用于乳腺癌骨转移诊疗的新靶标PCDHB2制造技术

本发明专利技术公开了用于乳腺癌骨转移诊疗的新靶标PCDHB2。本发明专利技术确定了PCDHB2在伴骨转移的多个亚型乳腺癌组织中显著高表达，PCDHB2在全部类型乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型（LumA型、LumB型、Her2型）乳腺癌组织中的高表达预示着更早的骨转移发生，且与乳腺癌其他部位（脑、肺、肝）的远处转移无关，暗示PCDHB2能够较为特异地预示乳腺癌骨转移的发生。下调PCDHB2表达能够显著抑制乳腺癌细胞骨转移，并且抑制乳腺癌细胞的抗失巢凋亡，以及迁移和侵袭能力，PCDHB2是乳腺癌骨转移的诊断、预后、治疗的新靶标。

PCDHB2: A New Target for Diagnosis and Treatment of Bone Metastasis of Breast Cancer

【技术实现步骤摘要】
用于乳腺癌骨转移诊疗的新靶标PCDHB2
本专利技术属于生物医学领域，更具体地涉及用于乳腺癌骨转移诊疗的新靶标PCDHB2。
技术介绍
随着营养结构改变及老龄化趋势，乳腺癌的发生率有显著增长的趋势。在乳腺癌患者中，约70%患者死时伴有至少一处骨转移灶；甚至在出现临床症状之前，乳腺癌患者就已经存在骨转移灶，或原位乳腺癌治疗后没有出现骨转移，但在数年，甚至十几年后出现骨转移灶，给临床治疗带来了极大的困难。肿瘤发生骨转移后，伴随而来的是骨相关并发症，如疼痛、高血钙症、病理性骨折、脊髓或神经根压迫等，严重地影响患者的生活质量及生存时间。目前针对乳腺癌骨转移的治疗均属姑息性，无论是手术、放疗以及药物治疗，只是缓解及改善相应症状，并不能明显提高患者的生存预期。一旦发生骨转移，不仅严重影响了患者的生活质量与寿命，也给临床治疗带来极大的困难。近年来，针对乳腺癌骨转移诊断及预后分子标志物的研究取得了很大的进展，但目前临床上依然缺乏能有效预测乳腺癌骨转移，并作为治疗靶点的特异性分子标志物。因此，寻找可靠的评估肿瘤骨转移的分子标志物，是找到肿瘤骨转移预防和治疗的关键因素。随着肿瘤治疗迈入精准化时代，乳腺癌其复杂的临床生物学行为背后必然有着基因表达谱上的差异。乳腺癌按其编码基因表达谱差异可分为五个分子亚型：管腔癌A型（LuminalA,LumA）、管腔癌B型（LuminalB,LumB）、人表皮生长因子受体2过表达型（HER2overexpression,Her2）、基底细胞样型（Basal-like,BasL）和正常细胞样型（Normal-like,NormL），在高转移倾向的LumB型，Her2型和BasL型乳腺癌中，相较于乳腺癌的其它常见转移部位，例如肺和脑，骨是最常见的远处转移部位。其中在LumB型和Her2型中，骨是最易转移的部位，分别占总转移部位的71.4%和65%；而在BasL型中，骨转移发生率仅次于肺和脑，占总转移部位的39%。基于以上临床需求，寻找乳腺癌骨转移诊疗的新靶标，不仅有助于早期诊断和发现具有骨转移倾向的乳腺癌患者，而且能为其设计针对性的干预及治疗方案，改善其治疗效果以及其临床转归，最终达到预防与治疗骨转移的目标，具有极为重要的临床意义。鉴于此，提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：第一方面提供用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移体外诊断制剂的用途。第二方面提供用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移倾向的预后制剂的用途。第三方面提供PCDHB2的抑制性试剂在制备预防、抑制和/或治疗乳腺癌骨转移药物中的用途。本专利技术所采取的技术方案是：用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移体外诊断制剂的用途。进一步的，将测得乳腺癌受试者的样品的PCDHB2表达水平与对照值进行比较，如果显著高于对照值，那么受试者为骨转移阳性诊断。用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移倾向的预后制剂的用途。进一步的，所述预后包括：将测得乳腺癌受试者的样品的PCDHB2表达水平与对照值进行比较，如果显著高于对照值，那么受试者具有更高的发生骨转移倾向。进一步的，乳腺癌受试者包括未经过分子分型、或经过分子分型，所述分子分型包括BasL型、LumA型、LumB型、Her2型、NormL型。进一步的，所述表达水平包括mRNA水平和蛋白水平。所述定量PCDHB2mRNA水平的试剂选自：引物、探针、基因芯片；所述定量PCDHB2蛋白水平的试剂选自：抗体、蛋白芯片。PCDHB2的抑制性试剂在制备预防、抑制和/或治疗乳腺癌骨转移药物中的用途。进一步的，所述PCDHB2的抑制性试剂选自：能够全部或部分抑制PCDHB2基因表达的物质，能够全部或部分抑制PCDHB2蛋白发挥功效的物质。进一步的，所述PCDHB2的抑制性试剂选自：蛋白质、寡核苷酸、寡核苷酸表达载体、小分子化合物。本专利技术的有益效果是：本专利技术确定了PCDHB2在伴骨转移的多个亚型乳腺癌组织中显著高表达，PCDHB2在全部类型乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型（LumA型、LumB型、Her2型）乳腺癌组织中的高表达预示着更早的骨转移发生，且与乳腺癌其他部位（脑、肺、肝）的远处转移无关，暗示PCDHB2能够较为特异地预示乳腺癌骨转移的发生。下调PCDHB2表达能够显著抑制乳腺癌细胞骨转移，并且抑制乳腺癌细胞的抗失巢凋亡，以及迁移和侵袭能力，PCDHB2是乳腺癌骨转移的诊断、预后、治疗的新靶标。附图说明图1：实施例1中29例乳腺癌组织的PCDHB2mRNA相对表达量，其中，nBO.meta.in7y表示7年内无骨转移的乳腺癌组织，BO.meta.in7y表示7年内发生骨转移的乳腺癌组织。图2：实施例1中4例无骨转移的乳腺癌组织与4例7年内发生骨转移的乳腺癌组织的PCDHB2蛋白表达情况，其中，nBO.meta.in7y表示7年内无骨转移的乳腺癌组织，BO.meta.in7y表示7年内发生骨转移的乳腺癌组织。图3：实施例2中472例全类型乳腺癌组织和52例良性乳腺增生组织的免疫组化情况，其中，图A为免疫组化染色图，图B为免疫组化评分图，图C为各类样本免疫组化评分分布图，Benign表示良性乳腺增生组织，Malignant表示全类型乳腺癌组织。图4：PCDHB2表达水平与无骨转移生存时间的关系，图A、B、C分别统计实施例2中全部类型的乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型乳腺癌组织中PCDHB2表达与患者无骨转移生存时间（BoMFS）的分析结果，其中，L表示低表达，H表示高表达。图5：实施例3中PCDHB2表达水平与不同器官转移生存时间的关系，图A-C分别统计全部类型的乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型乳腺癌组织中PCDHB2表达与患者无脑转移生存时间（BrMFS）的分析结果，图D-F分别统计全部类型的乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型乳腺癌组织中PCDHB2表达与患者无肺转移生存时间（LuMFS）的分析结果，图G-I分别统计全部类型的乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型乳腺癌组织中PCDHB2表达与患者无肝转移生存时间（LiMFS）的分析结果，图J-L分别统计全部类型的乳腺癌组织、BasL乳腺癌组织和其他类型乳腺癌组织中PCDHB2表达与患者远处转移生存时间（DMFS）的分析结果，其中，L表示低表达，H表示高表达。图6：实施例4中下调PCDHB2对体内骨转移及体外侵袭和迁移的影响，图A为各组细胞模型中PCDHB2表达水平的westernblot结果；图B为BLI成像示意图，图C为骨X射线图，图D为骨H&E染色图，图E为骨转移评分结果，图F为骨转移瘤在H&E中的骨破坏面积的评分，图G为无骨转移生存曲线，图H为各细胞模型的体外侵袭和迁移结果；图中vector为转染有对照质粒的模型，shPCDHB2RNA#1和shPCDHB2RNA#2为转染有PCDHB2稳定下调表达的模型，PCDHB2为转染有PCDHB2稳定表达的模型。图7：实施例5中下调PCDHB2对乳腺癌细胞抗失巢凋亡能力的影响，图A和B分别为流式细胞仪检测各组细胞模型的凋亡情况及线粒体膜电位情况，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移体外诊断制剂的用途。

【技术特征摘要】
1.用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移体外诊断制剂的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：将测得乳腺癌受试者的样品的PCDHB2表达水平与对照值进行比较，如果显著高于对照值，那么受试者为骨转移阳性诊断。3.用于定量PCDHB2表达水平的试剂在制备对乳腺癌受试者进行骨转移倾向的预后制剂的用途。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述预后包括：将测得乳腺癌受试者的样品的PCDHB2表达水平与对照值进行比较，如果显著高于对照值，那么受试者具有更高的发生骨转移倾向。5.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其特征在于：乳腺癌受试者包括未经过分子分型、或经过分子分型，所述分子分型包括BasL型、LumA型、LumB型、...

【专利技术属性】
技术研发人员：任栋，李宇明，杨春潇，张鑫，王斌，
申请(专利权)人：江门市中心医院，
类型：发明
国别省市：广东,44