一种蛹虫草栽培接种方法技术

本发明专利技术涉及一种蛹虫草，具体涉及一种蛹虫草栽培接种方法，其包括以下依次进行的步骤：将蛹虫草的分生孢子制成悬浮液后接种到培养基中，20～25℃下恒温室内培养3～7d后，经光照刺激得到蛹虫草。所述悬浮液的制备包括以下步骤：将蛹虫草菌丝收集，加入吐温80溶液震荡均匀后，用中速滤纸过滤纯化后，葡萄糖溶液稀释得到悬浮液备用。本发明专利技术方法克服了本领域技术人员的技术偏见，将蛹虫草分生孢子制成悬浮液，并接种到培养基中，培植出无虫子体的蛹虫草。经过试验证明，成功生长出菌丝，接种第3天就生长白色菌丝，而且生长更均匀。

A method of cultivation and inoculation of Cordyceps militaris

【技术实现步骤摘要】
一种蛹虫草栽培接种方法
本专利技术涉及一种蛹虫草，具体涉及一种蛹虫草栽培接种方法。
技术介绍
蛹虫草栽培接种技术方面，目前应用最多的方法是使用液体培养的液体菌种进行接种，采用这种方法的优点就是接种效率高、菌丝生长快、污染低。这种方法培养的流程为母种培养→液体种培养→接种培养→菌丝生长→子实体生长→采收。虽然蛹虫草菌丝生长周期短，其要先培养液体菌种，使培养的时间更长，在生产过程中，其生产效率大大的降低。鲁东大学曾申请过《蛹虫草斜面固体菌种有效替代液体菌种的蛹虫草培养方法》(专利号：CN105733957A)的专利技术专利，专利中提到直接采用固体菌种代替液体菌种进行接种，方法是将固体菌种与葡萄糖溶液进行混合，然后直接进行接种，此方法确实可以缩短周期。但是其采用的是固体培养基，并固体培养基与葡萄糖溶液直接混合进行接种，需要将斜面菌种与葡萄糖注射液混合后从针头挤出，再混合的多次的方式均匀混合容易混入杂质，接种的菌种中不仅仅包括分生孢子，降低生产效率，且并未有任何启示其可减少蛹虫草的退化。现有技术中记载有，采用分生孢子悬浮液接种技术在食用菌领域中应用。而将蛹虫草分生孢子制成悬浮液存活率低。
技术实现思路
(一)要解决的技术问题为了解决现有技术的上述问题，本专利技术提供一种采用分生孢子悬浮液栽培接种，减少污染物且有效遏制蛹虫草虫性遏制的新的培养方法。(二)技术方案为了达到上述目的，本专利技术采用的主要技术方案包括：一种蛹虫草的栽培接种方法，其包括以下依次进行的步骤：将蛹虫草的分生孢子制成悬浮液后接种到培养基中，20～25℃下恒温室内培养3～7d后，经光照刺激得到蛹虫草。进一步的，所述悬浮液的制备包括以下步骤：收集蛹虫草菌丝，加入吐温80溶液震荡均匀后，用中速滤纸过滤纯化后，葡萄糖溶液稀释得到悬浮液备用。进一步的，所述吐温80溶液的浓度为0.01～0.05％，按吐温80溶液中分生孢子的数量为106～5×107个/mL接种蛹虫草菌丝。进一步的，所述葡萄糖溶液的浓度为2～5％，稀释的倍数为5～10倍。进一步的，所述蛹虫草的分生孢子菌丝制备：将蛹虫草母种切块接入PDA斜面培养基，放入23～28℃培养箱黑暗培养6～8d，PDA斜面长出菌丝。进一步的，所述培养基主要由下重量份的组分配制而成：大米20～40份、蛋白胨3～6份、蔗糖10～30份、MgSO4为1～3份、磷酸二氢钾1～3份、维生素B1为0.5～1.5份。进一步的，所述分生孢子悬浮液按体积百分比为0.5～1％接种到培养基中。进一步的，光照刺激的步骤包括：S1将接种后的培养基光照10～14h后，再置于黑暗下10～14h；S2循环步骤S1的次数为5～7次。(三)有益效果本专利技术的有益效果是：1.本专利技术方法克服了本领域技术人员的技术偏见，将蛹虫草分生孢子制成悬浮液，并接种到培养基中，培植出无虫子体的蛹虫草。经过试验证明，成功生长出菌丝，接种第3天就生长白色菌丝，而且生长更均匀。2.本专利技术蛹虫草的接种培养方法能有效的阻止蛹虫草种性的退化。3.本专利技术蛹虫草分生孢子收集及悬浮液配制关键在于菌液的净化，本专利技术方法相对于现有技术污染率更低。4.本专利技术将分生孢子悬浮液代替液体菌种进行蛹虫草栽培接种，缩短了种植时间，降低了种植成本，提高生产效率。具体实施方式为了更好的解释本专利技术，以便于理解，下面通过具体实施方式，对本专利技术作详细描述。一种蛹虫草的栽培方法，其包括以下依次进行的步骤：将蛹虫草的分生孢子制成悬浮液后接种到培养基中，20～25℃下恒温室内培养3～7d后，温差刺激、光照处理等得到蛹虫草。为成功将蛹虫草的分生孢子菌丝制备成纯度较高的分生孢子悬浮液，采用以下但不仅限于以下步骤：将蛹虫草的分生孢子菌丝，加入到吐温80溶液震荡均匀后，用中速滤纸过滤纯化后，葡萄糖溶液稀释得到悬浮液备用。为使悬浮液浓度达到最佳，用吐温80溶液的浓度为0.01～0.05％，按吐温80溶液中分生孢子的数量为106～5×107个/mL接种蛹虫草菌丝。葡萄糖溶液的浓度为2～5％，稀释的倍数为5～10倍。蛹虫草的分生孢子菌丝制备：将蛹虫草母种切块接入PDA斜面培养基，放入23～28℃培养箱黑暗培养6～8d，PDA斜面长出菌丝。培养基主要由下重量份的组分配制而成：大米20～40份、蛋白胨3～6份、蔗糖10～30份、MgSO4为1～3份、磷酸二氢钾1～3份、维生素B1为0.5～1.5份。分生孢子悬浮液按体积百分比为0.5～1％接种到培养基中。光照刺激的步骤包括：将接种后的培养基光照10～14h后，再置于黑暗下10～14h；循环此步骤5～7次。目前，蛹虫草栽培接种是采用液体菌种接种，这一方法液体菌种是关键，是必不可少的关键因素；而液体菌种培养需要设备仪器，并且液体菌种培养需要时间，本专利技术在蛹虫草原有的栽培接种技术上简化步骤，直接使用分生孢子悬浮液进行接种，即流程为：母种培养→分生孢子收集(悬浮液)→接种培养→菌丝生长→子实体生长→采收；在省去了液体菌种这一环节，在能达到同样或更好的栽培效果下，简化了培养步骤，缩短周期，降低成本，提高了生产效率。本专利技术方法直接收集分生孢子，不需要反复进行，操作更简洁。具体实施例实施例1一种蛹虫草的栽培方法，其包括以下依次进行的步骤：S1菌种扩繁出菌丝：将母种切块接入PDA斜面培养基，接种完成后放入25℃培养箱黑暗培养，培养时间7d，使PDA斜面培养基上长出菌丝；S2分生孢子悬浮液配制：按吐温80溶液中分生孢子的数量为5×106个/mL接种蛹虫草菌丝，具体的，从PDA斜面培养基上取出生长好的斜面菌丝加入6mL浓度为0.03％吐温80溶液充分震荡后，置于灭过菌的试剂瓶中，后用3％的葡萄糖溶液进行稀释7倍，配分生孢子悬浮液。S3栽培培养基配制：将大米30g、蛋白胨5、蔗糖20g、MgSO41g、磷酸二氢钾2g和维生素B1为1g混合后，加入无菌蒸馏水溶解后，用无菌蒸馏水定容至1000mL。S4接种：使用移液枪吸取分生孢子悬浮液直接接入栽培培养基中，接种量5mL。S5培养：S51将接完种的培养基放入22℃恒温室内培养4d，待菌丝长满后，光照刺激12h后，再置于黑暗下12h；S52循环步骤S51的次数为6次，使蛹虫草由菌丝生长转入子实体生长。S6采收。本实施例在培养第7.5d时就可以在培养基表面看到白色毛状菌丝生长。实施例2一种中国被毛孢接种培养方法，其包括以下步骤：S1将蛹虫草母种切块接入PDA斜面培养基，放入28℃培养箱黑暗培养8d，PDA斜面长出菌丝S2中国被毛孢分生孢子悬浮液的配制：按吐温80溶液中分生孢子的数量为5×107个/mL接种蛹虫草菌丝，具体的，将长势较好的中国被毛孢分生孢子斜面菌丝，加入到6mL质量浓度为0.01％吐温80溶液震荡本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛹虫草的栽培接种方法，其特征在于，其包括以下依次进行的步骤：将蛹虫草的分生孢子制成悬浮液后接种到培养基中，20～25℃下恒温室内培养3～7d后，经光照刺激得到蛹虫草。/n

【技术特征摘要】
1.一种蛹虫草的栽培接种方法，其特征在于，其包括以下依次进行的步骤：将蛹虫草的分生孢子制成悬浮液后接种到培养基中，20～25℃下恒温室内培养3～7d后，经光照刺激得到蛹虫草。


2.如权利要求1所述的蛹虫草的栽培接种方法，其特征在于，所述悬浮液的制备包括以下步骤：收集蛹虫草菌丝，加入吐温80溶液震荡均匀后，用中速滤纸过滤纯化后，葡萄糖溶液稀释得到悬浮液备用。


3.如权利要求2所述的蛹虫草的栽培接种方法，其特征在于：所述吐温80溶液的浓度为0.01～0.05％，按吐温80溶液中分生孢子的数量为106～5×107个/mL接种蛹虫草菌丝。


4.如权利要求2所述的蛹虫草的栽培接种方法，其特征在于：所述葡萄糖溶液的浓度为2～5％，稀释的倍数为5～10倍。


5.如权利要求2所述的蛹虫...

【专利技术属性】
技术研发人员：高益槐，王忠，王锦锋，
申请(专利权)人：安发福建生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35