一种精卵体外结合受精的培养皿及使用方法技术

本发明专利技术公开了一种精卵体外结合受精的培养皿及使用方法，涉及辅助生殖技术领域，所述培养皿包括基板和第一槽体，第一槽体内设有突起，突起的顶面呈自中间向四周辐射且高度逐渐下降的曲面，且曲面向突起的底面方向突出；突起顶面的中间向下凹陷形成用于盛放卵子的卵子槽，卵子槽的槽口向上敞开；曲面上沿径向间隔设有若干个阻挡环，阻挡环与的第一槽体均同轴设置，阻挡环顶端的高度均低于卵子槽槽口的高度；位于最外侧的阻挡环和第一槽体的内壁在突起的顶面上围合出用于添加精子的精子环槽。本发明专利技术可对精子进行体外水平、垂直双向的优化选择，有效减少卵子多精受精发生率的同时也提高了卵子的受精率、优质胚胎形成率、临床妊娠率。

【技术实现步骤摘要】
一种精卵体外结合受精的培养皿及使用方法
本申请涉及辅助生殖
，尤其涉及一种精卵体外结合受精的培养皿及使用方法。
技术介绍
随着国家全面“二孩”政策的放开，国内符合二孩标准的夫妻大约在9000万对，其中有6000万女性在35岁以上，且伴随着环境污染、工作生活压力大、年龄增大以及不良生活方式等因素的叠加影响，根据中国人口协会、国家计生委联名发布的《中国不孕不育现状调研报告》显示，我国的不孕不育发病率在12.5％—15％，患者人数近4000万。若要实现生育的目的,最为有效的方式是借助以体外受精-胚胎移植(invitrofertilization-embryotransfer,IVF-ET)为代表的辅助生殖技术(artificialreproductivetechnology，ART)。ART涉及复杂多环节的实验室操作过程，但在诸多步骤中，体外受精(IVF)的操作无疑是整项技术的核心。当遇到女方输卵管性不孕、排卵障碍、子宫内膜异位症、免疫性不孕、男方轻度少弱畸精症、原因不明性不孕等临床适应证时，会应用常规体外受精技术(第一代试管婴儿技术)，使一定浓度的精子与卵子共同孵育并结合成为受精卵。但目前大多数生殖医学中心采用的体外受精方式无外乎两种：一种是将处理后的精子加入盛有卵子的四孔板或培养皿微滴内，另一种是将卵子加入到已调好密度的精子培养液内。但不论是哪种方法，都是采用了精子与卵子直接接触的方式，这就导致了与卵子接触的精子除了正常精子外还夹带着没有前向运动能力的精子或死精子，而即便是正常精子，其质量也参差不齐(一些呈快速前向运动，另一些呈速度较慢的曲线运动)，这就会产生与卵子结合的精子有可能为距离较近的质量不佳的精子。此外，各大生殖医学中心常规体外受精操作时，加入的精子数量通常为2000-20000条/卵不等，这大大高于自然受孕过程中到达受精部位并与卵子接触的精子数量(几十条甚至更少)，而高浓度的精子(包括死精)会产生代谢物甚至毒素，这都会对卵子的受精结局、胚胎后续的卵裂及发育造成不利影响，最终导致临床妊娠率与胚胎种植率的降低。自然受孕是一个精子经历漫长的旅程寻找卵子的过程，这一过程经历了严格的自然生理性选择，是一个淘汰绝大多数(几千万甚至几亿)精子的优胜劣汰的过程。体外受精技术自1978年产生全世界第一例试管婴儿LouiseBrown至今也不过40多年历史，虽然已经帮助成千上万的患者解决了生育困难的问题，但体外受精操作本身的安全性究竟如何，由于仍然缺乏足够大样本的子代安全性研究，目前学界仍无明确定论。而尽可能地减少体外操作的影响，使精子在体外得到水平方向及垂直方向的优选,汰弱留强后再与卵子结合受精无疑是有利于产生优质胚胎和健康子代的。但本申请专利技术人在实现本申请实施例中技术方案的过程中，发现上述现有技术至少存在如下技术问题：由于精子没有筛选，现有的精子与卵子直接接触的精卵体外结合方式的多精受精发生率较高，但卵子正常受精率、优质胚胎形成率、临床妊娠率均较低。申请内容本申请实施例通过提供一种精卵体外结合受精的培养皿及使用方法，用以解决现有技术中由于精子没有筛选，现有的精子与卵子直接接触的精卵体外结合方式多精受精发生率较高，但卵子正常受精率、优质胚胎形成率、临床妊娠率均较低的问题。本申请实施例通过设置火山状的突起，将所述精子环槽设置在所述突起底部，将所述卵子槽设置在所述突起的顶部，所述精子环槽内的精子欲要与卵子槽内的卵子结合需要爬坡，即需要游过水平方向与垂直方向的物理距离，使得进入所述卵子槽内与卵子结合的精子需要经过水平运动和竖直运动的筛选，以对精子进行体外水平、垂直双向的优化选择，淘汰了夹杂的死精、弱精，且降低了卵子槽内的精子浓度，以避免精子浓度过大对卵子受精及孵育造成的不利影响，有效减少卵子多精受精发生率的同时也提高了卵子的受精率、优质胚胎形成率、临床妊娠率，更好地的保证了子代的安全性。为了解决上述问题，第一方面，本申请实施例提供了一种精卵体外结合受精的培养皿，所述培养皿包括基板和若干个第一槽体，所述第一槽体设置在所述基板上，且所述第一槽体的开口向上敞开；所述第一槽体是圆形槽，以所述第一槽体的中心轴方向为轴向，以所述第一槽体的直径方向为径向，所述第一槽体内同轴设有突起；所述突起的底面固定在所述第一槽体的内底面上，所述突起的顶面位于所述第一槽体内，所述突起的顶面呈自中间向四周辐射且高度逐渐下降的曲面，且所述曲面向所述突起的底面方向突出；所述突起顶面的中间向下凹陷形成用于盛放卵子的卵子槽，所述卵子槽的槽口向上敞开；所述曲面上沿所述径向间隔设有若干个阻挡环，所述的阻挡环与所述的第一槽体均同轴设置，所述阻挡环的底端固定在所述突起的顶面上，所述的阻挡环的顶端竖直向上延伸，且所述阻挡环顶端的高度均低于所述卵子槽槽口的高度；位于最外侧的所述阻挡环和所述第一槽体的内壁在所述突起的顶面上围合出用于添加精子的精子环槽。进一步的，各所述阻挡环的顶端的高度沿所述径向自外向内逐渐增高。进一步的，所述基板上还设有第二槽体，且所述第二槽体的开口向上敞开。进一步的，所述第二槽体是圆形槽，且所述第二槽体的个数是一个。进一步的，所述卵子槽下方的突起镂空，所述卵子槽的槽底形成透明的观察面。进一步的，所述的基板透明。进一步的，所述第一槽体的内壁上内设有液位刻度线，且所述液位刻度线位于所述卵子槽之上。进一步的，所述卵子槽是圆形槽，且所述卵子槽与所述第一槽体同轴设置。进一步的，所述卵子槽的直径不小于4mm。第二方面，本申请实施例还提供了一种人类精卵体外结合受精培养皿的使用方法，包括以下步骤：步骤110：向所述第一槽体内加入受精培养液，且使所述受精培养液的液面位于所述液位刻度线处，再向所述受精培养液的上方加入石蜡油，以维持所述受精培养液的渗透压和温度的稳定，最后将所述培养皿置于培养箱中平衡；步骤120：将卵冠丘复合物放在所述第二槽体中漂洗后得到卵子，然后将所述卵子分别置于所述卵子槽内，且每个卵子槽内放入1～10个卵子；步骤130：将所述放有卵子的培养皿放回培养箱中孵育后，再将精液标本加入到所述精子槽中；步骤140：位于下方且位于周边的所述精子将向位于上方且位于中间的卵子槽游动，一些死精及原地运动的精子将首先滞留于所述精子槽内，而另一些活力较差的精子将被各阻挡环逐一挡下，只有兼具水平游动及垂直游动能力的优质精子，才能逐一翻过各阻挡环到达卵子槽，并与卵子进行结合受精，从而优选精子；步骤150：将添加了卵子及精子的所述培养皿放入培养箱中孵育，完成整个体外结合受精过程。本申请实施例中的上述一个或多个技术方案，至少具有如下一种或多种技术效果：1、所述精子环槽设置在所述突起底部，所述卵子槽设置在所述突起的顶部，所述精子环槽内的精子欲要与卵子槽内的卵子结合需要爬坡，即需要游过水平方向与垂直方向的物理距离，使得进入所述卵子槽内与卵子结合的精子需要经过水平运动和竖直运动的筛选，以对精子进行体外水平、垂直双向的优化选择，淘汰了夹杂的死精、弱精，且降低了卵子槽内的精子浓度，以避免精子浓度过大对卵子受精及孵育造成的不利影响，有效减少卵子多精受精发生率的同时也提高了卵子的受精率、优质胚胎形成率、临床妊娠率，更好地的保证了子代的安全性。2、各所述阻挡环的顶端的高度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种精卵体外结合受精的培养皿，其特征在于，所述培养皿包括基板和若干个第一槽体，所述第一槽体设置在所述基板上，且所述第一槽体的开口向上敞开；所述第一槽体是圆形槽，以所述第一槽体的中心轴方向为轴向，以所述第一槽体的直径方向为径向，所述第一槽体内同轴设有突起；所述突起的底面固定在所述第一槽体的内底面上，所述突起的顶面位于所述第一槽体内，所述突起的顶面呈自中间向四周辐射且高度逐渐下降的曲面，且所述曲面向所述突起的底面方向突出；所述突起顶面的中间向下凹陷形成用于盛放卵子的卵子槽，所述卵子槽的槽口向上敞开；所述曲面上沿所述径向间隔设有若干个阻挡环，所述的阻挡环与所述的第一槽体均同轴设置，所述阻挡环的底端固定在所述突起的顶面上，所述的阻挡环的顶端竖直向上延伸，且所述阻挡环顶端的高度均低于所述卵子槽槽口的高度；位于最外侧的所述阻挡环和所述第一槽体的内壁在所述突起的顶面上围合出用于添加精子的精子环槽。

【技术特征摘要】
1.一种精卵体外结合受精的培养皿，其特征在于，所述培养皿包括基板和若干个第一槽体，所述第一槽体设置在所述基板上，且所述第一槽体的开口向上敞开；所述第一槽体是圆形槽，以所述第一槽体的中心轴方向为轴向，以所述第一槽体的直径方向为径向，所述第一槽体内同轴设有突起；所述突起的底面固定在所述第一槽体的内底面上，所述突起的顶面位于所述第一槽体内，所述突起的顶面呈自中间向四周辐射且高度逐渐下降的曲面，且所述曲面向所述突起的底面方向突出；所述突起顶面的中间向下凹陷形成用于盛放卵子的卵子槽，所述卵子槽的槽口向上敞开；所述曲面上沿所述径向间隔设有若干个阻挡环，所述的阻挡环与所述的第一槽体均同轴设置，所述阻挡环的底端固定在所述突起的顶面上，所述的阻挡环的顶端竖直向上延伸，且所述阻挡环顶端的高度均低于所述卵子槽槽口的高度；位于最外侧的所述阻挡环和所述第一槽体的内壁在所述突起的顶面上围合出用于添加精子的精子环槽。2.如权利要求1所述的一种精卵体外结合受精的培养皿，其特征在于，各所述阻挡环的顶端的高度沿所述径向自外向内逐渐增高。3.如权利要求1所述的一种精卵体外结合受精的培养皿，其特征在于，所述基板上还设有第二槽体，且所述第二槽体的开口向上敞开。4.如权利要求3所述的一种精卵体外结合受精的培养皿，其特征在于，所述第二槽体是圆形槽，且所述第二槽体的个数是一个。5.如权利要求1所述的一种精卵体外结合受精的培养皿，其特征在于，所述卵子槽下方的突起镂空，所述卵子槽的槽底形成透明的观察面。6.如权利要求5所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：饶金鹏，金敏，金帆，封纯，邱枫，魏凯，蔡益婷，田申，钱小红，朱倩，金凯红，毛愉婵，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33