工程化抗微生物两亲性肽及使用方法技术

技术编号：22849940 阅读：46 留言：0更新日期：2019-12-17 23:31

本文公开了当施用于受试者时可具有抗微生物、抗病毒、抗真菌或抗肿瘤活性的新型肽。

Engineering amphiphilic peptide and its application

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】工程化抗微生物两亲性肽及使用方法交叉引用本申请要求于2017年3月3日提交的第62/466,808号美国临时申请的权益，该临时申请通过引用整体并入本文。
技术实现思路
本文公开了肽。本文公开的肽可包含式A、式B、式C、式D、式E、式F、式G、式H、式I、式J、式K、式L、式M、式N的多肽序列，或其任何一种的盐；其中：式A可以是(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中AA1可以独立地为X、Ar或Y；并且AA2、AA3、AA4、AA5、AA6和AA7可以独立地为Y、U、$或@；式B可以是(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中AA1和AA5可以独立地为X、Y或Ar；并且AA2、AA3、AA4、AA6和AA7可以独立地为Y、U、$或@；式C可以是(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中AA1和AA4可以独立地为X、Y或Ar；并且AA2、AA3、AA5、AA6和AA7可以独立地为Y、U、$或@；式D可以是(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中...

【技术保护点】
1.一种包含式A、式B、式C、式D、式E、式F、式G、式H、式I、式J、式K、式L、式M、式N的多肽序列的肽，或其任何一种的盐；其中：/n式A为(AA

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170303 US 62/466,8081.一种包含式A、式B、式C、式D、式E、式F、式G、式H、式I、式J、式K、式L、式M、式N的多肽序列的肽，或其任何一种的盐；其中：
式A为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1独立地为X、Ar或Y；并且
AA2、AA3、AA4、AA5、AA6和AA7独立地为Y、U、$或@；
式B为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1和AA5独立地为X、Y或Ar；并且
AA2、AA3、AA4、AA6和AA7独立地为Y、U、$或@；
式C为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1和AA4独立地为X、Y或Ar；并且
AA2、AA3、AA5、AA6和AA7独立地为Y、U、$或@；
式D为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1独立地为X、Y或Ar；
AA4和AA5独立地为X或Ar；
AA2和AA7独立地为U、$或@；并且
AA3和AA6独立地为Y、U、$或@；
式E为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1独立地为X、Y或Ar；
AA2、AA4和AA5独立地为X或Ar；并且
AA3、AA6和AA7独立地为Y、U、$或@；
式F为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1独立地为X、Y或Ar；
AA4、AA5和AA7独立地为X或Ar；并且
AA2、AA3和AA6独立地为Y、U、$或@；
式G为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1、AA4、AA5独立地为X、Y或Ar；
AA2和AA7独立地为X或Ar；并且
AA3和AA6独立地为Y、U、$或@；
式H为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1独立地为Y、U、$或@；
AA3、AA4、AA5和AA6独立地为X、Y或Ar；并且
AA2和AA7独立地为X或Ar；
式I为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1和AA5独立地为Y、U、$或@；
AA3、AA4和AA6独立地为X、Y或Ar；并且
AA2和AA7独立地为X或Ar；
式J为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1和AA4独立地为Y、U、$或@；
AA3、AA5和AA6独立地为X、Y或Ar；并且
AA2和AA7独立地为X或Ar；
式K为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1、AA4和AA5独立地为Y、U、$或@；并且
AA2、AA3、AA6和AA7独立地为X、Y或Ar；
式L为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1、AA2、AA4和AA5独立地为Y、U、$或@；并且
AA3、AA6和AA7独立地为X、Y或Ar；
式M为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1、AA4、AA5和AA7独立地为Y、U、$或@；并且
AA2、AA3和AA6独立地为X、Y或Ar；并且
式N为(AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7)n；其中
AA1、AA2、AA4、AA5和AA7独立地为Y、U、$或@；并且
AA3和AA6独立地为X、Y或Ar；
其中：
X独立地为Gly，或包含C1-C10烷基、C1-C10烯基、C1-C10炔基、环烷基或烷基环烷基侧链的氨基酸；
Ar为包含芳香族侧链的氨基酸；
Y为包含在约7.3的pH下至少部分质子化的侧链的氨基酸；
U为包含含有酰胺的侧链的氨基酸；
$为包含含有醇或硫醇的侧链的氨基酸；
@为包含在约7.3的pH下至少部分去质子化的侧链的氨基酸；
n为约1至约7的数字；
其中至少一个AA1为N-末端氨基酸，其中该N-末端氨基酸的氨基包含取代基R’和R”，其中：
R’和R”独立地为H；磷酰基；烷基；烯基；炔基；环烷基；磺酰基；亚磺酰基；甲硅烷基；焦谷氨酰基；能被卤素、烷基、环烷基或其任意组合取代的烷基羰基；硫酯、乙酰基、脲、氨基甲酸酯、磺酰胺、烷基胺、芳基、烷基芳基、杂芳基、烷基杂芳基；或RC(O)-；其中
R独立地为H、D、烷基、环烷基、芳基、杂芳基、烷基芳基、杂芳基或烷基杂芳基；或者
R’和R”与它们所连接的氮原子一起形成取代或未取代的5、6或7元环；
其中所述肽不包含3个或更多个连续的精氨酸或赖氨酸残基；其中所述肽不是环肽；
并且其中符合以下至少一项：
(i)所述肽、其代谢物或其盐在体外对细菌表现出抗微生物活性，其最小抑制浓度在约0.1μg/mL至约100μg/mL的范围内；
(ii)所述肽、其代谢物或其盐在体外对病毒表现出抗病毒活性，其最小抑制浓度在约0.1μg/mL至约100μg/mL的范围内；
(iii)所述肽、其代谢物或其盐在体外对真菌表现出抗真菌活性，其最小抑制浓度在约0.1μg/mL至约100μg/mL的范围内；
(iv)所述肽、其代谢物或其盐在体外对肿瘤细胞表现出抗肿瘤活性，其LD50为约0.01μM至约100μM。

2.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐的长度为约8至约48个氨基酸。

3.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐包含至少一种D-构型的氨基酸。

4.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐不包含D-构型的氨基酸。

5.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐包含至少一种L-构型的氨基酸。

6.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐不包含L-构型的氨基酸。

7.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐包含至少1种不是以下氨基酸的氨基酸：丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸或缬氨酸。

8.根据权利要求1所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐包含至少1种非天然氨基酸。

9.根据权利要求8所述的肽或其盐，其中所述非天然氨基酸是核磁共振(NMR)促进剂，其中所述NMR促进剂选自自旋标记的化合物、顺磁性金属螯合化合物、包含NMR活性同位素的化合物及其任何组合。

10.根据权利要求9所述的肽或其盐，其包含所述自旋标记的化合物，其中所述自旋标记的化合物为氮氧化合物。

11.根据权利要求9所述的肽或其盐，其包含顺磁性金属螯合化合物，其中所述顺磁性金属螯合化合物为包含联吡啶的部分。

12.根据权利要求9所述的肽或其盐，其包含顺磁性金属螯合化合物，其中所述顺磁性金属螯合化合物为包含羟基喹啉的部分。

13.根据权利要求9所述的肽或其盐，其包含含有NMR活性同位素的化合物，其中所述NMR活性同位素为15N。

14.根据权利要求9所述的肽或其盐，其包含含有NMR活性同位素的化合物，其中所述NMR活性同位素为13C。

15.根据权利要求9所述的肽或其盐，其包含含有NMR活性同位素的化合物，其中所述NMR活性同位素为31P。

16.根据权利要求8所述的肽或其盐，其中所述非天然氨基酸是荧光氨基酸。

17.根据权利要求1所述的肽或其盐，其包含式[Y-Ar-X-Y-Y-X-X]n的多肽序列。

18.根据权利要求1所述的肽或其盐，其包含式[U-Ar-X-Y-Y-X-Ar]n的多肽序列。

19.根据权利要求1所述的肽或其盐，其包含式[Y-X-X-$-$-X-X]n的多肽序列。

20.根据权利要求1所述的肽或其盐，其包含式[Y-X-X-$-$-X-X-@-X-X-$-$-X-X]n的序列，其中n为约0.5至约3.5。

21.一种包含以下序列的多肽的肽或其盐：
Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y；
Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-X-Y-Y；
Y-Ar-Ar-Y-Ar-Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Y；
Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Ar-Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Y；
Y-Y-X-X-Y-Y-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y；
Y-Y-Ar-X-Y-Y-X-Y-Y-X-Ar-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-X-Y-Y；
Y-Y-Ar-Ar-Y-Y-Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Ar-Ar-Y-Y-Ar-Ar-Y-Y；
X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y；
X-Y-Y-X-Ar-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-X-Y-Y-X-Y-Y-X-Ar-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-X-Y-Y；
Y-Y-X-X-Y-Y-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y；
Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-Y-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-X-X-Y-Y；或
Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-X-Y-Y-X-Y-Y-X-Ar-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-X-Y-Y-X-Y-Y-X-Ar-Y-Y-X-X-Y-X-X-Y-Y-Ar-Y-X-X；
其中：
X独立地为Gly，或包含C1-C10烷基、C1-C10烯基、C1-C10炔基、环烷基或烷基环烷基侧链的氨基酸；
Ar为包含芳香族侧链的氨基酸；并且
Y为包含在约7.3的pH下至少部分质子化的侧链的氨基酸；
其中所述肽或其盐包含至少一种不是Val、Trp或Arg的氨基酸；并且其中所述肽不是环肽。

22.一种肽或其盐，其与选自下组的序列具有约70％至约91％的同源性：
Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg；
Arg-Trp-Trp-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg；
Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg；
Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg；
Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg；
Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg；
Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；和
Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Arg-Val-Val；
其中所述肽不包含3个或更多个连续的精氨酸或赖氨酸残基；并且其中所述肽不是环肽。

23.根据权利要求1-22中任一项所述的肽或其盐，其对金黄色葡萄球菌、甲氧西林抗性金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、碳青霉烯抗性肠杆菌科细菌、表皮葡萄球菌、唾液葡萄球菌、极小棒杆菌、假白喉棒杆菌、纹带棒杆菌、棒杆菌G1组、棒杆菌G2组、肺炎链球菌、缓症链球菌、血链球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德氏菌、粘质沙雷氏菌、流感嗜血杆菌、莫拉氏菌属的种、脑膜炎奈瑟氏球菌、淋病奈瑟氏球菌、鼠伤寒沙门氏菌、放线菌属的种、卟啉单胞菌属的种、产黑素普雷沃氏菌、幽门螺杆菌、猫螺杆菌或空肠弯曲杆菌中的至少一种具有约0.1μg/mL至约100μg/mL的最小抑制浓度。

24.根据权利要求23所述的肽或其盐，其对甲氧西林抗性金黄色葡萄球菌具有约0.1μg/mL至约100μg/mL的最小抑制浓度。

25.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其中所述抗微生物活性是针对对选自头孢菌素、氟喹诺酮、碳青霉烯、粘菌素、氨基糖苷、万古霉素、链霉素和甲氧西林的抗生素具有抗性的细菌。

26.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其中如通过圆二色性或NMR波谱法所测量的，所述肽或其盐在与细菌膜、病毒包膜或肿瘤细胞膜接触时至少部分地采取α-螺旋结构。

27.根据权利要求26所述的肽或其盐，其中所述α-螺旋结构的至少一部分是两亲性的。

28.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其至少部分地是构象约束的。

29.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其至少部分地被约束为α螺旋。

30.根据权利要求28或29所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐至少部分地被二硫键、钉、缝线或其任何组合约束。

31.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其中当所述肽或其盐施用于灵长类动物时，所述肽或其盐基本上定位在所述灵长类动物的肝脏、脾脏或肾脏中。

32.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐是重组的。

33.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其中所述肽或其盐是化学合成的。

34.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其为分离且纯化的。

35.根据权利要求1-24中任一项所述的肽或其盐，其为可裂解的前药的形式。

36.一种药物制剂，其包含：
(a)根据权利要求1-35中任一项所述的肽或其盐；和
(b)赋形剂、稀释剂或载体中的至少一种。

37.根据权利要求36所述的药物制剂，其包含赋形剂，其中所述赋形剂是螯合剂。

38.根据权利要求37所述的药物制剂，其中所述螯合剂是杀真菌螯合剂。

39.根据权利要求36所述的药物制剂，其包含稀释剂，其中所述稀释剂是水性酸。

40.根据权利要求36-39中任一项所述的药物制剂，其进一步包含半胱胺。

41.根据权利要求36-39中任一项所述的药物制剂，其进一步包含表面活性剂。

42.根据权利要求36-39中任一项所述的药物制剂，其为单位剂量形式。

43.根据权利要求36-39中任一项所述的药物制剂，其为片剂、液体、糖浆、口服制剂、静脉内制剂、鼻内制剂、眼用制剂、耳用制剂、皮下制剂、可吸入的呼吸制剂、栓剂及其任何组合的形式。

44.一种药物制剂，其包含：
(a)与以下序列的多肽具有约70％至约100％同源性的肽或其盐：
Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg；
Arg-Trp-Trp-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg；
Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg；
Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Val-Arg-Arg；
Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg-Trp-Trp-Arg-Arg；
Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Arg；
Val-Arg-Arg-Val-Trp-Arg-Arg-Val-Val-Arg-Val-Val-Arg-Arg-Trp-Va...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔纳森·D·斯特克贝克，
申请(专利权)人：肽逻辑公司，
类型：发明
国别省市：美国;US

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