一种用于清除羰基化蛋白的透析膜及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种用于清除羰基化蛋白的透析膜，由对纤维素膜进行酰肼基修饰得到，本发明专利技术同时提供了上述用于清除羰基化蛋白的透析膜的制备方法，将纤维素膜浸于二甲亚砜中，经1,1’‑羰基二咪唑活化后与肼反应得到。本发明专利技术纤维素膜上结合的酰肼基可以特异性结合羰基化蛋白质，因此利用酰肼基修饰的纤维素膜可以有效清除羰基化蛋白质，而不对正常的蛋白质进行清除，并且制备方法简单高效。

A kind of dialysis membrane for removing carbonyl protein and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种用于清除羰基化蛋白的透析膜及其制备方法
本专利技术涉及透析膜
，具体涉及一种用于清除羰基化蛋白的透析膜及其制备方法。
技术介绍
对终末期肾病患者而言，血液透析是一种临床上常用的肾脏替代治疗方法，简言之，血液透析是一个利用透析膜清除血液中的有毒物质以维持内环境稳态的过程。在以往的研究中，常规化低通量血液透析膜可以清除机体内小分子毒素，但对于血液内的中大分子毒素没法实现有效清理；高通量血液透析膜可以有效清除血液中的大分子毒性物质如羰基化蛋白，但与此同时，一些正常的、健康的大分子蛋白质也会被清除。众所周知，羰基化蛋白质是终末期肾病发展过程中产生的一种重要的毒素蛋白质，因此，亟需开发一种可以选择性清除羰基化蛋白但是不清除正常蛋白质的透析膜。
技术实现思路
本专利技术为解决上述技术问题，提供了一种能够清除羰基化蛋白但不清除正常蛋白质的透析膜。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种用于清除羰基化蛋白的透析膜，由对纤维素膜进行酰肼基修饰得到。本专利技术的有益效果是：纤维素膜上结合的酰肼基可以结合羰基化蛋白质，利用酰肼基修饰的纤维素膜可以有效清除羰基化蛋白质，而不对正常的蛋白质进行清除。本专利技术还提供了上述用于清除羰基化蛋白的透析膜的制备方法，将纤维素膜浸于二甲亚砜中，经1,1’-羰基二咪唑活化后与肼反应制备得到。进一步，所述肼为水合肼。进一步，具体步骤为：将纤维素膜浸泡在二甲亚砜中，加入1,1’-羰基二咪唑反应6～8h，再逐滴加入水合肼溶液，继续反应12～24h，然后用去离子水清洗，得到所述用于清除羰基化蛋白的透析膜。进一步，每片直径为25mm的纤维素膜添加的二甲亚砜为1～3mL，1,1’-羰基二咪唑为0.1～0.3g，水合肼为0.2～0.8mL，所述水合肼的浓度为80％。进一步，所述纤维素膜的孔径为0.45μm。本专利技术的有益效果是制备方法简单高效，制备得到的透析膜上酰肼基修饰水平高，对羰基化蛋白的清除效率高。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。本专利技术所用的材料以及药品包括纤维素膜(直径25毫米，孔径0.45微米，VWR公司)、二甲亚砜(DMSO,≥99.9％，Sigma公司)、1,1’-羰基二咪唑(CDI,≥97.0％，Sigma公司)和水合肼(78-82％，Sigma公司)。实施例1将一片商用纤维素膜(CM)浸泡在1mL二甲亚砜中，然后加入0.2g1,1’-羰基二咪唑活化6h，再逐滴加入0.4ml水合肼溶液，继续反应12h，最后将纤维素膜用大量去离子水清洗得到用于清除羰基化蛋白的透析膜。实施例2将一片商用纤维素膜(CM)浸泡在3mL二甲亚砜中，然后加入0.3g1,1’-羰基二咪唑活化7h，再逐滴加入0.8ml水合肼溶液，继续反应15h，最后将纤维素膜用大量去离子水清洗得到用于清除羰基化蛋白的透析膜。实施例3将一片商用纤维素膜(CM)浸泡在2mL二甲亚砜中，然后加入0.1g1,1’-羰基二咪唑活化8h，再逐滴加入0.2ml水合肼溶液，继续反应24h，最后将纤维素膜用大量去离子水清洗得到用于清除羰基化蛋白的透析膜。验证例1将8-16ml0.5-1mg/ml的牛血清白蛋白与500-1000μmol丙烯醛混合，在黑暗中过夜，得到羰基化牛血清白蛋白，用紫外-可见光谱法于370nm波长处测定吸光度，按照标准曲线计算出羰基化蛋白质的含量。测定磷酸盐缓冲液中羰基化牛血清白蛋白的量为8mg。分别将实施例1-3中得到的用于清除羰基化蛋白的透析膜浸泡于羰基化牛血清白蛋白溶液中12～24小时，再次测定并计算溶液中羰基化蛋白质的含量，经过实施例1-3的透析膜处理后羰基化牛血清白蛋白的量分别减少到4.8mg、4.2mg和3.9mg，其对羰基化牛血清白蛋白的清除效率分别为40％、47.5％和51.25％。验证例2取一定量的终末期肾病患者血清，用一定量磷酸盐缓冲液稀释，通过紫外-可见光谱法于370nm波长处测定吸光度，计算得羰基化蛋白含量为12克。分别将实施例1-3中得到的用于清除羰基化蛋白的透析膜浸泡于患者血清稀释液中，再次测定并计算稀释液中羰基化蛋白的含量，经过实施例1-3中的透析膜处理后，患者血清稀释液中羰基化蛋白的含量分别减少到5.4mg、6.2mg、6.6mg，其对患者血清中羰基化蛋白的清除效率分别为55％、48.3％和45％。本专利技术得到的用于清除羰基化蛋白的透析膜为低通量透析膜，可以除去血液中的多余的水分以及小分子毒素，同时与其结合的酰肼基可以与羰基化蛋白上的醛基或酮基特异性结合，从而选择性清除羰基化蛋白，而不损失正常的蛋白质。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于清除羰基化蛋白的透析膜，其特征在于，由对纤维素膜进行酰肼基修饰得到。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于清除羰基化蛋白的透析膜，其特征在于，由对纤维素膜进行酰肼基修饰得到。


2.一种如权利要求1所述的用于清除羰基化蛋白的透析膜的制备方法，其特征在于，将纤维素膜浸于二甲亚砜中，经1,1’-羰基二咪唑活化后与肼反应得到。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述肼为水合肼。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具体步骤为：将纤维素膜浸泡在二甲亚砜中，加入1,...

【专利技术属性】
技术研发人员：高明，郑立，杨屹峰，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：广西;45