一种清热八味丸的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种清热八味丸的质量检测方法，属于药物分析领域。本发明专利技术对现有的清热八味丸质量标准进行了相应提高，在原质量标准基础上增加了胡黄连和苦地丁专属性较强的鉴别方法；增加了羟基红花黄色素A的含量测定方法，本发明专利技术具有方法简便、速度快、重现性好等特点，所建立的鉴别及含量测定方法经方法学验证满足相关要求，适用性强，能够更全面的反映产品质量状况，为质量控制及制定标准提供了重要依据。

A detection method of Qingre Bawei pill

The invention provides a quality detection method of Qingre Bawei pill, which belongs to the field of drug analysis. The invention improves the quality standard of the existing Qingre Bawei pill, and on the basis of the original quality standard, increases the identification method with strong specificity of huhuanglian and kudieding; increases the content determination method of hydroxysafflor yellow a. the invention has the characteristics of simple method, fast speed, good reproducibility, etc., and the established identification and content determination method meets the requirements of the phase by the method verification It can reflect the quality of products more comprehensively and provide an important basis for quality control and standard setting.

【技术实现步骤摘要】
一种清热八味丸的检测方法
本专利技术涉及一种蒙药的质量检测方法，特别涉及一种蒙药产品清热八味丸的质量检测方法，属于药物分析

技术介绍
清热八味丸作为一种已有国家药品质量标准的蒙药制剂产品，由檀香、石膏、红花、苦地丁、瞿麦、胡黄莲、麦冬、人工牛黄制备而成，具有清热解毒的功效，用于炽热、血热、脏腑之热，肺热咳嗽，痰中带血，肝火肋痛等症。该药品在临床上应用多年，是国家基本药物，在清热解毒方面取得比较好的治疗效果。现行质量标准中包括性状、显微鉴别、理化鉴别、检查、以及用薄层色谱法对人工牛黄的含量进行测定等项目，无对其他药用成分专属性强的薄层色谱鉴别和高效液相含量测定的方法。为更有效地控制产品质量，本检测方法增加了清热八味丸中苦地丁和胡黄连薄层鉴别，以及处方中的主要成分红花中的羟基红花黄色素A的高效液相色谱含量测定方法，为更好地控制清热八味丸的产品质量提供科学依据。
技术实现思路
本专利技术对现有的清热八味丸质量标准进行了相应提高，在原质量标准基础上增加了苦地丁和胡黄连专属性较强的鉴别方法；增加了处方中的主要成分红花中的羟基红花黄色素A的含量测定方法，该方法精密度、稳定性、专一性、灵敏度较清热八味丸原质量标准均有所提高，进一步确保了产品质量安全、均一、稳定、有效、可控。本专利技术的技术方案如下：一种清热八味丸的质量检测方法,该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种：利用薄层色谱法对胡黄连、苦地丁和人工牛黄进行定性鉴别以及用高效液相色谱法羟基红花黄色素A的含量进行测定。本专利技术的鉴别方法，采用以下方法：胡黄连的鉴别：供试品溶液的制备：取本品2～5g，采用研细方式，加10％硫酸溶液10～20ml，加热回流10～30min，放冷，用三氯甲烷萃取2次，每次10～15ml，合并三氯甲烷液，浓缩至1～3ml，作为供试品溶液。对照药材溶液的制备：取胡黄连对照药材0.8～1.5g，加10％硫酸溶液10～20ml，加热回流10～30min，放冷，用三氯甲烷萃取2次，每次10～15ml，合并三氯甲烷液，浓缩至1～3ml，作为对照药材溶液。对照品溶液的制备：取香草酸对照品、肉桂酸对照品适量，分别加三氯甲烷制成每1ml含1.8～2.5mg的溶液，作为对照品溶液。鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5～15μl、对照药材溶液、对照品溶液各3～8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以3～8：3～8：0.1正己烷-乙醚-冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。苦地丁的鉴别：供试品溶液的制备：取本品2～5g，采用研细方式，加浓氨水0.8～1.5ml浸润，加三氯甲烷15～25ml，放置8～15h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8～1.5ml使溶解，作为供试品溶液。对照药材溶液的制备：取苦地丁对照药材0.8～1.5g，加浓氨水0.8～1.5ml浸润，加三氯甲烷15～25ml，放置8～15h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1～2ml使溶解，作为对照药材溶液。鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各5～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5～10：1～3：1环己烷-三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点。本专利技术的含量测定方法，羟基红花黄色素A的含量测定，步骤如下：供试品溶液的制备：取本品粉末，置具塞锥形瓶中，加入20～30％甲醇溶液，称定重量，超声处理，再称定重量，用20％～30％甲醇补足减失的重量，过微孔滤膜，即得。对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A对照品适量，加20～30％甲醇水溶液制成每1ml含0.10～0.15mg对羟基红花黄色素的溶液，即得。含量测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各8～15μl，注入液相色谱仪，测定，即得。其中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以5～15：1：30～50的甲醇-乙腈-0.7％磷酸为流动相；检测波长为380～420nm；流速0.6～1.5ml/min；柱温30～40℃，进样量5～15μl。优选的，本专利技术的含量测定方法，羟基红花黄色素A的含量测定，步骤如下：高效液相色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，具体选自以下规格中的一种：5μm250mm×4.6mm、5μm150mm×4.6mm；以5～15：1：30～50的甲醇-乙腈-0.7％磷酸为流动相；检测波长为380～420nm；流速0.6～1.5ml/min；柱温30～40℃，进样量5～15μl。供试品溶液的制备：取本品粉末约1.5～2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入20％～30％甲醇40～60ml，称定重量，超声功率300W，频率50kHz，处理30～60分钟，放冷至室温，再称定重量，用20％～30％甲醇补足减失的重量，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液，即得。对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加20～30％甲醇水溶液制成每1ml含0.10～0.15mg的溶液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各8～15μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本专利技术含量测定方法的验证：1.仪器与试药岛津LC-20AT液相色谱仪；LabSolutions工作站；紫外检测器；对照品：羟基红花黄色素A对照品(中国食品药品检定研究院，编号111637-201810，含量93.1％)；供试品三批(批号分别为1806040、1808044、1806080)；甲醇、乙腈为色谱纯；水为高纯水。2.测定波长的选择参照《中国药典》2015年版一部“红花”项下的规定，选用403nm作为检测波长。3.色谱条件色谱柱：GRACEC18柱(250mm×4.6mm，5μm)及ThermoHypersil柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：参照《中国药典》2015年版一部药材“红花”含量测定项下的流动相比例，样品中羟基红花黄色素A较早出峰，保留时间较小，调整流动相比例至甲醇-乙腈-0.7％磷酸(9:1:40)，羟基红花黄色素A与其它成分达到较好的分离，并具适合的保留时间，但拖尾现象较严重，在0.7％磷酸溶液中加入1.5％三乙胺后，可有效解决色谱峰拖尾现象。流速1ml/min；柱温35℃；进样量10μl。4.专属性试验供试品溶液的制备：取本品粉末约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25％甲醇50ml，称定重量，超声功率300W，频率50kHz，处理40分钟，放冷至室温，再称定重量，用25％甲醇补足减失的重量，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液，即得。对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25％甲醇水溶液制成每1ml含0.13mg的溶液；阴性样品溶液的制备：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种清热八味丸的检测方法，其特征在于，该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种：利用薄层色谱法对胡黄连和苦地丁进行定性鉴别以及用高效液相色谱法对羟基红花黄色素A的含量进行测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种清热八味丸的检测方法，其特征在于，该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种：利用薄层色谱法对胡黄连和苦地丁进行定性鉴别以及用高效液相色谱法对羟基红花黄色素A的含量进行测定。


2.根据权利要求1所述的清热八味丸的检测方法，其特征在于，所述的胡黄连和苦地丁的定性鉴别包括如下步骤：
胡黄连的鉴别：
供试品溶液的制备：取本品2～5g，采用研细方式，加10％硫酸溶液10～20ml，加热回流10～30min，放冷，用三氯甲烷萃取2次，每次10～15ml，合并三氯甲烷液，浓缩至1～3ml，作为供试品溶液；
对照药材溶液的制备：取胡黄连对照药材0.8～1.5g，加10％硫酸溶液10～20ml，加热回流10～30min，放冷，用三氯甲烷萃取2次，每次10～15ml，合并三氯甲烷液，浓缩至1～3ml，作为对照药材溶液；
对照品溶液的制备：取香草酸对照品、肉桂酸对照品适量，分别加三氯甲烷制成每1ml含1.8～2.5mg的溶液，作为对照品溶液；
鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5～15μl、对照药材溶液、对照品溶液各3～8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以3～8：3～8：0.1正己烷-乙醚-冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
苦地丁的鉴别：
供试品溶液的制备：取本品2～5g，采用研细方式，加浓氨水0.8～1.5ml浸润，加三氯甲烷15～25ml，放置8～15h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.8～1.5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备：取苦地丁对照药材0.8～1.5g，加浓氨水0.8～1.5ml浸润，加三氯甲烷15～25ml，放置8～15h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1～2ml使溶解，作为对照药材溶液；
鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各5～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5～10：1～3：1环己烷-三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点。


3.根据权利要求1所述的清热八味丸的检测方法，其特征在于，所述羟基红花黄色素A的含量测定方法包括以下步骤：
供试品溶液的制备：取本品粉末，置具塞锥形瓶中，加入20～30％甲醇溶液，称定重量，超声处理，再称定重量，用20％～30％甲醇补足减失的重量，过微孔滤膜，即得；
对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A对照品适量，加20～30％甲醇水溶液制成每1ml含0.10～0.15mg对羟基红花黄色素的溶液，即得；
含量测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各8～15μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
其中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以5～15：1：30～50的甲醇-乙腈-0.7％磷酸为流动相；检测波长为380～420nm；流速0.6～1.5ml/min；柱温30～40℃，进样量5～15μl。


4.根据权利要求2所述的清热八味丸的检测方法，其特征在于：
胡黄连的鉴别：
供试品溶液的制备：取本品3g，采用研细方式，加10％硫酸溶液15ml，加热回流15min，放冷，用三氯甲烷萃取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，浓缩至2ml，...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢界红，刘庆玲，龙泉洪，于秀玲，
申请(专利权)人：内蒙古蒙药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙;15