【技术实现步骤摘要】
用于CCN1蛋白的电化学发光检测的生物传感器及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种用于CCN1蛋白的电化学发光检测的生物传感器及其制备方法和应用。
技术介绍
CCN1是一种分泌性蛋白，正常健康人群外周血中蛋白浓度约为0-200ng/L。研究表明，外周血中CCN1浓度的检测可能在前列腺癌、系统性红斑狼疮、直肠癌、肾脏损伤等疾病的诊断、疗效监测及预后判断方面具有价值。我们在国际杂志上首次报道，CCN1蛋白在急性髓系白血病中表达明显增高，并能够影响急性髓系白血病细胞的生物学性状以及对抗白血病药物的敏感性，CCN1蛋白检测可能在急性髓系白血病的诊断和治疗监测中有重要应用价值。在成分复杂的血液样本中，对于低浓度的蛋白生物标志物的检测，要求检测方法在低浓度水平具备极好的再现性。目前蛋白生物标志物检测方法主要有，酶联免疫吸收试验、蛋白电泳、质谱分析、(surfaceplasmonresonance)、质量敏感蛋白芯片(Mass-sensingBioCDproteinarray)、表面增强拉曼光谱(surfaceenhancedRamanspectrosco...
【技术保护点】
1.一种生物传感器的制备方法，其特征在于，该方法包括：(1)将二价的羧基联吡啶钌的萘酚溶液与玻碳电极的表面进行第一接触，获得第一接触产物Nf@Ru/GCE；(2)将所述Nf@Ru/GCE在氯金酸溶液中进行电沉积，以在所述Nf@Ru/GCE的表面上修饰纳米金颗粒，获得电沉积产物AuNPs/Nf@Ru/GCE；(3)将所述AuNPs/Nf@Ru/GCE与修饰有巯基的ssDNA进行第二接触，以形成金硫键，从而将ssDNA固载在所述AuNPs/Nf@Ru/GCE表面，得到第二接触产物ssDNA/AuNPs/Nf@Ru/GCE；其中，所述ssDNA中修饰有巯基的一条链的核苷酸序列如S...
【技术特征摘要】
1.一种生物传感器的制备方法，其特征在于，该方法包括：(1)将二价的羧基联吡啶钌的萘酚溶液与玻碳电极的表面进行第一接触，获得第一接触产物Nf@Ru/GCE；(2)将所述Nf@Ru/GCE在氯金酸溶液中进行电沉积，以在所述Nf@Ru/GCE的表面上修饰纳米金颗粒，获得电沉积产物AuNPs/Nf@Ru/GCE；(3)将所述AuNPs/Nf@Ru/GCE与修饰有巯基的ssDNA进行第二接触，以形成金硫键，从而将ssDNA固载在所述AuNPs/Nf@Ru/GCE表面，得到第二接触产物ssDNA/AuNPs/Nf@Ru/GCE；其中，所述ssDNA中修饰有巯基的一条链的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.根据权利要求1所述的方法，其中，在将所述玻碳电极与二价的羧基联吡啶钌的萘酚溶液接触之前，该方法还包括对所述玻碳电极进行镜面抛光，获得镜状表面；其中，将二价的羧基联吡啶钌的萘酚溶液滴加到所述镜状表面进行第一接触；优选的，使用三氧化二铝抛光粉末对所述玻碳电极进行镜面抛光。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述第一接触的条件包括：温度为35-40℃，时间为2.5-3.5小时；和/或所述电沉积的条件包括：电压为0.1-0.3V，时间为5-15s；和/或所述第二接触的条件包括：温度为2-6℃，时间为8-15小时。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括：将ssDNA/AuNPs/Nf@Ru/GCE在1-己硫醇中进行第三接触，得到第三接触产物HT/ssDNA/AuNPs/Nf@Ru/GCE；优选的，所述第三接触的温度为2-6℃，时间为30-50min。5.权利要求1-4中任意一项所述的方法制备的生物传感器。6.权利要求5所述的生物传感器非治疗目的地在CCN1蛋白的电化学发光检测中的应用。7.一种CCN1蛋白的电化学发光检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有权利要求5所述的生物传感器；优选的，该试剂盒还含有：链霉亲和素的磁珠、三丙胺、CCN1融合纯化蛋白、CCN1捕获抗体、CCN1检测抗体、生物素、N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、SEQIDNO.2所示的羧基修饰的引发链、以及SEQIDNO.3所示的Fc修饰的引物和SEQIDNO.4所示的引...
【专利技术属性】
技术研发人员：牛长春，廖璞，李甜，万雅芳，
申请(专利权)人：重庆市人民医院，
类型：发明
国别省市：重庆,50
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