一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法。该分离纯化方法包括下述步骤：采用高效液相色谱法对N‑乙酰半胱氨酸对映异构体进行分离，即可；所述的高效液相色谱法中的流动相为烷烃类溶剂‑异丙醇，所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的体积比为(70～83):(17～30)；所述的高效液相色谱法中的色谱柱的填料为涂覆有如式I所示的纤维素类衍生物的填料。本发明专利技术所提供的分离纯化方法可以将N‑乙酰‑L‑半胱氨酸及其对映异构体进行有效分离，进一步实现了对N‑乙酰‑L‑半胱氨酸及其对映异构体的定性、定量分析，对药品生产和质量提升有重要指导意义。

Separation and purification of acetylcysteine enantiomers

【技术实现步骤摘要】
一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法
本专利技术涉及药物分析检测领域，具体涉及一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法。
技术介绍
N-乙酰-L-半胱氨酸(Acetylcysteine,Ac-Cys)，分子式：C5H9NO3S，分子量：163.19。本品为白色结晶性粉末；有类似蒜的臭气，味酸；有引湿性。易溶于水，溶于乙醇，不溶于二氯甲烷和乙醚；其结构式如下所示。N-乙酰-L-半胱氨酸为粘液溶解剂，适用于大量粘痰阻塞引起的呼吸困难，及咯痰困难的疾患，也可用于术后咯痰困难，急、慢性支气管炎，支气管扩张，肺炎、肺结核、肺气肿等引起痰液粘稠和咯痰困难者，现也多用于特发性间质肺的治疗。近年来研究发现，这种药品3％的水溶液可作眼药水(阿西丁)治疗角膜炎，随着精细化妆品的研究开发，最近的光医学，光生物学研究表明，N-乙酰-L-半胱氨酸可还原皮下黑色素，消除已经沉着的黑色素，作为美白化妆品已日益受到人们的重视。N-乙酰-L-半胱氨酸广泛应用于医药，农药，化学工业等领域，目前通常只对N-乙酰-L-半胱氨酸的常规理化指标进行检测，但在生产过程中会产生副产物——N-乙酰-D-半胱氨酸这一对映异构体，从而影响产品质量。HPLC在拆分氨基酸外消旋体时通常有三种方法：一是利用手性试剂与被拆分物进行衍生化反应生成非对映异构体，从而可被传统的非手性色谱柱所拆分；二是在流动相中加入手性添加剂，利用非手性固定相色谱柱进行拆分；三是利用手性固定相色谱柱进行拆分。其中衍生化反应操作复杂，衍生试剂和反应介质有可能干扰色谱分离和检测；手性流动相添加剂法拆分机理较复杂，方法的建立较困难，更换流动相时系统较长时间才能平衡。目前，对具有手性特征的药物越来越多地采用ee值来表征对映异构体的绝对含量，而N-乙酰半胱氨酸对映异构体的手性分析一般采用衍生化的方法进行分离，操作复杂，且衍生化过程中反应程度难以准确控制，导致N-乙酰-L-半胱氨酸与N-乙酰-D-半胱氨酸的含量难以准确测定，重现性差。因此，建立一种能快速、准确测定乙酰半胱氨酸对映异构体含量的分离纯化方法，对药品生产和质量提升有重要指导意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服现有技术中N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法复杂、衍生化反应程度难以精确控制导致定量不准确及重现性差的缺陷，而提供了一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法。本专利技术所提供的分离纯化方法可以将N-乙酰-L-半胱氨酸及其对映异构体进行有效分离，进一步实现了对N-乙酰-L-半胱氨酸及其对映异构体的定性、定量分析。基于此，本专利技术的方法能简单、快速、准确地分析N-乙酰-L-半胱氨酸合成过程中产生的对映异构体杂质N-乙酰-D-半胱氨酸，对药品生产和质量提升有重要指导意义。专利技术人在研发过程中发现，采用纤维素类取代衍生化的涂覆型手性色谱柱，以正相混合溶剂为流动相对乙酰半胱氨酸的对映异构体进行分离检测，可以将N-乙酰-L-半胱氨酸及其对映异构体进行有效分离。本专利技术提供了一种N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其包括下述步骤：采用高效液相色谱法对N-乙酰半胱氨酸对映异构体进行分离，即可；所述的高效液相色谱法中的流动相为烷烃类溶剂-异丙醇，所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的体积比为(70～83):(17～30)；所述的高效液相色谱法中的色谱柱的填料为涂覆有如式I所示的纤维素类衍生物的填料；其中，R为R1、R2、R3、R4和R5独立地为H或C1～C3的烷基。本专利技术中，所述R1优选为H。本专利技术中，所述R2优选为C1～C3的烷基，更优选为甲基或乙基，例如甲基。本专利技术中，所述R3优选为H。本专利技术中，所述R4优选为C1～C3的烷基，更优选为甲基或乙基，例如甲基。本专利技术中，所述R5优选为H。本专利技术中，所述R优选为本专利技术中，所述如式I所示的纤维素类衍生物优选为纤维素-三(3,5)二甲基苯基氨基甲酸酯。本专利技术中，所述n是指纤维素的聚合度，一般为正整数。本专利技术中，所述填料的基质可为本领域常规的填料基质，例如球形硅胶。本专利技术中，所述填料的粒径可为本领域常规的粒径，例如4～6μm，再例如5μm。本专利技术中，根据填料的性质，所述色谱柱可称之为涂覆型手性色谱柱。本专利技术中，所述烷烃类溶剂可为本领域常规的、可在色谱分离中作为正相溶剂的烷烃类溶剂，例如正己烷、正戊烷、二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或多种，优选为正己烷。本专利技术中，优选地，所述异丙醇中含有酸和/或四氢呋喃。其中，所述酸的种类可为乙酸。其中，所述酸的用量可为本领域常规的用量，例如0.1～0.5％，再例如0.1％或0.5％，百分比是指在所述异丙醇中的体积百分比。其中，所述四氢呋喃的用量优选为0.05～0.3％，例如0.05～0.15％，再例如0.1％，百分比是指在所述异丙醇中的体积百分比。本专利技术中，所述流动相优选为烷烃类溶剂-含0.1～0.5％酸的异丙醇或烷烃类溶剂-含0.05～0.3％四氢呋喃的异丙醇，例如烷烃类溶剂-含0.1％酸的异丙醇、烷烃类溶剂-含0.5％酸的异丙醇或烷烃类溶剂-含0.1％四氢呋喃的异丙醇；更优选为烷烃类溶剂-含0.1～0.5％酸、0.05～0.3％四氢呋喃的异丙醇，例如烷烃类溶剂-含0.5％酸、含0.1％四氢呋喃的异丙醇；百分比是指在所述异丙醇中的体积百分比。当所述异丙醇中含有四氢呋喃时，可以抑制乙酰半胱氨酸自身环化物(2甲基-2噻唑啉-4羧酸，详见欧洲药典7.0)自发形成，降低环化物对定量造成影响。本专利技术中，所述流动相优选为正己烷-异丙醇，更优选为正己烷-含0.1～0.5％酸的异丙醇、正己烷-含0.05～0.3％四氢呋喃的异丙醇或正己烷-含0.1～0.5％酸、0.05～0.3％四氢呋喃的异丙醇，例如正己烷-含0.1％乙酸的异丙醇、正己烷-含0.5％乙酸的异丙醇、正己烷-含0.1％四氢呋喃的异丙醇或正己烷-含0.5％酸、含0.1％四氢呋喃的异丙醇，百分比是指在所述异丙醇中的体积百分比。本专利技术中，优选地，所述流动相为所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的混合溶液。当所述流动相为所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的混合溶液时，所述异丙醇中含有的酸和/或四氢呋喃，也可按照百分比换算后加入所述烷烃类溶剂中，再和所述异丙醇混合。本专利技术中，所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的体积比优选为(75～83):(17～25)，例如77:23、80:20或83:17。本专利技术中，所述流动相的流速优选为0.8～1.2ml/min，例如1.0ml/min。本专利技术中，所述高效液相色谱法的进样量可参考本领域HPLC检测分析的常规进样量，例如15～25μL，再例如20μL。本专利技术中，所述色谱柱的长度可为100～250mm，例如250mm。本专利技术中，所述色谱柱的温度优选为25～40℃，例如25℃或30℃。本专利技术中，优选地，所述高效液相色谱法的检测器可为紫外检测器。所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，其包括下述步骤：采用高效液相色谱法对N-乙酰半胱氨酸对映异构体进行分离，即可；/n所述的高效液相色谱法中的流动相为烷烃类溶剂-异丙醇，所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的体积比为(70～83):(17～30)；/n所述的高效液相色谱法中的色谱柱的填料为涂覆有如式I所示的纤维素类衍生物的填料；/n

【技术特征摘要】
1.一种N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，其包括下述步骤：采用高效液相色谱法对N-乙酰半胱氨酸对映异构体进行分离，即可；
所述的高效液相色谱法中的流动相为烷烃类溶剂-异丙醇，所述烷烃类溶剂和所述异丙醇的体积比为(70～83):(17～30)；
所述的高效液相色谱法中的色谱柱的填料为涂覆有如式I所示的纤维素类衍生物的填料；



其中，R为R1、R2、R3、R4和R5独立地为H或C1～C3的烷基。


2.如权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，所述R1为H；
和/或，所述R2为C1～C3的烷基，优选为甲基或乙基；
和/或，所述R3为H；
和/或，所述R4为C1～C3的烷基，优选为甲基或乙基；
和/或，所述R5为H；优选地，所述R为
和/或，所述填料的基质为球形硅胶；
和/或，所述填料的粒径为4～6μm，优选为5μm。


3.如权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，所述烷烃类溶剂为正己烷、正戊烷、二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或多种，优选为正己烷。


4.如权利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，所述异丙醇中含有酸和/或四氢呋喃。


5.如权利要求4所述的N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，当所述异丙醇中含有酸时，所述酸的种类为乙酸；
和/或，当所述异丙醇中含有酸时，所述酸的用量为0.1～0.5％，优选为0.1％或0.5％，百分比是指在所述异丙醇中的体积百分比；
和/或，当所述异丙醇中含有四氢呋喃时，所述四氢呋喃的用量为0.05～0.3％，优选为0.05～0.15％，更优选为0.1％，百分比是指在所述异丙醇中的体积百分比。


6.如权利要求5所述的N-乙酰半胱氨酸对映异构体的分离纯化方法，其特征在于，所述流动相为烷烃类溶剂-含0.1～0.5％酸的异...

【专利技术属性】
技术研发人员：李敬，黄蕾，杨磊，梅雪臣，何韺，刘珍，吕凡林，
申请(专利权)人：武汉远大弘元股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42