表达猪3型干扰素的表达基因、重组表达载体、重组乳杆菌及其制备方法和应用技术

技术编号:22046234 阅读:97 留言:0更新日期:2019-09-07 12:29
本发明专利技术涉及一种表达猪3型干扰素的表达基因、重组表达载体、重组乳杆菌及其制备方法和应用。本发明专利技术根据LP18特有的密码子偏向性进行分子设计,将猪III型干扰素I进行密码子优化,通过分子设计,利用基因扩增、融合扩增等分子克隆手段及PCR、琼脂糖凝胶电泳、胶回收等技术对猪III型干扰素λ1序列进行优化,合成含有锚定型分泌肽1320和优化III型干扰素基因的序列载体,成功构建出优化的猪III型干扰素λ1重组表达载体,并电转化至植物乳杆菌LP18,获得能稳定表达猪源IFN‑λ1蛋白的重组植物乳杆菌,为猪源IFN‑λ1的进一步开发应用研究奠定了基础。

Expression gene of pig type 3 interferon, recombinant expression vector, recombinant Lactobacillus, preparation method and application thereof

【技术实现步骤摘要】
表达猪3型干扰素的表达基因、重组表达载体、重组乳杆菌及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物
,特别是涉及一种表达猪3型干扰素的表达基因、重组表达载体、重组乳杆菌及其制备方法和应用。
技术介绍
干扰素(interferon,IFN)是一类干扰病毒复制和感染产生的细胞因子。根据生物学活性可分为3类,I型是由病毒诱导白细胞和纤维母细胞产生的α和β干扰素;II型是由病毒诱导淋巴细胞产生的γ干扰素;III型干扰素(也称为IFN-λs或IL-28/29)是2003年发现的新类型,在结构和遗传上同IL-10家族成员相似,但显示I型IFN样活性,主要通过JAK-STAT信号通路,发挥抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用。IFN-λs受体表达主要在上皮细胞,包括表皮、呼吸道和胃肠道上皮细胞。相对于I型干扰素,III型干扰素由于其受体(IFN-λs)的靶向优势,其引起的副作用相对较小。另外,IFN-λs是粘膜、上皮组织中抗病毒反应的重要介质,并且对GI上皮的保护至关重要,可能是靶向黏膜感染的潜在抗病毒治疗剂,同时也在黏膜免疫中发挥重要作用。LanF等发现IFN-λ1有利于健康鼻粘膜中金黄色葡萄球菌的清除,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达猪3型干扰素的表达基因,其特征在于,包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种表达猪3型干扰素的表达基因,其特征在于,包括如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。2.一种表达猪3型干扰素的重组表达载体,其特征在于,包括空载体和插入在所述空载体中的目的基因表达片段,所述目的基因表达片段中含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列,所述空载体为pSIP411载体。3.一种权利要求2所述的重组表达载体的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:提供含有所述目的基因表达片段的质粒,利用扩增引物对所述目的基因表达片段进行PCR扩增,将扩增得到的所述目的基因表达片段插入到所述空载体中得到所述重组表达载体。4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述扩增引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO.2所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO.3所示。5.一种表达猪3型干扰素的...

【专利技术属性】
技术研发人员:金宁一李昌王茂鹏许汪陈竞杜寿文田明尧鲁会军李霄马彬尧郝鹏飞宋利娜姜宇航
申请(专利权)人:军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所
类型:发明
国别省市:吉林,22

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