一种检测促甲状腺激素的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种检测促甲状腺激素的分析方法，将表面活性剂处理过的抗促甲状腺激素特异性IgY抗体作为捕获抗体并与磁颗粒偶联，将吖啶酯与抗促甲状腺激素配对的IgG抗体偶联作为示踪物，通过设计建立双抗体夹心法检测促甲状腺激素。本发明专利技术可以有效排除内源性干扰因素的影响，并且IgY抗体经过特定表面活性剂的处理后，偶联效率和发光值均大大提高，从而使检测结果更加准确。

A Method for Detecting Thyrotropin

【技术实现步骤摘要】
一种检测促甲状腺激素的分析方法
本专利技术涉及免疫检测分析
，更具体的说是涉及一种检测促甲状腺激素的分析方法。
技术介绍
促甲状腺激素(Thyroid-stimulatinghormone，TSH)是一种由垂体前叶分泌的糖蛋白激素，由两种不同的亚单位α、β组成。它的主要生理作用是调节甲状腺激素的合成与分泌，甲状腺功能改变时，血清促甲状腺激素的波动较甲状腺激素更迅速且显著，因此，临床上测定血清TSH对诊断甲状腺功能亢进(甲亢)和减退(甲减)、原发与继发性甲减的鉴别、监测甲亢和甲减的疗效、亚临床甲亢的诊断、新生儿甲低的筛查以及垂体TSH瘤的实验诊断等具有重要意义。目前用于检测促甲状腺激素(TSH)的方法主要有免疫层析法、时间分辨荧光免疫分析法、酶联免疫分析法、电化学和化学发光法等。传统的双抗体夹心法检测TSH所用的配对抗体均为IgG抗体，由于血液样本中存在较多的内源性干扰因素，比如嗜异性抗体、类风湿因子、自身抗体、补体等，检测结果经常受到干扰而无法获得准确的结果。如专利技术专利CN101949943A(2011.01)公开了一种促甲状腺激素定量检测试剂盒及其制备方法，专利技术专利C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测促甲状腺激素的分析方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)将经促甲状腺激素抗原免疫处理得到的鸡蛋进行除脂和纯化，得到抗促甲状腺激素IgY抗体，‑20℃保存；(2)将步骤(1)中得到的抗促甲状腺激素IgY抗体与表面活性剂混合反应，然后加入缓冲液超滤清洗，再将抗促甲状腺激素IgY抗体吸出，得到经表面活性剂处理过的抗促甲状腺激素IgY抗体；(3)向经预处理后的磁微粒中加入偶联试剂进行第一次室温孵育，然后加入步骤(2)中得到的经表面活性剂处理过的抗促甲状腺激素IgY抗体进行第二次室温孵育，弃去上清液、洗涤，得到磁微粒混悬液，2‑8℃保存备用；(4)向标记缓冲液中加入抗促甲状腺激素IgG抗...

【技术特征摘要】
1.一种检测促甲状腺激素的分析方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)将经促甲状腺激素抗原免疫处理得到的鸡蛋进行除脂和纯化，得到抗促甲状腺激素IgY抗体，-20℃保存；(2)将步骤(1)中得到的抗促甲状腺激素IgY抗体与表面活性剂混合反应，然后加入缓冲液超滤清洗，再将抗促甲状腺激素IgY抗体吸出，得到经表面活性剂处理过的抗促甲状腺激素IgY抗体；(3)向经预处理后的磁微粒中加入偶联试剂进行第一次室温孵育，然后加入步骤(2)中得到的经表面活性剂处理过的抗促甲状腺激素IgY抗体进行第二次室温孵育，弃去上清液、洗涤，得到磁微粒混悬液，2-8℃保存备用；(4)向标记缓冲液中加入抗促甲状腺激素IgG抗体混匀，再加入吖啶酯震荡混匀反应，加入赖氨酸至标记反应终止,超滤，得到吖啶酯标记物，2-8℃保存备用；(5)制备促甲状腺激素校准品，然后分别将校准品、步骤(3)中得到的磁微粒混悬液依次加入反应管中，振荡混匀，第一次孵育，分离，清洗，然后加入步骤(4)中得到的吖啶酯标记物，第二次孵育，分离，清洗，放入发光仪中进行检测其发光强度，建立发光强度和校准品浓度的标准曲线；(6)将待测样本按照步骤(5)中的方法检测其发光强度，根据标准曲线即可计算出待测样本中促甲状腺激素的含量。2.根据权利要求1所述的一种检测促甲状腺激素的分析方法，其特征在于，步骤(2)中，所述表面活性剂为N-十二烷基-N,N-二甲基氨基丙磺酸盐或十烷基二甲基氧化铵。3.根据权利要求1所述的一种检测促甲状腺激素的分析方法，其特征在于，步骤(2)中，所述抗促甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐兵，曹晶，杜爱铭，
申请(专利权)人：太原瑞盛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山西,14