本发明专利技术公开了一种生物菌剂，所述菌剂包括重量百分比为5～10％的PGPR菌液，所述菌剂中含有PGPR活菌量不少于1×1010CFU/ml。所述菌剂能够制成生物发酵菌肥和种衣剂，本发明专利技术的生物菌剂，不仅对于黄瓜枯萎病等真菌病害及黄瓜细菌性茎软腐病等细菌病害具有良好的防效，还可以改善连作条件下蔬菜的生长环境，增强蔬菜对土壤中难溶性磷的吸收和利用。从而有助于实现蔬菜的高产、安全、无公害生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，涉及到微生物菌剂，具体涉及主要成分是PGPR的生物菌剂，并且还涉及生物菌剂包括生物发酵菌肥和种衣剂的制备方法，还涉及到生物菌剂的应用。
技术介绍
随着设施连作年限的增加，连作障碍日趋严重，土传病原菌不断积累，并出现了土壤次生盐渍化，养分失衡，重金属污染，土壤微生态环境恶化等诸多问题，已严重影响了蔬菜的产量和品质，连作障碍已成为制约蔬菜生产可持续发展的重要因素，因此创造有利于蔬菜生长的土壤环境已成为一个亟待解决的问题。乙烯是植物体内五大内源激素之一，在较低的浓度下表现出明显的生理作用，即抑制茎的伸长生长、促进茎或根的增粗和使茎横向生长三重反应。植物一生大部分生长发育阶段需要乙烯的浓度比较低，一般植物组织中乙烯含量不超过0.11pmol，只有在快要成熟和衰老阶段才合成大量的乙烯。但是在土壤盐渍化、重金属超标、干旱及病原菌侵染条件下，植物体内乙烯合成前体1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)大量合成乙烯，持续大量合成的乙烯可以抑制根系伸长，阻碍根系生长。PGPR是根际周围土壤中的一群自生细菌，可以通过产生ACC脱氨酶将乙烯合成的直接前体ACC降解为α-丁酮酸和氨，以促进植物根的伸长，来吸取更多的营养物质、水分等。Mayak等检测无色杆菌对番茄根系的促生作用，结果显示接种无色杆菌的番茄根系在盐浓度为120mM时伸长了32.8mm，而未接种的为27.4mm，由此可见，ACC活性菌在高盐环境条件下能促进植物的生长。滕松山等从盐生植物碱蓬内分离到的ACC脱氨酶活性内生细菌SS12对萝卜枯萎病菌和黄瓜枯萎病菌具有拮抗作用。刘维红等采用富集筛选法，以ACC为唯一氮源从不同蔬菜植株根围中采集土样，筛选出46株ACC脱氨酶活性细菌，其中XG32菌株对番茄有明显的促生作用，对辣椒疫霉等植物病原体有一定的抑制作用。黄瓜枯萎病是黄瓜种植过程中发生的一种常见土传病害，多在开花结果后陆续发病，被害株最初表现为部分叶片或植株的一侧叶片中午萎蔫下垂，似缺水状，早晚可以恢复，以后萎蔫叶片不断增多，逐渐遍及全株，早晚不能复原，并很快枯死；黄瓜炭疽病近年来发生不断趋重，是由引进的种子带菌所造成的，春秋两季均有发生，防治难度较大，对生产影响巨大。黄瓜细菌性茎软腐病是近两年黄瓜生产上新发现的严重细菌性病害，目前市场上的防治细菌病害的化学杀菌剂和农用抗生素对该病害的防治效果均不理想，亟待开发防治该种病害的药剂。
技术实现思路
针对现状，本专利技术提供了一种生物菌剂，该生物菌剂主要成分是PGPR，能够有效的防治黄瓜枯萎病、黄瓜炭疽病、黄瓜细菌性角斑病和黄瓜细菌性茎软腐病。本专利技术还提供了该生物菌剂的制备方法，通过制成生物发酵菌肥和种衣剂来有效的防治黄瓜枯萎病、黄瓜炭疽病、黄瓜细菌性角斑病和黄瓜细菌性茎软腐病。为了实现本专利技术的目的，本专利技术提供如下技术方案：一种生物菌剂，所述菌剂包括重量百分比为5～10％的PGPR菌液，所述菌剂中含有PGPR活菌量不少于1×1010CFU/ml。优选地，所述PGPR为嗜麦芽寡养单胞菌菌液。其中，所述菌剂可以制成生物发酵菌肥，所述菌剂由以下重量份的成分组成：PGPR菌液5～10份、食用菌菌糠50～70份、黄粉虫虫粪5～25份、黄腐酸1～5份、FeSO4·7H2O 0.01～0.02份和ZnSO40.01～0.03份，其中，所述食用菌菌糠可以用草炭或生物炭代替；上述生物菌剂(生物发酵菌肥)的制备方法，包括如下步骤：(1)首先制备PAF培养基、ADF培养液和TSB液体培养基，所述PAF培养基配方为：蛋白胨10g，酪蛋白水解物10g，MgSO41.5g，K2HPO41.5g和甘油10ml，pH值7.5；ADF培养液配方为：KH2PO44.0g，Na2HPO46.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，葡萄糖2.0g，葡萄糖酸2.0g，柠檬酸2.0g，硫酸铵2.0g和微量元素0.1ml，所述微量元素每100ml中包含FeSO4·7H2O 1mg，H3BO310μg，MnSO4·H2O 11.19μg，ZnSO4·7H2O 124.6μg，CuSO4·5H2O 78.22μg，MoO310μg，pH值为7.2；所述TSB液体培养基的配方为：胰蛋白胨17g，大豆胨3g，NaCl 5g，葡萄糖2.5g和K2HPO42.5g，其pH值为7.5；(2)采集海边盐渍植物的根际土壤，称取1g根际土放入含50ml PAF培养液的三角瓶中，25℃或30℃、振荡速度为200r/min的条件下振荡培养24h，富集培养4d后，再转移1ml菌悬液至50ml ADF培养液中，继续25℃或30℃、振荡速度为200r/min条件下振荡培养48h，用于含ACC脱氨酶活性细菌的分离纯化，梯度稀释ADF培养液中菌悬液，涂布于ADF固体平板上，在温度为28℃的恒温箱中培养72h，划线分离，纯化后-80℃保存；(3)将纯化鉴定后的PGPR菌株接种于TSB液体培养基中，温度为28～30℃，振荡速度为200r/min的条件下振荡培养24h，测定菌悬液OD值达到0.8以上，菌量不少于1010CFU/ml后，用食用菌菌糠吸附，然后再分别加入黄粉虫虫粪、黄腐酸、FeSO4·7H2O和ZnSO4·7H2O，并且将含水量调成60％后用塑料薄膜覆盖进行发酵直到黄粉虫虫粪完全腐熟，用搅拌机搅拌均匀，装袋，即得生物发酵菌肥。所述生物菌剂还可以制成种衣剂，所述菌剂由以下重量份的成分组成：PGPR菌液50～100
份、营养载体6～14份、硅藻土600～800份、羧甲基纤维素钠10～20份、木质素磺酸钠60～80份、聚乙烯醇10～20份、FeSO4·7H2O 1～2份和ZnSO4·7H2O 1～3份，所述营养载体由腐殖酸1～2份、谷氨酸2～5份和玉米粉3～7份组成，所述菌即中含有PGPR活菌量为1～2×1010CFU/ml。上述生物菌剂(种衣剂)的制备方法，包括如下步骤：(1)首先制备PAF培养基、ADF培养液和TSB液体培养基，所述PAF培养基配方为：蛋白胨10g，酪蛋白水解物10g，MgSO41.5g，K2HPO41.5g和甘油10ml，pH值7.5；ADF培养液配方为：KH2PO44.0g，Na2HPO46.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，葡萄糖2.0g，葡萄糖酸2.0g，柠檬酸2.0g，硫酸铵2.0g和微量元素0.1ml，所述微量元素每100ml中包含FeSO4·7H2O 1mg，H3BO310μg，MnSO4·H2O 11.19μg，ZnSO4·7H2O 124.6μg，CuSO4·5H2O 78.22μg和MoO310μg，pH值为7.2；所述TSB液体培养基的配方为：胰蛋白胨17g，大豆胨3g，NaCl 5g，葡萄糖2.5g和K2HPO42.5g，其pH值为7.5；(2)将PGPR菌株接种于TSB液体培养基中，在温度为28～30℃、振荡速度为200r/min的条件下振荡培养24h，测定菌悬液OD值达到0.8以上、菌量为1～2×1010CFU/ml时，用所述营养载体和灭菌后的硅藻土进行吸附，然后分别加入所述羧甲基纤维素钠粘着剂、木质素磺酸钠分散剂、聚乙烯醇成膜剂、FeSO4·7H2O和ZnSO4·7H2O，混合均匀后即得种衣剂。所本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种生物菌剂，其特征在于，所述菌剂包括重量百分比为5～10％的PGPR菌液，所述菌剂中含有PGPR活菌量不少于1×1010CFU/ml。
【技术特征摘要】
1.一种生物菌剂，其特征在于，所述菌剂包括重量百分比为5～10％的PGPR菌液，所述菌剂中含有PGPR活菌量不少于1×1010CFU/ml。2.根据权利要求1所述的生物菌剂，其特征在于，所述PGPR菌液为嗜麦芽寡养单胞菌菌液。3.根据权利要求1所述的生物菌剂，其特征在于，所述菌剂由以下重量份的成分组成：PGPR菌液5～10份、食用菌菌糠50～70份、黄粉虫虫粪5～25份、黄腐酸1～5份、FeSO4·7H2O 0.01～0.02份和ZnSO4·7H2O 0.01～0.03份。4.根据权利要求3所述的生物菌剂，其特征在于，所述食用菌菌糠可以用草炭或生物炭代替。5.根据权利要求1所述的生物菌剂，其特征在于，所述菌剂由以下重量份的成分组成：PGPR菌液50～100份、营养载体6～14份、硅藻土600～800份、羧甲基纤维素钠10～20份、木质素磺酸钠60～80份、聚乙烯醇10～20份、FeSO4·7H2O 1～2份和ZnSO4·7H2O 1～3份，所述营养载体由腐殖酸1～2份、谷氨酸2～5份和玉米粉3～7份组成，所述菌液中含有PGPR活菌量为1～2×1010CFU/ml。6.一种如权利要求3或4所述的生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)首先制备PAF培养基、ADF培养液和TSB液体培养基，所述PAF培养基配方为：蛋白胨10g，酪蛋白水解物10g，MgSO4 1.5g，K2HPO4 1.5g和甘油10ml，pH值7.5；ADF培养液配方为：KH2PO4 4.0g，Na2HPO4 6.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，葡萄糖2.0g，葡萄糖酸2.0g，柠檬酸2.0g，硫酸铵2.0g和微量元素0.1ml，所述微量元素每100ml中包含FeSO4·7H2O 1mg，H3BO3 10μg，MnSO4·H2O 11.19μg，ZnSO4·7H2O 124.6μg，CuSO4·5H2O 78.22μg，MoO3 10μg，pH值为7.2；所述TSB液体培养基的配方为：胰蛋白胨17g，大豆胨3g，NaCl 5g，葡萄糖2.5g和K2HPO4 2.5g，其pH值为7.5；(2)采集海边盐渍植物的根际土壤，称取1g根际土放入含50ml PAF培养液的三角瓶中，25℃或30℃、振荡速度为200r/min的条件下振荡培养24h，然后富集培养4d后，再转移1ml菌悬液至50ml ADF培养液中，继续25℃或30℃、振荡速度为200r/min条件下振荡培养48h，用...
【专利技术属性】
技术研发人员：贺字典，高玉峰，
申请(专利权)人：河北科技师范学院，
类型：发明
国别省市：河北;13
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