一种获得微生物抗菌素的方法技术

技术编号:22254350 阅读:42 留言:0更新日期:2019-10-10 09:39
本发明专利技术公开了一种获得微生物抗菌素的方法,包括以下步骤:A1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm‑5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;A2、完成A1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度待测抗菌素的液相,晾干;A3、完成A2)后,在所述贯穿孔中加入含有目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,从而获知待测抗菌素实现抑制或杀灭目的微生物的浓度。通过上述方式,本发明专利技术获得的抗菌素能够实现抑制或杀灭目的微生物,具有十分广阔的应用前景。

A Method for Obtaining Microbial Antibiotics

【技术实现步骤摘要】
一种获得微生物抗菌素的方法
本专利技术属于生物
,特别是涉及一种获得微生物抗菌素的方法。
技术介绍
现最常用的抗菌药物筛选方法有纸片扩散法和稀释法。纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的纸片贴在接种了被测菌的琼脂表面上,随着药物在琼脂中的扩散,在纸片周围形成药物的浓度梯度,从而形成不同大小的抑菌圈,反应测试菌对药物的敏感程度。纸片扩散法由于不同的菌对药物的敏感性不同,产生的抑菌环大小也有所不同,如果菌种不纯,实验中的抑菌环和纯培养状态下产生的抑菌环相比存在较大的差异,影响判断结果的准确性。稀释法又分为肉汤稀释法和琼脂稀释法。肉汤稀释法是用肉汤将抗菌药物按照不同浓度稀释到无菌试管或者微量稀释孔内,再接种待测菌,定量测定抗菌药物的最低抑菌或杀菌浓度(MBC)。琼脂稀释法是将不同的抗菌药物分别混匀于琼脂培养基中,配置出含有各种浓度药物的平板,在平板中接种细菌后,孵育观察细菌在不同浓度药物平板的生长情况,观察以抑制细菌生长的平板所含药物浓度测得最低抑菌浓度(MIC)。稀释法虽然可以将被测菌放置在纯培养状态下生长,结果可靠,但是不管是肉汤稀释法还是琼脂稀释法,操作起来费时费力,不适用于大规模、快速高效药物筛选。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题是提供一种获得微生物抗菌素的方法,获得的抗菌素能够实现抑制或杀灭目的微生物,具有十分广阔的应用前景。为解决上述技术问题,本专利技术采用的一个技术方案是:提供一种获得微生物抗菌素的方法,包括以下步骤:A1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm-5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;A2、完成A1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度待测抗菌素的液相,晾干;A3、完成A2)后,在所述贯穿孔中加入含有目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,从而获知待测抗菌素实现抑制或杀灭目的微生物的浓度。本专利技术为了解决其技术问题所采用的进一步技术方案是:进一步地说,还包括如下步骤:B1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm-5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;B2、完成B1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度的目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,以确定A3)中“含有目的微生物的液相”中的目的微生物的浓度。进一步地说,所述微芯片的制备方法包括以下步骤:C1、将光刻胶涂在基片上并烘干,同掩膜一起经过光刻、显影过程获得所述微芯片的模具;C2、在所述微芯片的模具上浇注聚二甲基硅氧烷,固化后剥离所述微芯片的模具得到所述微芯片。进一步地说,所述贯穿孔的孔径为2-3cm。进一步地说,所述微生物的液相的质量浓度为50-60%。进一步地说,所述光刻胶的涂布厚度为2-3mm。本专利技术的有益效果是:1、无需将抗菌素与菌液进行混合,抗菌素的作用区域仅限于贯穿孔,只需少量抗菌素即可进行抗菌素筛选,抗菌素的用量降低;2、菌落形成情况清晰可见,便于统计分析,可根据菌落数目的多少准确判断抗菌素的抗菌作用强弱;3、在同一块平板上就可进行同种抗菌素的不同浓度和不同抗菌素的相同浓度的筛选比较,实现了高通量筛选。具体实施方式下面对本专利技术的较佳实施例进行详细阐述,以使本专利技术的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解,从而对本专利技术的保护范围做出更为清楚明确的界定。实施例:一种获得微生物抗菌素的方法,本专利技术包括以下步骤:A1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm-5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;A2、完成A1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度待测抗菌素的液相,晾干;A3、完成A2)后,在所述贯穿孔中加入含有目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,从而获知待测抗菌素实现抑制或杀灭目的微生物的浓度。还包括如下步骤:B1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm-5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;B2、完成B1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度的目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,以确定A3)中“含有目的微生物的液相”中的目的微生物的浓度。所述微芯片的制备方法包括以下步骤:C1、将光刻胶涂在基片上并烘干,同掩膜一起经过光刻、显影过程获得所述微芯片的模具;C2、在所述微芯片的模具上浇注聚二甲基硅氧烷,固化后剥离所述微芯片的模具得到所述微芯片。所述贯穿孔的孔径为2-3cm。所述微生物的液相的质量浓度为50-60%。所述光刻胶的涂布厚度为2-3mm。以上所述仅为本专利技术的实施例,并非因此限制本专利技术的专利范围,凡是利用本专利技术说明书所作的等效结构变换,或直接或间接运用在其他相关的
,均同理包括在本专利技术的专利保护范围内。本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种获得微生物抗菌素的方法,其特征在于:包括以下步骤:A1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm‑5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;A2、完成A1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度待测抗菌素的液相,晾干;A3、完成A2)后,在所述贯穿孔中加入含有目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,从而获知待测抗菌素实现抑制或杀灭目的微生物的浓度。

【技术特征摘要】
1.一种获得微生物抗菌素的方法,其特征在于:包括以下步骤:A1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm-5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;A2、完成A1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有不同浓度待测抗菌素的液相,晾干;A3、完成A2)后,在所述贯穿孔中加入含有目的微生物的液相,培养并观察微生物生长情况,从而获知待测抗菌素实现抑制或杀灭目的微生物的浓度。2.根据权利要求1所述的一种获得微生物抗菌素的方法,其特征在于:还包括如下步骤:B1、在固体培养基上覆盖微芯片;所述微芯片为聚二甲基硅氧烷材质的膜,其厚度为3mm-5mm,其上具有阵列分布的贯穿孔,各贯穿孔之间无连接;B2、完成B1)后,在不同贯穿孔中加入体积相等但含有...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈华成
申请(专利权)人:太仓新亚逊生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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