一种蛋白在制备预防化脓隐秘杆菌感染的药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于兽用生物制品领域，公布了化脓隐秘杆菌的一种抗原蛋白及其制备、疫苗应用、抗体检测方法。本发明专利技术将高度保守的化脓隐秘杆菌铁ABC转运体底物结合蛋白SBP的基因，克隆至pGEX‑4T‑1质粒，构建BL21（DE3）重组菌株，使用IPTG诱导表达重组蛋白SBP(GST‑SBP)，实现了目的蛋白的可溶性表达，采用Gluthathione‑Sepharose 4B层析法亲和纯化重组蛋白。本发明专利技术提供的重组SBP(GST‑SBP)蛋白具有良好的反应原性和免疫原性，能够与化脓隐秘杆菌免疫或感染的动物（小鼠、山羊）的血清反应，能够刺激动物（小鼠、羊）产生高水平特异抗体，小鼠免疫保护率为90%。本发明专利技术为制备预防化脓隐秘杆菌感染的药物提供了新的抗原蛋白。

Application of a protein in the preparation of drugs for the prevention of cryptobacillus pyogenes infection

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白在制备预防化脓隐秘杆菌感染的药物中的应用
本专利技术属于兽用生物制品，具体涉及一种制备预防化脓隐秘杆菌感染的抗原蛋白。
技术介绍
山羊产业近年来在三峡库区迅速发展，已成为助推农民脱贫致富和农村健康发展的重要产业之一。然而，疫病对地区养羊业的影响日益显现，其中危害较为严重的是化脓性肺炎，因其潜伏感染期长，临床症状不明显，化脓性病变导致肺脏组织不可逆损伤，严重影响羔羊存活率。化脓隐秘杆菌(Trueperellapyogenes)是山羊化脓性肺炎的重要病原之一(张素辉等，2015；付利芝等，2018；冯峰，2010.)。化脓隐秘杆菌是革兰氏阳性菌，主要寄生在动物上呼吸道、消化道、生殖道等黏膜，属于一种共生性条件致病菌，通常导致牛、羊、猪等多种动物的肺脏脓肿、肝脓肿、脑脓肿、乳腺炎、子宫内膜炎、流产和死胎等疾病(Rissetietal，2017；Cohenetal，2018；Piersantietal，2019)。已鉴定的化脓隐秘杆菌毒力因子有溶血素(Pyolysin，PLO)和黏附蛋白胶原结合蛋白(collage-bindingpro本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种蛋白，氨基酸序列为SEQ ID NO.2。/n

【技术特征摘要】
1.一种蛋白，氨基酸序列为SEQIDNO.2。


2.如权利要求1所述蛋白应用于制备预防化脓隐秘杆菌致死性感染的药物。


3.一种DNA分子，序列为SEQIDNO.1，用于编码权利要求1所述蛋白。


4.如权利要求1或2所述蛋白，所述蛋白制备方法包括以下步骤：1）从化脓隐秘杆菌中PCR扩增获得铁ABC转运体SBP目的基因，2）克隆至pGEX-4T-1质粒，转化获得大肠杆菌BL21（DE3）重组菌株，3）收集细菌培养物，超声裂解菌液，4）Gluthathione-Sepharose4B层析法纯化上清中的可溶性重组蛋白，5）SDS-PAGE检...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈克飞，张素辉，闫志强，徐登峰，许国洋，付利芝，
申请(专利权)人：重庆市畜牧科学院，
类型：发明
国别省市：重庆;50