十大功劳总生物碱提取物的制备方法及其用途技术

本发明专利技术公开了一种十大功劳总生物碱提取物的制备方法及其用途，本发明专利技术的十大功劳总生物碱提取物可用于制备治疗灰指甲的药物。本发明专利技术公开的十大功劳总生物碱提取物制备方法，先采用高浓度醇类加热提后，再转溶于酸性水溶液的方法来制备十大功劳总生物碱，然后再经大孔树脂进一步纯化。该制备方法提取效率高，水溶性杂质少，后处理简单，易于操作。将十大功劳总生物碱提取物天然植物活性成分用于治疗灰指甲，安全性好、毒性小，疗效可靠。本发明专利技术对于更好地开发利用十大功劳这一宝贵资源，进一步研制开发出以十大功劳为原料的高效低毒的抗真菌制剂，提供了良好前景。

Preparation and Application of Total Alkaloid Extracts from Mahonia Mahonia

【技术实现步骤摘要】
十大功劳总生物碱提取物的制备方法及其用途
本专利技术涉及一种十大功劳总生物碱提取物制备方法及其用途，具体地说，涉及十大功劳总生物碱提取物在制备治疗灰指甲的药物中的应用，属于中药领域。
技术介绍
十大功劳系小檗科(Berberidaceae)十大功劳属(MahoniaNutt)常绿灌木或小乔木，在我国大多分布于长江以南区域。十大功劳兼具观赏及药用价值，民间药用已久，具有清热解毒、滋阴强壮之功效。十大功劳根、茎、叶均可入药，《中国药典》(2015年版)收载的十大功劳药用部分为其干燥茎。现代药理表明，该属植物具有抗菌、抗炎、抗氧化及抗肿瘤等多种生物活性，临床上主要用于湿疹和牛皮癣的治疗。“灰指甲”，医学上又称甲癣，是由皮癣菌侵犯甲板或甲下所引起的指(趾)甲感染及发生的病变。临床表现为甲体变形、变厚，凹凸不平、甲体粗糙、无光泽或变色、甲体残缺等。目前我国灰指甲发病率正逐年升高，该病不仅影响手足美观，且具有传染性，患者在生理上及心理上受到严重困扰。十大功劳属植物有效成分主要为小檗碱、药根碱、巴马汀等生物碱，据文献报道这些生物碱均具有一定的抗真菌活性。另外有文献报道小檗碱与氟康唑、酮康唑等常用抗真菌药联合应用能提高对真菌感染的疗效，可以作为抗真菌药的增效剂。但迄今为止，十大功劳总生物碱提取物在治疗灰指甲上的用途尚未有报道。
技术实现思路
本专利技术一方面提供了十大功劳总生物碱提取物在制备用于治疗灰指甲的药物中的用途。本专利技术，该灰指甲可以是由真菌、细菌和酵母菌等一种或多因素引起的甲板病变。本专利技术另一方面提供了一种用于治疗灰指甲的药物组合物，该药物组合物包括十大功劳总生物碱提取物。在本专利技术的一优选实施方案中，该十大功劳总生物碱提取物是该药物组合物的唯一活性成分。在本专利技术的一优选实施方案中，该十大功劳总生物碱提取物是该药物组合物的活性成分之一。在本专利技术的一优选实施方案中，该药物组合物包括十大功劳总生物碱提取物和其它用于治疗灰指甲的药物成分。在本专利技术的一优选实施方案中，其它用于治疗灰指甲的药物成分包括盐酸特比萘芬、盐酸阿莫罗芬、环吡酮胺酮及三唑类抗真菌药。在本专利技术的一优选实施方案中，该药物组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂或辅料等。本专利技术的用于治疗灰指甲的药物组合物，优选通过皮肤渗透给药。在本专利技术的一优选实施方案中，该药物组合物是软膏剂、乳膏剂、酊剂、搽剂、溶液剂、喷雾剂、凝胶剂或贴剂等。在本专利技术的一优选实施方案中，该药物组合物是溶液剂，其中包括质量浓度为0.05-0.15g/mL的十大功劳总生物碱提取物，更优选0.09g/mL。本专利技术再一方面提供了一种十大功劳总生物碱提取物的制备方法，该制备方法包括以下步骤：(1)将十大功劳的根、茎和/或叶粉碎，加入溶剂回流，(2)趁热过滤步骤(1)的混合物，所得滤液减压浓缩得浸膏，(3)将酸性水加入到所述浸膏中，40-60℃搅拌均匀后，趁热过滤，滤液静置冷却，(4)将滤液通过AB-8大孔树脂柱纯化，洗脱液减压浓缩至干，真空干燥，即得。在本专利技术的一优选实施方案中，所述制备方法进一步包括步骤(3)的滤液如在静置冷却过程中有黑色焦油状物质析出，可用抽滤法或倾泻法除去不溶物。在本专利技术的一优选实施方案中，步骤(1)中所述溶剂为90-100％(V/V)的甲醇或乙醇，更优选100％(V/V)的乙醇。在本专利技术的一优选实施方案中，所述酸性水是浓度为3-10％(V/V)的稀醋酸，更优选5％(V/V)的稀醋酸。在本专利技术的一优选实施方案中，步骤(1)优选使用细叶十大功劳的叶作为原料。在本专利技术的一优选实施方案中，步骤(4)纯化工艺条件优选1-3BV水洗除杂，3-5BV30-75％(V/V)乙醇洗脱，更优选2BV水洗除杂，3BV50％(V/V)乙醇洗脱。本专利技术的制备方法先采用将粉碎后的十大功劳的根、茎和/或叶用高浓度醇类加热提取后，提取物转溶于酸性水溶液中，以除去树脂、色素等非碱性脂溶性杂质来制备十大功劳总生物碱。相比于现有技术如酸水浸出法、稀醇浸出法，本专利技术采用的加热回流方式提取效率高，所得总生物碱含量高，采用高浓度醇提取可减少糖类、蛋白质等成分的浸出，水溶性杂质少，大孔树脂纯化工艺简单，易于操作。十大功劳总生物碱提取物作为天然植物活性成分用于治疗灰指甲，安全性好、毒性小，疗效可靠。本专利技术对于更好地开发利用十大功劳这一宝贵资源，进一步研制开发出以十大功劳为原料的高效低毒的抗真菌制剂，提供了良好前景。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术，应理解以下实例仅用于提供本专利技术的最佳实践模式作进一步的详细说明，不应该被解释为限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规操作方法和条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分数和份数按重量计算。实施例1十大功劳总生物碱的制备取干燥的细叶十大功劳叶粉100g，加入无水乙醇500mL，加热回流提取3h，冷至75℃时，趁热抽滤，滤液减压浓缩至稠膏状，加入5％(V/V)稀醋酸100mL，水浴50℃搅拌1h，趁热抽滤，滤液通过AB-8大孔树脂柱吸附，水洗2BV后，再用50％(V/V)乙醇洗脱，收集3BV洗脱液，减压浓缩至干，真空干燥，即得十大功劳总生物碱2.438g，总生物碱含量为64.4％(UV法测定，以盐酸小檗碱计)。实施例2十大功劳总生物碱的制备取干燥的细叶十大功劳叶粉100g，加入95％(V/V)乙醇500mL，加热回流提取3h，冷至75℃时，趁热抽滤，滤液减压浓缩至稠膏状，加入5％(V/V)稀醋酸100mL，水浴50℃搅拌1h，趁热抽滤，滤液通过AB-8大孔树脂柱吸附，水洗2BV后，再用60％(V/V)乙醇洗脱，收集3BV洗脱液，减压浓缩至干，真空干燥，即得十大功劳总生物碱2.763g，总生物碱含量为62.6％(UV法测定，以盐酸小檗碱计)。实施例3十大功劳总生物碱溶液剂的制备将实施例1或实施例2所得的总生物碱用5％(V/V)稀醋酸或医用酒精30mL搅拌溶解，滤除不溶物，收集滤液即得。药液置阴凉处密封存放。实施例4临床应用在使用实施例3制备的制剂之前，患者先用刀具尽可能的将病甲修薄(以不疼痛或不出血为度)，然后用消毒棉球蘸取药液浸润病甲5到10分钟，每天早晚各一次，一般擦药15到20天可初见病甲脱落。病例1张先生，男，50岁，患灰指甲20年余，10个手指甲均为灰指甲，症状为甲板凸凹无规则，增厚且呈棕黄色，指甲和甲板夹层有碎屑。使用本专利技术药液，严格按治疗方案用药60天后停药，坏甲脱落完全。新长出来的甲床平整，新甲光滑发亮，治疗痊愈，无复发。病例2刘女士，女，36岁，患灰指甲3年余，10个脚趾甲均为灰指甲，症状为甲板浑浊、增厚、萎缩、表面凹凸不平、呈黑色。使用本专利技术药液，严格按治疗方案用药60天后停药，坏甲脱落完全。新长出来的甲床平整，新甲正常有光泽，治疗痊愈，无复发。病例3张先生，男，37岁，因外伤致右脚大拇趾患灰指甲10年余，症状为甲板变黄凸起无规则、增厚、甲床变形，使用本专利技术药液，严格按治疗方案用药60天后停药，坏甲脱落完全。新长出来的甲床较为平整，新甲平整有光泽，治疗痊愈，无复发。病例4黄女生，女，45岁，患灰指甲1年余，3个脚趾甲均为灰指甲，症状为甲板变黑、增厚、萎缩、变脆。使用本专利技术药液，严格按治疗方案用药60天后本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.十大功劳总生物碱提取物在制备用于治疗灰指甲的药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.十大功劳总生物碱提取物在制备用于治疗灰指甲的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述灰指甲是由真菌、细菌和酵母菌等一种或多因素引起的甲板病变。3.一种用于治疗灰指甲的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括十大功劳总生物碱提取物。4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述提取物是所述药物组合物的唯一活性成分，或者所述提取物是所述药物组合物的活性成分之一。5.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过皮肤渗透形式给药。6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是软膏剂、乳膏剂、酊剂、搽剂、溶液剂、喷雾剂、凝胶剂或贴剂。7.十大功劳总生物碱提取物的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：张耀洲，肖颖，杨海军，
申请(专利权)人：信阳农林学院，
类型：发明
国别省市：河南,41