生物型复合植物类疫苗及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种生物型复合植物类疫苗，以质量比计，疫苗由各原料组分按照以下比例配制：丙烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B‑1,4‑N‑氨基‑葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；或者，丁烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B‑1,4‑N‑氨基‑葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；香菇提取液所使用体积占总溶液体积的20％，纯化沼液所使用体积占总溶液体积的40％。本发明专利技术还提供一种生物型复合植物类疫苗制备方法。本发明专利技术疫苗是一种多功能、安全无毒、无残留、高效新型复合生物制剂。本植物疫苗对粮食作物、蔬菜、水果等多种主要农作物均具有抗病、驱虫、增产、改善品质、吸收快，见效快等多重功效，备优良的扩散性和渗透性。

【技术实现步骤摘要】
生物型复合植物类疫苗及制备方法
本专利技术属于农作物病虫病害防控
，具体是指一种生物型复合植物类疫苗及制备方法。
技术介绍
植物病毒病是危害损失较大、防治较难的一类病害，也被称为植物的"癌症"，成为世界性难题；因为植物病毒专性寄生在植物体内增殖，消耗植物营养，造成植物畸形生长或叶片黄化，一般化学药物很难破坏病毒粒子的结构，因此目前尚无理想的化学农药；在植物免疫诱抗剂的基础上，中国农科院植物保护所研制出中国第一个抗病毒蛋白质生物农药--"6％寡糖·链蛋白可湿性粉剂"，并获准上市；田间试验结果证明，该药剂对水稻条纹叶枯病的防治效果为65％；对草莓黄化曲叶病毒病的防治效果为68％；对烟草花叶病毒病的防治效果为75％；另外，转抗性基因植物是将抗性基因转到植物体中，让植物产生抗性蛋白抵抗病菌的侵入，而植物免疫诱抗剂通过诱导植物产生抗性物质，具有与抗性基因对病虫害的免疫抗性同等重要的作用；植物免疫激活蛋白就是一种新型的植物免疫诱抗农药；它是从多种致病真菌中分离获得的一类新型结构蛋白，多个品种均具有良好的刺激植物免疫活性增强的效能；代表产品包括已在农业部获得农药临时登记的"3％极细链格孢激活蛋白可湿性粉剂"、获得国家肥料临时登记的"普绿通植物免疫蛋白粉剂"等；植物免疫诱抗剂(或称之为植物疫苗)是继人用疫苗、动物疫苗后，疫苗工程技术出现的新领域，也是当前国际上生物农药创制较为热门的研究方向；该植物疫苗是科学家在揭示植物、病虫害、生物农药三者关系的理论基础上，科学控制病虫害的实践，具有提高农作物抗性和有效防控农作物病害的能力；目前市面上产生的植物疫苗功能单一，大多数本质上还是农药，在合成时对设备依耐性大，例如寡糖类的产品大部分与化学成分复配，本质上还是农药，存在药物残留。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种适用于诱导栽培作物抵抗病虫病害生的生物型复合植物类疫苗及制备方法。为实现上述目的，本专利技术一方面提供了一种生物型复合植物类疫苗，其特征在于：以质量比计，所述疫苗由各原料组分按照以下比例配制：丙烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B-1,4-N-氨基-葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；或者，丁烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B-1,4-N-氨基-葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；香菇提取液所使用体积占总溶液体积的20％，纯化沼液所使用体积占总溶液体积的40％。本专利技术另一方面提供一种生物型复合植物类疫苗的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)取烧瓶取蒸馏水100-120ml，调节PH为11-12，加入二氧化钛和五氧化二磷各5-6克，同时升高温度至50-52℃，充分搅拌反应1-2小时，取上清液加入另一烧瓶中，调节PH至6-6.5，作为原料A；(2)将丙烯酸、硫酸钾及苯乙烯磺酸钠按照质量比31.5：5.5:3.5混合，连续搅拌5-6min，用氢氧化钠调节PH值到6-6.5，加入沸石和30ml原料一，同时将烧瓶中的反应液温度逐步升高至85℃，该聚合过程控制在4-5小时内完成，完成后继续升温至95℃，再搅拌反应5h-7h，室温自然冷却后制备为原料B；(3)将硫酸钾、B-1,4-N-氨基-葡萄糖、水质量比为5.5:3.5:50的比例混合，充分摇匀后加入质量比为40％的原料A，在85℃至90℃水浴环境下连续搅拌3.5至4小时；反应结束后，调节溶液PH值到7-8，按照体积比为1.2:1加入无水乙醇，3-60min后，过滤出沉淀，用蒸馏水冲洗2-3次，干燥制备原料C；称取粉碎后的香菇粉末，加入蒸馏水，90至100℃条件下连续搅拌30min后冷却至室温，真空抽滤，放弃滤渣，留滤液，浓缩至滤液总体积为原来的40％，即可得到香菇提取液；(4)取菊苣茎与叶或废弃瓜果蔬菜、未发酵的鸡粪与水按照质量比为1：1:3：4的比例加入容器之中，取化粪池底部活性污泥，加入容器之中，进行密封发酵；发酵后充分搅拌10min后200目筛网过滤，取滤液静置后即为制得的纯化沼液；所述纯化沼液在发酵过程中，应保证密封完整确保缺氧环境；所述化粪池底部活性污泥为养殖场的化粪池底部活性污泥；所述划分次底部活性污泥使用量为总发酵的材料20％，温度在20℃以下，则需要发酵60天以上，温度在20℃，仅需发酵40天即可；将所述原料B与原料C按照质量比为1:3混匀，在70-80℃水浴连续搅拌反应18-20小时后，冷却至室温；再加入香菇提取液所使用体积占总溶液体积的20％，纯化沼液所使用体积占总溶液体积的40％拌混匀得到生物型复合配制疫苗。进一步地，所述步骤(4)中进行密封发酵：当温度在20摄氏度以下，则需发酵60天；当温度在20℃以上，则仅需发酵40天。本专利技术的优点及有益效果如下：本专利技术植物疫苗其有效成分包括K、纯化沼液、亚磷酸钾、磷、钾、钠、钙、香菇多糖、腐殖酸、赤霉素、生长素、抗生素和B-1，4-N-乙酰-葡萄糖胺寡聚体，可为作物提供有机碳源、钾肥、磷肥、生物激素及杀菌抗虫剂，是一种多功能、安全无毒、无残留、高效新型复合生物制剂。本植物疫苗对粮食作物、蔬菜、水果等多种主要农作物均具有抗病、驱虫、增产、改善品质、吸收快，见效快等多重功效，备优良的扩散性和渗透性；连续搅拌在磁力搅拌器上进行；复合植物疫苗保存在干燥，黑暗的环境下，在使用时，与水进行1：50—100的比例进行稀释，将稀释液喷洒在植物叶面，茎秆等均可。附图说明图1为植物疫苗对草莓灰霉病和早疫病菌株生长的影响；图1中：A为草莓灰霉病对照组，B为草莓灰霉病处理组，C为草莓早疫病对照组，D为草莓早疫病处理组。图2为植物疫苗对番茄灰霉病和早疫病菌株生长的影响和植物疫苗对青椒枯萎病菌株生长的影响；图2中：E为番茄灰霉病对照组，F为番茄灰霉病处理组，G为番茄早疫病对照组，H为番茄早疫病处理组，图3为植物疫苗对青椒枯萎病菌株生长的影响；图3中：为Y青椒枯萎病对照组，Z为青椒枯萎病处理组。具体实施方式本专利技术所使用的试剂没有特别的限制，可采用商购的常规试剂，以下结合实施例及附图对本专利技术的技术方案作进一步具体的说明。本专利技术生物型复合植物类疫苗的制备方法，具体操作步骤如下：1、取烧瓶取蒸馏水100ml，调节PH至12左右，加入二氧化钛和五氧化二磷各五克，同时升高温度50℃，充分搅拌反应1-2小时，用移液器取上清液加入另一烧瓶中，调节PH至6，作为原料1；2、将丙烯酸、硫酸钾及苯乙烯磺酸钠按照质量比31.5：5.5:3.5混合，连续搅拌5min，用氢氧化钠调节PH值到6-6.5，加入沸石，加入30ml原料1，同时将烧瓶中的反应液温度逐步升高至85℃，该聚合过程控制在4-5小时内完成，完成后继续升温至95℃，再搅拌反应5h-7h，室温自然冷却后制备为原料B；3、将硫酸钾、B-1，4-N-氨基-葡萄糖、水质量比为5.5:3.5:50的比例混合，充分摇匀后加入40ml原料1，在85℃至90℃水浴环境下连续搅拌3.5至4小时，反应结束后，调节溶液PH在7-8的范本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物型复合植物类疫苗，其特征在于：以质量比计，所述疫苗由各原料组分按照以下比例配制：丙烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B-1,4-N-氨基-葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；或者，丁烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B-1,4-N-氨基-葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；香菇提取液所使用体积占总溶液体积的20％，纯化沼液所使用体积占总溶液体积的40％。/n

【技术特征摘要】
1.一种生物型复合植物类疫苗，其特征在于：以质量比计，所述疫苗由各原料组分按照以下比例配制：丙烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B-1,4-N-氨基-葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；或者，丁烯酸：苯乙烯磺酸钠：硫酸钾：B-1,4-N-氨基-葡萄糖＝31.5：3.5：5.5：3.5；香菇提取液所使用体积占总溶液体积的20％，纯化沼液所使用体积占总溶液体积的40％。


2.一种制备如权利要求1所述生物型复合植物类疫苗的方法，其特征在于：它包括以下步骤：
(1)取烧瓶取蒸馏水100-120ml，调节PH为11-12，加入二氧化钛和五氧化二磷各5-6克，同时升高温度至50-52℃，充分搅拌反应1-2小时，取上清液加入另一烧瓶中，调节PH至6-6.5，作为原料A；
(2)将丙烯酸、硫酸钾及苯乙烯磺酸钠按照质量比31.5：5.5:3.5混合，连续搅拌5-6min，用氢氧化钠调节PH值到6-6.5，加入沸石和30ml原料一，同时将烧瓶中的反应液温度逐步升高至85℃，该聚合过程控制在4-5小时内完成，完成后继续升温至95℃，再搅拌反应5h-7h，室温自然冷却后制备为原料B；
(3)将硫酸钾、B-1,4-N-氨基-葡萄糖、水质量比为5.5:3.5:50的比例混合，充分摇匀后加入质量比为40％的原料A，在85℃至90℃水浴环境下连续搅拌3.5至4小时；...

【专利技术属性】
技术研发人员：程正海，
申请(专利权)人：武汉生物工程学院，
类型：发明
国别省市：湖北;42