含有生物活性分子的组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种制备含有生物活性分子的组合物的方法，所述方法包括以下步骤：a、用pH≥11的碱溶解具有至少一个酸基的生物活性分子以获得溶液A，b、用酸中和所述溶液A，以获得pH值为6‑9的含有生物活性分子的组合物，其中，在所述碱和/或所述酸为无机化合物的情况下，在中和步骤之前加入PEG，本发明专利技术还涉及一种含有高浓度的纳他霉素的组合物。

Composition containing bioactive molecules

The invention relates to a method for preparing a composition containing bioactive molecules, the method comprises the following steps: A. dissolving the bioactive molecules with at least one acid group with a pH \u2265 11 to obtain a solution a, B. neutralizing the solution a with an acid to obtain a composition containing bioactive molecules with a pH of 6 \u2011 9, wherein the alkali and / or the acid are inorganic compounds In the case of adding peg before neutralization step, the invention also relates to a composition containing high concentration of natamycin.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含有生物活性分子的组合物
本专利技术涉及制备含水组合物的方法，该组合物含有具有酸官能团的生物活性分子，本专利技术还涉及用这种方法获得的组合物、含有生物活性分子的组合物和这种组合物的用途。
技术介绍
具有酸官能团的生物活性分子是本领域已知的。这种分子通常在水中具有较差的溶解度，但对真菌、细菌显示出活性，这种分子可能具有抗癌活性或可能是植物激素。这些化合物中的一些可具有环结构，包括许多共轭双键、羟基和海藻糖胺(mycosamine)基；这种化合物的实例为纳他霉素、两性霉素B、制霉菌素和菲律宾菌素。植物激素的实例为赤霉酸(GA3、GA4、GA7)；其他化合物为生长素(吲哚-3-乙酸)、吲哚-3-丁酸-脱落酸(S-ABA)和桦木酸。所有组分的共同之处在于它们具有至少一个羧酸基并且显示出生物活性，并且在水中的溶解度低，例如小于100mg/l水。生物活性分子的一个特定实例为纳他霉素，也称为匹马菌素，其是有效的抗真菌剂。它对霉菌和酵母菌发挥广泛的体外活性，尤其是对念珠菌、曲霉菌、青霉菌、头孢菌和镰刀菌属发挥广泛的体外活性。在1955年被分离提取后，已发现它广泛应用于食品的保存，特别是应用于烘焙产品、肉制品、饮料和乳制品(特别是奶酪)的保存。与许多其他允许用于食品应用的杀真菌剂相比，纳他霉素似乎具有更广谱的活性。尽管纳他霉素具有抗真菌的潜力，但其在临床医学中的用途仍然有限。这主要是由于纳他霉素在与人类给药相容的各种溶剂(水性的和有机的)中的低溶解度。例如，在水中的溶解度为30-50mgL-1，并且在乙醇中的溶解度为0.04-1.2gL-1；只有溶解的部分才具有抗真菌活性。在常规的基于纳他霉素的药物制剂(诸如用于局部治疗皮肤感染的乳膏)中，纳他霉素以主要不溶的结晶形式存在，导致活性纳他霉素的低生物利用度。试图在局部制剂中增加溶解的纳他霉素的量通常使溶解的纳他霉素和抗真菌活性的增加一小部分，这对于许多应用仍然是不足的。其他尝试确实导致溶解的纳他霉素的量显著更高，但是这样的制剂具有以下缺点：抗真菌活性没有相应地增加(或甚至降低)，或者需要存在不期望的增溶剂。纳他霉素的偶然成功的医学应用是在角膜真菌感染的治疗中，以及隐形眼镜使用者对这种感染的预防中。然而，这些制剂是悬浮液，其中，可溶性的和生物活性的纳他霉素的量是非常少的。通常已知纳他霉素可以溶解在具有高pH的水性溶剂中。这种方法可用于纯化纳他霉素。在专利CN102742581中，该方法用于有效地使溶解的纳他霉素与羟丙基β-环糊精接触，以产生纳他霉素-环糊精复合物。本领域已知使用不同类型的环糊精(发现β-环糊精(β-CD)、羟丙基β-环糊精(HPβ-CD)和γ-环糊精(γ-CD)以形成包合物)可以制备具有纳他霉素的包合物/化合物。纳他霉素是这种包合物中的客体分子，包合物中主体分子的部分的杯形的形状和大小对于能够形成这种复合物是至关重要的。然而，在水中与环糊精复合的纳他霉素的浓度仍然很低，这限制了该溶液用于各种应用的可用性。因此，需要具有更高量的溶解的纳他霉素的药物制剂，而不影响抗真菌活性和/或没有从药学观点来看的不期望的组分。进一步地，当口服时，几乎没有或没有纳他霉素从胃肠道吸收，使其不适合用于治疗全身性感染。试图将纳他霉素溶解于对人类胃肠外给药安全的载体中尚未成功。因此，还需要适用于胃肠外应用的有效的纳他霉素制剂。纳他霉素的低溶解度也为其作为食品防腐剂的应用带来了问题。尽管结晶形式的纳他霉素的应用在某些情况下可能对此有效，但实际上还需要含有更细分形式的固体纳他霉素或完全溶解的纳他霉素的纳他霉素组合物。例如，鉴于喷嘴的堵塞和当悬浮液应用于表面(例如奶酪的表面)上时形成非均匀分布，纳他霉素以晶体的水悬浮液形式的常规应用是不期望的。此外，为了获得相同的抗真菌效果，更细分形式的纳他霉素或完全溶解的纳他霉素可能使得可以应用较低剂量的那他霉素。纳他霉素的特定应用是保护农产品(特别是植物繁殖材料，诸如种子和花卉球茎)免受真菌侵害。然而，纳他霉素的有效性在这种产品上似乎是有限的，可能是因为固体纳他霉素对存在于农产品的裂缝中或表面下的真菌的接触有限。完全溶解或以较小颗粒存在的纳他霉素可能因此是更有效的。另一方面，当以有效抗真菌的浓度应用时，现存的杀真菌剂(诸如福美双)可能具有植物毒性。而且，唑类杀菌剂在目标真菌中产生耐药性，例如通过90年代初以来的3个独立突变在烟曲霉中产生耐药性。由于直接作用于真菌细胞膜的麦角甾醇的模式，纳他霉素不易引起耐药性发展。因此，纳他霉素的低溶解度是需要克服的障碍，以在一些应用中获得更高的有效性。高浓度的溶解的纳他霉素的另一个优点是可以制备纳他霉素原液。
技术实现思路
因此，本专利技术的目的是提供能够有效抗真菌形式的纳他霉素。特别地，其目的是提供一种纳他霉素组合物，该组合物具有比已知组合物更高浓度的纳他霉素，并且该组合物在很长一段时间内是稳定的。以高浓度含有纳他霉素的该组合物也可用作原液以制备具有较低浓度的纳他霉素的组合物，例如通过用水稀释。特别地，本专利技术的目的是提供适用于医学应用的生物活性分子(特别是纳他霉素)的有效制剂，用于保存食品和/或农产品以抵抗真菌。现在令人惊讶地发现，通过制备含有生物活性分子的组合物的方法可以达到这些目的中的一个或多个，所述方法包括以下步骤：a、用pH≥11的碱溶解具有至少一个酸基的生物活性分子以获得溶液A，b、用酸中和所述溶液A，以获得pH值在6-9之间的含有所述生物活性分子的所述组合物，其中，在所述碱和/或所述酸是无机化合物的情况下，在中和步骤之前加入PEG。具体实施方式生物活性分子可以作为文献中已知的纯化学组分存在，或者它可以与加入到该方法中的组分或在制备本专利技术组合物的方法中形成的组分中的一种作为加合物存在。特别地，生物活性分子可以作为纯组分与碱(无机或有机碱)的反应产物存在，该反应产物可以产生在水性环境中溶解度增加的离子对。此处和下文中术语生物活性分子必须理解为包括纯生物活性分子和与组合物的一种组分反应时可以形成的任何加合物。作为实例，纳他霉素可以作为根据式(I)的纯化学分子存在，或作为与其他组分(如碱、酸和/或任选的PEG组分)的加合物存在。纳他霉素。不希望受任何理论的束缚，据信这些加合物可以是可逆的并且可以具有比中性纳他霉素更高的溶解度，并且在稀释或应用于生物系统时提供生物活性的纳他霉素。此处和下文中术语纳他霉素必须理解为包括纯纳他霉素和与组合物的一种组分反应时可以形成的任何加合物。生物活性分子优选选自由纳他霉素、两性霉素B、制霉菌素、菲律宾菌素、赤霉酸(GA3、GA4、GA7)、生长素(吲哚-3-乙酸)、吲哚-3-丁酸-脱落酸(S-ABA)和桦木酸组成的组。更优选地，生物活性分子选自纳他霉素和两性霉素B，最优选地，生物活性分子为纳他霉素。通常，相对于组合物的总重量，生物活性分子的量为0.1-20wt％，更优选为1-18wt％、3-12或最优选为4-10wt％。优选地，水的量为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备含有生物活性分子的组合物的方法，所述方法包括以下步骤：/na、用pH≥11的碱溶解具有至少一个酸基的生物活性分子以获得溶液A，/nb、用酸中和所述溶液A，以获得pH值为6-9的含有生物活性分子的所述组合物，/n其中，在所述碱和/或所述酸为无机化合物的情况下，在所述中和步骤之前加入PEG。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20160928 NL 20175451.一种制备含有生物活性分子的组合物的方法，所述方法包括以下步骤：
a、用pH≥11的碱溶解具有至少一个酸基的生物活性分子以获得溶液A，
b、用酸中和所述溶液A，以获得pH值为6-9的含有生物活性分子的所述组合物，
其中，在所述碱和/或所述酸为无机化合物的情况下，在所述中和步骤之前加入PEG。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物活性分子优选选自由纳他霉素、两性霉素B、制霉菌素、菲律宾菌素、赤霉酸(GA3、GA4、GA7)、生长素(吲哚-3-乙酸、吲哚-3-丁酸)-脱落酸(S-ABA)和桦木酸组成的组。


3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物活性分子为纳他霉素。


4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述生物活性分子的重量％为0.1-20wt％，更优选为1-18wt％、3-12wt％或最优选为4-10wt％。


5.根据权利要求3或4所述的方法，其中，纳他霉素和水之间的重量比为1:0.5至1:12，优选地，纳他霉素和水之间的重量比为1:0.55至1:10或1:0.6至1:9。


6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中，所述碱为有机碱，所述有机碱选自由氢氧化胆碱、氯化胆碱、酒石酸氢胆碱、酒石酸单氢胆碱、柠檬酸二氢胆碱、支链聚乙烯亚胺？、四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵和四丁基氢氧化铵组成的组。


7.根据权利要求6所述的方法，其中，相对于所述组合物的总量，有机碱的量为4-30wt％，例如10-25wt％。


8.根据上述权利要求中任意一项所述的方法，其中，所述生物活性分子为纳他霉素，并且所述有机碱为氢氧化胆碱，并且其中，纳他霉素和氢氧化胆碱之间的重量比为1:0.4至1:100，优选为1:0.45至1:20或1:0.5至1:8。


9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中，所述有机酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·A·M·利特范，
申请(专利权)人：尤卡优管理公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL