能够促进苗木不定根和次生根发育的根际真菌及用途。本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种美洲黑杨根际真菌壳多孢菌(Stagonosporopsis ajacis 16W)菌株及其功能。本发明专利技术公开了一种根际真菌菌株(美洲黑杨根际真菌菌株)16W，为Stagonosporopsis ajacis，保藏号：CGMCC No.18136。本发明专利技术还同时公开了上述根际真菌菌株16W的用途：用于促进植物不定根和次生根的发育，从而促进植物的生长。
Rhizosphere fungi that can promote the development of adventitious and secondary roots of seedlings and their uses
Rhizosphere fungi that can promote the development of adventitious and secondary roots of seedlings and their uses. The invention belongs to the field of biotechnology, in particular to a rhizosphere fungus of Populus deltoides (stagonosporopsis ajacis 16W) strain and its function. The invention discloses a rhizospheric fungus strain (Populus deltoides rhizospheric fungus strain) 16W, which is stagonosporopsis ajacis, and the storage number is CGMCC no.18136. The invention also discloses the use of the rhizosphere fungus strain 16W: for promoting the development of adventitious roots and secondary roots of plants, thereby promoting the growth of plants.
【技术实现步骤摘要】
能够促进苗木不定根和次生根发育的根际真菌及用途
本专利技术属于生物
，具体涉及一种美洲黑杨根际真菌壳多孢菌(Stagonosporopsisajacis16W)菌株及其功能。
技术介绍
漫长的进化过程促使植物与微生物建立了密不可分的联系。植物为了适应复杂的生存环境，与微生物形成共生系统，如根瘤菌与豆科植物的互利共生等。在共生关系中，植物与微生物相互依存，相互影响，形成高度协调和平衡的体系。植物为微生物生长提供栖息环境和营养基质，并可以通过根系分泌物等直接或者间接调节微生物群落的组成与结构，从而促进自身对不同环境的适应；微生物则可以通过多种多样的元素循环途径，促进植物的营养吸收和生长发育，提高植物适应不利环境的能力。作为植物与外界土壤接触的过渡区域，根际是共生微生物定殖和发挥功能的重要场所，也是植物-微生物相互作用最为活跃的区域。共生微生物的独特性与重要性，决定了根系微生物作为潜在的生防资源和菌剂资源，在农林业生产领域具有重要的应用潜力。作为植株的地下部分，根系在植物生长发育中起着重要的作用。根系既是植株吸收水分和营养的主要器官，又是支撑植株地上部分的重要力量。根系的构型特点直接反映了根系的生长状况。良好的根系构型不仅可以提高根系对土壤养分和水分的利用效率，也是构建稳定生态群落的基础。根系构型既受到遗传因素的控制，也受到多种环境因子(尤其是根际微生物)的调控。研究表明，多种多样的微生物类群可以参与并有效调控植物根系构型。例如，丛植菌根真菌(AMF)可以侵染植物根系形成丛枝结构，全方位调控根系生物量、长度、根直径、侧根发育和不定根发育等指标。根瘤菌除了可以促进植物的营养吸收以外，也可以促进植物根表面积的增加。而根系促生细菌(PGPR)也可以通过多种方式增加植物根毛密度、根长度、根生物量等，促进根毛的形成。壳多孢菌属(Stagonosporopsis)是经常能够在病害植物上分离出来的一类真菌，其多个物种被认为能够引起或者参与导致植物病害。例如，Stagonosporopsistanaceti是导致除虫菊边花枯萎病的主要病原菌(Bhuiyanetal.2018)。三种壳孢菌(S.cucurbitacearum(syn.Didymellabryoniae),S.caricae,andS.citrulli.)是导致葫芦流胶茎枯病的主要病原菌(Stewartetal.2015；Keinath&DuBose2017)。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种源于美洲黑杨的根际土壤真菌，该菌株能够用于促进植物的生长。上述技术问题，本专利技术提供一种根际真菌菌株(美洲黑杨根际真菌菌株)16W，为Stagonosporopsisajacis，保藏号：CGMCCNo.18136。本专利技术还同时提供了美洲黑杨根际真菌菌株16W的用途：用于促进植物不定根和次生根的发育，从而促进植物的生长。作为本专利技术的用途的改进：所述植物为杨树。例如为杂种无性系NL895杨(Populusdeltoids×P.euramericana)。本专利技术的菌株为16W，保藏名称：Stagonosporopsisajacis，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号：CGMCCNo.18136，2019年06月25日。本专利技术从健康的美洲黑杨根际分离出来的菌株，能够促进NL895杨不定根和次生根的生长发育。此前尚未有报道提出壳多孢菌属(Stagonosporopsis)对植物生长或者根系发育的促生作用；且对目前现有的从烟草种子、霍山石斛中提取的壳多孢菌进行检测，均没有发现其具有促进根系发育的能力。而本专利技术的结果表明，本专利技术所得的根际真菌16W有潜力作为益生菌，促进根系发育，在集成高效苗木扦插领域具有较大的应用前景。附图说明下面结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。图1是接种菌株16W对NL895杨幼苗生长发育的影响；上图为对照组与处理组NL895杨幼苗在共培养基上的生长情况(3个重复)；下图为从上述培养基上取出对照组和处理组NL895杨幼苗后的对比情况。图2是接种菌株16W对NL895杨幼苗根系生物量的影响。图3是接种菌株16W对NL895杨幼苗根系总表面积的影响。图4是接种菌株16W对NL895杨幼苗根尖数的影响。图5是接种菌株16W对NL895杨幼苗根系体积的影响。图6是接种菌株16W对NL895杨幼苗总根长的影响。注：上述根系均指“不定根+次生根”之和。图7是菌株16W的产激素(IAA、IBA、TZR)情况。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：下文中的灭菌，均指121℃高温高压灭菌25min。pH值的调节方式属于常规技术，例如可根据实际需要，配制1mol/L、5mol/L的盐酸或氢氧化钠溶液，通过“边滴加、边测pH”方法来达到目的pH值。实施例1、菌株16W的分离培养1、分离和培养培养基的配置Czapek(分离)培养基：葡萄糖20g，海盐20g，NaNO33g，K2HPO41g，MgSO4·H2O0.5g，KCl0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，依次溶解于适量超纯水中，加入超纯水定容至1L，调节pH至5.6，加入琼脂15g。灭菌后、常温冷却至45℃，加入终浓度为0.05g/L和0.02g/L的硫酸链霉素和盐酸四环素，以抑制细菌污染。PDA(培养)培养基：马铃薯200g，去皮、切小块，加超纯水煮烂后用四层纱布过滤，加入葡萄糖20g，琼脂15g，超纯水定容至1L。灭菌后、常温冷却至45℃，加入终浓度为0.05g/L和0.02g/L的硫酸链霉素和盐酸四环素，以抑制细菌污染。2、本专利技术涉及菌株的分离培养仔细抖落美洲黑杨根系的根外土，用无菌剪刀减去老根，挑取较嫩的根系约10g放入装有40ml1×PBS缓冲液的50ml离心管中，充分震荡，使根际土悬浮。取出根系样品，将根系土悬浮液在10℃下6000g离心15min，倒掉上清液，收集根系土。取1g根系土于99ml1×PBS缓冲液中，重新悬浮混匀。按照1：10的比例依次稀释，分别得到10-3、10-4、10-5三个浓度。选取10-4和10-5两个浓度，充分混匀后各取100μl，涂布于Czapek培养基表面。25℃避光培养7d，及时观察，当培养基表明有菌丝生长时，用接种针小心将其挑出后转接到新鲜PDA培养基上纯化培养并记录菌株编号。所述纯化培养为：用接种针挑取菌落边缘少许菌丝转移到新鲜PDA培养基，重复上述操作3-4次；符合菌落颜色、形态均一的菌株，用于下述实施例2。实施例2、菌株16W的分子生物学鉴定1、菌株DNA提取和PCR扩增挑取纯培养真菌菌丝至1.5ml无菌离心管中，使用DNeasyPlantMiniK本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.根际真菌菌株16W，其特征是：为Stagonosporopsis ajacis，保藏号：CGMCCNo.18136。/n
【技术特征摘要】
1.根际真菌菌株16W，其特征是：为Stagonosporopsisajacis，保藏号：CGMCCNo.18136。
2.如权利要求1所述的根际真菌菌株...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨预展，袁志林，何兴华，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院亚热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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