一种药敏检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种药敏检测试剂盒，属于水生动物药敏检测器技术领域。本发明专利技术所述药敏检测试剂盒包括恩诺沙星药敏纸片、氟苯尼考药敏纸片、甲砜霉素药敏纸片、新霉素药敏纸片、多四环素强力霉素药敏纸片、第一土霉素药敏纸片、第二土霉素药敏纸片、磺胺二甲基嘧啶药敏纸片、磺胺对甲基嘧啶药敏纸片和磺胺甲恶唑药敏纸片；所述第一土霉素药液的溶剂为磷酸缓冲盐，溶质为土霉素；所述第二土霉素药液的溶剂为二甲基甲酰胺，溶质为土霉素。本发明专利技术提供的药敏检测试剂盒对病原菌进行定性药敏试验准确性高，为水产养殖户提供了科学有效的用药指导。

A Kit for Drug Sensitivity Detection

【技术实现步骤摘要】
一种药敏检测试剂盒
本专利技术涉及水生动物药敏检测器
，具体涉及一种药敏检测试剂盒。
技术介绍
随着高密度、规模化水产养殖模式的推广，以及苗种、亲体、引种等国家地区间的交流，由细菌性病原所引发的疾病越来越引起人们的重视，具较高的发病率及死亡率，抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。抗菌药物较长期使用必然出现细菌耐药性，致病菌耐药性的产生往往使抗菌药物失去药效，随着抗菌素类药物在水产养殖中应用数量增多和时间的延长，水产动物的致病菌对各种抗菌素的耐药性也在不断变化。因此，对养殖水域中病原菌对各种抗菌药物的敏感性进行监测，及时了解致病菌耐药性的变化趋势，对于正确选用药物和确定各种药物的使用剂量都是十分重要的。现有技术中用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。但由于药敏试验要求比较严格，条件比较高，仅仅在大中专院校或科研单位有条件的可以操作，一些养殖厂、门诊及养殖户难有条件进行药敏试验的操作。另外，实验室大多数采用商品化的动物或人用的药敏片。现有技术中还未发现有关针对水生动物常用渔药药敏片的报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种药敏检测试剂盒。本专利技术提供的药敏检测试剂盒对病原菌进行定性药敏试验准确性高，为水产养殖户提供了科学有效的用药指导。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：一种药敏检测试剂盒，所述试剂盒包括恩诺沙星药敏纸片、氟苯尼考药敏纸片、甲砜霉素药敏纸片、新霉素药敏纸片、多四环素强力霉素药敏纸片、第一土霉素药敏纸片、第二土霉素药敏纸片、磺胺二甲基嘧啶药敏纸片、磺胺对甲基嘧啶药敏纸片和磺胺甲恶唑药敏纸片；所述第一土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；将所述灭菌纸片吸收第一土霉素药液，得到含有第一土霉素药液的纸片；将所述含有第一土霉素药液的纸片烘干，得到第一土霉素药敏纸片；其中，所述第一土霉素药液的溶剂为磷酸缓冲盐，溶质为土霉素；所述第二土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；将所述灭菌纸片吸收第二土霉素药液，得到含有第二土霉素药液的纸片；将所述含有第二土霉素药液的纸片烘干，得到第二土霉素药敏纸片；其中，所述第二土霉素药液的溶剂为二甲基甲酰胺，溶质为土霉素。优选地，所述恩诺沙星药敏纸片中恩诺沙星的含量为28～32μg/片；所述氟苯尼考药敏纸片中氟苯尼考的含量为28～32μg/片；所述甲砜霉素药敏纸片中甲砜霉素的含量为28～32μg/片；所述新霉素药敏纸片中新霉素的含量为28～32μg/片；所述多四环素强力霉素药敏纸片中多四环素强力霉素的含量为28～32μg/片；所述第一土霉素药敏纸片中土霉素的含量为28～32μg/片；所述第二土霉素药敏纸片中土霉素的含量为28～32μg/片；所述磺胺二甲基嘧啶药敏纸片中磺胺二甲基嘧啶的含量为295～305μg/片；所述磺胺对甲基嘧啶药敏纸片中磺胺对甲基嘧啶的含量为295～305μg/片；所述磺胺甲恶唑药敏纸片中磺胺甲恶唑的含量为295～305μg/片。优选地，所述试剂盒中药敏纸片的制备方法，包括以下步骤：(1)将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；(2)将步骤(1)所述灭菌纸片分别吸收恩诺沙星药液、氟苯尼考药液、甲砜霉素药液、新霉素药液、多四环素强力霉素药液、磺胺二甲基嘧啶药液、磺胺对甲基嘧啶药液和磺胺甲恶唑药液，分别得到含有上述药液的纸片；(3)将所述步骤(2)分别得到的含有药液的纸片烘干，分别得到恩诺沙星药敏纸片、氟苯尼考药敏纸片、甲砜霉素药敏纸片、新霉素药敏纸片、多四环素强力霉素药敏纸片、磺胺二甲基嘧啶药敏纸片、磺胺对甲基嘧啶药敏纸片和磺胺甲恶唑药敏纸片。优选地，所述步骤(1)中的滤纸片包括双圈定性滤纸、whatmanGF/F滤纸和普通滤纸中的一种或几种。优选地，所述滤纸片的形状包括圆形，所述圆形滤纸片的直径为5.5～6.5mm。优选地，所述步骤(1)中灭菌的温度为115～125℃，所述灭菌的时间为40～60min。优选地，所述步骤(3)中烘干的温度为35～38℃，所述烘干的时间为24～48h。优选地，所述步骤(3)中的恩诺沙星药液的溶剂为氢氧化钠，溶质为恩诺沙星；所述苯尼考药液的溶剂为甲醇，溶质为氟苯尼考；所述甲砜霉素药液的溶剂为甲醇，溶质为甲砜霉素；所述新霉素药液的溶剂为水，溶质为新霉素；所述多四环素强力霉素药液的溶剂为水，溶质为多四环素强力霉素；所述磺胺二甲基嘧啶药液的溶剂氢氧化钠，溶质为磺胺二甲基嘧啶；所述磺胺对甲基嘧啶药液的溶剂为氢氧化钠，溶质为磺胺对甲基嘧啶；所述磺胺甲恶唑药液的溶剂为氢氧化钠，溶质为磺胺甲恶唑。本专利技术提供的试剂盒，能够对水产动物常用渔药进行快速检测，对病原菌进行定性药敏试验准确率达到90％以上，便于渔民日常养殖快速选药。附图说明图1为溶剂的抗菌性实验结果图，其中，溶剂分别为1.水2.甲醇3.PBS缓冲液4.0.04mol/LNaOH5.1mol/L的盐酸6.二甲基甲酰胺7.0.2mol/L的盐酸；图2为溶剂的测试实验结果图，其中，1.对照2.蒸馏水3.甲醇4.PBS缓冲液5.0.04mol/LNaOH溶液6.二甲基甲酰胺7.0.2mol/L的盐酸；图AB为鳗弧菌，图CD为溶藻弧菌；图3～图13分别为：图30618绿弧菌、图451201芽孢杆菌、图551002维氏弧菌、图6Man鳗弧菌、图7165副溶血弧菌、图8PILC维氏气单胞菌、图9150724气单胞菌、图10D肾美人鱼发光杆菌、图110523海豚链球菌、图12849h海豚链球菌和图1308242哈维氏弧菌的抑菌圈直径实验结果图；其中，上面为本专利技术自制药敏纸片实验结果图，标记2～11分别是氟苯尼考、恩诺沙星、新霉素、多四环素强力霉素、土霉素(二)、土霉素(一)、磺胺二甲基嘧啶、磺胺对甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、甲砜霉素；下面是购置于杭州滨和微生物公司药敏纸片实验结果图，标记2～5分别是氟苯尼考、恩诺沙星、新霉素和多四环素强力霉素的抑菌圈直径实验结果图；图14为传统致病菌药敏检测方法流程图；图15为本专利技术改进药敏试验方法一流程图；图16为本专利技术改进药敏试验方法二流程图；图17为地图鱼肝脏细菌的抑菌圈直径实验结果图；图18为地图鱼脾脏细菌的抑菌圈直径实验结果图；图19为地图鱼肾脏细菌的抑菌圈直径实验结果图；图20为菌株A副溶血弧菌的抑菌圈直径实验结果图；图21为菌株B副溶血弧菌的抑菌圈直径实验结果图；图22为菌株C副溶血弧菌的抑菌圈直径实验结果图。具体实施方式本专利技术提供了一种药敏检测试剂盒，所述试剂盒包括恩诺沙星药敏纸片、氟苯尼考药敏纸片、甲砜霉素药敏纸片、新霉素药敏纸片、多四环素强力霉素药敏纸片、第一土霉素药敏纸片、第二土霉素药敏纸片、磺胺二甲基嘧啶药敏纸片、磺胺对甲基嘧啶药敏纸片和磺胺甲恶唑药敏纸片；所述第一土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括恩诺沙星药敏纸片、氟苯尼考药敏纸片、甲砜霉素药敏纸片、新霉素药敏纸片、多四环素强力霉素药敏纸片、第一土霉素药敏纸片、第二土霉素药敏纸片、磺胺二甲基嘧啶药敏纸片、磺胺对甲基嘧啶药敏纸片和磺胺甲恶唑药敏纸片；所述第一土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；将所述灭菌纸片吸收第一土霉素药液，得到含有第一土霉素药液的纸片；将所述含有第一土霉素药液的纸片烘干，得到第一土霉素药敏纸片；其中，所述第一土霉素药液的溶剂为磷酸缓冲盐，溶质为土霉素；所述第二土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；将所述灭菌纸片吸收第二土霉素药液，得到含有第二土霉素药液的纸片；将所述含有第二土霉素药液的纸片烘干，得到第二土霉素药敏纸片；其中，所述第二土霉素药液的溶剂为二甲基甲酰胺，溶质为土霉素。

【技术特征摘要】
1.一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括恩诺沙星药敏纸片、氟苯尼考药敏纸片、甲砜霉素药敏纸片、新霉素药敏纸片、多四环素强力霉素药敏纸片、第一土霉素药敏纸片、第二土霉素药敏纸片、磺胺二甲基嘧啶药敏纸片、磺胺对甲基嘧啶药敏纸片和磺胺甲恶唑药敏纸片；所述第一土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；将所述灭菌纸片吸收第一土霉素药液，得到含有第一土霉素药液的纸片；将所述含有第一土霉素药液的纸片烘干，得到第一土霉素药敏纸片；其中，所述第一土霉素药液的溶剂为磷酸缓冲盐，溶质为土霉素；所述第二土霉素药敏纸片的制备方法包括：将滤纸片灭菌、烘干，得到灭菌纸片；将所述灭菌纸片吸收第二土霉素药液，得到含有第二土霉素药液的纸片；将所述含有第二土霉素药液的纸片烘干，得到第二土霉素药敏纸片；其中，所述第二土霉素药液的溶剂为二甲基甲酰胺，溶质为土霉素。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述恩诺沙星药敏纸片中恩诺沙星的含量为28～32μg/片；所述氟苯尼考药敏纸片中氟苯尼考的含量为28～32μg/片；所述甲砜霉素药敏纸片中甲砜霉素的含量为28～32μg/片；所述新霉素药敏纸片中新霉素的含量为28～32μg/片；所述多四环素强力霉素药敏纸片中多四环素强力霉素的含量为28～32μg/片；所述第一土霉素药敏纸片中土霉素的含量为28～32μg/片；所述第二土霉素药敏纸片中土霉素的含量为28～32μg/片；所述磺胺二甲基嘧啶药敏纸片中磺胺二甲基嘧啶的含量为295～305μg/片；所述磺胺对甲基嘧啶药敏纸片中磺胺对甲基嘧啶的含量为295～305μg/片；所述磺胺甲恶唑药敏纸片中磺胺甲恶唑的含量为295～305μg/片。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚学良，钟文慧，郝俊，徐晓丽，罗璋，包海岩，蔡琰，张振奎，
申请(专利权)人：天津市水产技术推广站，
类型：发明
国别省市：天津,12