cIMP的药物新用途制造技术

本发明专利技术公开了cIMP(环次黄嘌呤核苷酸)的一种药物新用途。本发明专利技术所提供的药物新用途是cIMP在制备心功能增强剂中的应用。本发明专利技术研究发现cIMP处理能显著降低L‑型钙离子通道(LCC)钙电流密度，对钙瞬变的幅度并引起明显改变；cIMP能有效增强心肌细胞或整体心脏的兴奋收缩耦联的效率，从而可能成为心力衰竭，心肌炎，心梗等心功能减弱疾病的治疗成分。

New uses of CIMP

The invention discloses a new drug use of CIMP (cyclic hypoxanthine nucleotide). The new use of the medicine provided by the invention is the application of CIMP in the preparation of cardiac function enhancer. The invention finds that the treatment of CIMP can significantly reduce the calcium current density of L \u2011 type calcium channel (LCC), and cause significant changes in the magnitude of calcium transients; the treatment of CIMP can effectively enhance the efficiency of excitation contraction coupling of cardiac myocytes or the whole heart, so that it may become a treatment component for heart failure, myositis, myocardial infarction and other heart function weakening diseases.

【技术实现步骤摘要】
cIMP的药物新用途
本专利技术属于医药领域，具体涉及一种cIMP的药物新用途。
技术介绍
cIMP是一种环核苷酸，即环次黄嘌呤核苷酸，是环状的DNA/RNA的单体，戊糖的3‘，5’羟基分别和同一磷酸成键，形成环状化合物。同家族的如环腺嘌呤腺苷酸(cAMP)和环鸟嘌呤核苷酸(cGMP)是目前已经熟知的第二信使分子，它们介导的信号广泛参与调节细胞的各种生理活动与物质代谢。除cAMP和cGMP之外其他的环核苷酸分子如环次黄嘌呤核苷酸cIMP的存在已经逐渐被证实。使用高特异性及灵敏度的高效液相色谱与质谱串联的方法，已经检测到纯化的可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)在体外底物存在的体系中可以催化三磷酸肌苷(ITP)环化成cIMP。也有报道显示猪的冠状动脉血管组织中sGC在缺氧的条件下增加cIMP的合成介导与cGMP舒张相反的作用，引起血管缺氧的急性收缩。除此之外，cIMP能通过cAMP的脱氨作用生成进而抑制cAMP依赖的调控作用。与广泛研究的cAMP和cGMP心功能调控机制相比较，目前对cIMP在心脏中的生物作用还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种cIMP(环次黄嘌呤核苷酸)的药物新用途。本专利技术所提供的cIMP的药物新用途是其在制备心功能增强剂中的应用。所述心功能增强剂可用于预防和/或治疗心功能减弱的疾病，如心力衰竭，心肌炎，心梗等。本专利技术研究发现cIMP处理能显著降低L-型钙离子通道(LCC)钙电流密度，对钙瞬变的幅度并引起明显改变；cIMP能有效增强心肌细胞或整体心脏的兴奋收缩耦联的效率，从而可能成为心力衰竭，心肌炎，心梗等心功能减弱疾病的治疗成分。以cIMP为活性成分制备的心功能增强剂也属于本专利技术的保护范围。需要的时候，在上述心功能增强剂中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。所述药物可以制成注射液、悬浮剂、粉剂、片剂、颗粒剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。附图说明图1为cIMP对心肌细胞LCC电流及钙瞬变的作用。图2为cIMP能增加心肌细胞兴奋收缩耦联的效率。图3为实施例3中心室肌细胞L-型钙电流的I-V曲线刺激参数。图4为心室肌细胞L-型钙电流及钙瞬变记录模式图。图5为IMP对心肌细胞LCC电流及钙瞬变的作用。图6为对比例1中心室肌细胞L-型钙电流的I-V曲线刺激参数。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术的方法进行说明，但本专利技术并不局限于此，凡在本专利技术的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。cIMP的商品化的试剂可以从sigma购买到。实施例1、cIMP对心肌细胞L-型钙离子通道(LCC)钙电流与钙瞬变的作用cIMP是一种水溶性小分子，其细胞膜渗透性较低。为了研究其在细胞内部的作用，采用全细胞膜片钳技术，将cIMP溶入细胞内液中，当电极与细胞形成高阻封接，对细胞破膜后，电极管中cIMP随着细胞内液进入细胞中，此时通过电生理记录电压依赖的钙电流结合激光共聚焦钙成像技术同步检测钙瞬变，有效的检测cIMP的作用。通过与对照组记录的钙电流与钙瞬变比较发现，cIMP能使电压依赖的L-型钙通道的电流密度减小，差异具有显著性(p<0.05)，对钙瞬变的幅度并引起明显改变，结果如图1所示。图1中A记录到心肌细胞LCC钙电流与钙瞬变的示意图，左上是对照组与cIMP处理组电流比较示意图，左下是对照组与cIMP处理组钙瞬变的原始记录图；B，对照组与cIMP处理组电流密度统计结果，cIMP处理能显著降低LCC钙电流密度，p<0.05，n>6；C，对照组与cIMP处理组钙瞬变统计结果，两组无显著差异。实施例2、cIMP增加心肌细胞兴奋收缩耦联的效率心肌细胞兴奋收缩耦联是心肌细胞功能的重要体现，用心肌细胞钙瞬变与钙电流的比值来评估心肌细胞兴奋收缩耦联的效率。计算结果显示，cIMP能增加心肌细胞兴奋收缩耦联的效率，结果如图2所示。实施例3、一、成年大鼠心肌细胞分离台式液(mM)：130NaCl，5.4KCl，0.5MgCl2，25Hepes，0.33NaH2PO4，22Glucose，用NaOH调节pH至7.35。台式液预先充氧气30分钟以上并在灌流过程中持续充氧。酶液1：台式液35mL，8.75LCaCl2(0.2M)，II型胶原酶25mg，XIV型蛋白酶3mg。酶液2：10mL酶液1，7.5LCaCl2(0.2M)。酶液3：15mL酶液1，50LCaCl2(0.2M)，BSA40mg。复钙液：台式液20mL，100LCaCl2(0.2M)，BSA40mg。细胞外液(mM)：135NaCl，4.0KCl，1.0CaCl2，1.0MgCl2，1.2NaH2PO4，10Glucose，10HEPES，NaOH调pH至7.35。大鼠用20％乌来糖溶液麻醉(1mL/100g)，待动物麻醉后，打开胸腔，取出心脏。待心脏在冷冻台式液中排除残留血液后，将主动脉插入langendoff灌流管前端针头，并用细线结扎。使用循环水浴系统维持灌流液恒温37℃，灌流速度为3ml/min。先用无钙台式液灌流液将心脏内部血液排除后，再用酶液1灌流。用酶液2灌流循环大约15分钟，待心脏变软时将左心室剪下(不要心房及右心室)并在37℃酶液3中剪碎。剪碎的心肌组织和酶液3混悬后在离心机上以500转的速度离心1分钟，去除酶液，用复钙液重悬细胞沉淀。组织碎渣继续与酶液3混悬后500转离心1分钟，去酶液，用复钙液重悬细胞沉淀，重复3次，至碎渣没有细胞为止。将几次重悬细胞的收集液合并，静置30分钟使细胞沉淀，吸掉上清，加入适量细胞外液重悬细胞即可用于后续实验。二、全细胞膜片钳电生理记录与激光共聚焦钙成像放大器采用EPC-7(HEKA)，数模/模数转换器采用Digidata1200SERIESINTERFACE(MolecularDevices)，采集软件采用Clampex6(MolecularDevices)。记录外液在标准细胞外液的基础上加入4mM4-氨基吡啶(4-AP)和15μM河豚毒素(TTX)，以阻断瞬时外向钾电流和钠电流，HCl调pH至7.35。电极内液(mM)：110CsCl，6MgCl2，5Na2ATP，10HEPES，15TEA·Cl，CsOH调pH至7.2。其中以Cs+取代K+以及加入TEA是为了阻断钾电流。实验前在电极内液中加入200μMFluo-4钾盐。全本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.环次黄嘌呤核苷酸在制备心功能增强剂中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.环次黄嘌呤核苷酸在制备心功能增强剂中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述心功能增强剂用于预防和/或治疗心功能减弱的疾病。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述心功能减弱的疾病包括：心力衰竭、心肌炎和心梗。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于：所述心功能增强剂能增加心肌细胞兴奋收缩耦联的效率。


5.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于：所述心功能增强剂能显著...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈争菊，高远生，王世强，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京;11