷酸化多肽的磷酸化位点的特异性结合作用，将合成的锆基金属有机框架材料(Zr-MOF)固化到电极表面，该材料能够电催化H2O2的还原产生电化学输出，构建了一种基于Zr-MOF材料的蛋白激酶电化学传感器。
2.基于Zr-MOF催化活性的蛋白激酶电化学传感器制备方法及应用，具体步骤如下：
(1)Zr-MOF的合成
a.将提纯后的150～250mL丙酸、0.5～2mL吡咯加入到300～700mL的三口烧瓶中，在氮气保护下，加入1～5g4-甲酰基苯甲酸，加热至100～180℃，回流0.5～1.5h，反应结束后降至室温，低温下重结晶2～8h，析出褐色沉淀。抽滤并用二氯甲烷多次洗涤至棕红色晶体，放置真空干燥箱过夜。
b.在室温条件下，称取0.1～2g四氯化锆、0.1～2g2-氨基对苯二甲酸，并将它们溶解到1～5mL乙酸、10～30mL二甲基甲酰胺(DMF)以及0.1～0.5mL的去离子水的混合液中，超声1～8min使其充分溶解。称取a步骤产物10～46mg并加入上述溶液，此时溶液由黄色变为绿色。继续超声1～8min后，将该混合溶液转移到聚四氟乙烯材质内衬的不锈钢反应釜中，置于100～150℃烘箱中恒温反应20～30h，冷却至室温，5000～10000rpm离心10～20min得到红褐色产物，并用DMF平行洗涤三次。再将上述产物充分分散在10～70mL的...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡宇芳，胡丹丹，詹甜玉，郑宇迪，刘鑫达，冉平建，王邃，郭智勇，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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