PARP抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及PARP(poly ADP‑ribose polymerase，聚ADP核糖聚合酶)抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用。本发明专利技术首次发现PARP抑制剂可以用于制备溶瘤病毒抗肿瘤增效剂。发明专利技术同时涉及一种包含PARP抑制剂以及溶瘤病毒的药物组合物，包含PARP抑制剂及溶瘤病毒的药品套装，以及PARP抑制剂与溶瘤病毒在治疗肿瘤，特别是对所述溶瘤病毒不敏感的肿瘤中的用途。

Application of PARP Inhibitors and Oncolytic Viruses in the Preparation of Antineoplastic Drugs

【技术实现步骤摘要】
PARP抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及PARP抑制剂与溶瘤病毒的联合在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
溶瘤病毒(oncolyticvirus)是一类选择性的感染并杀伤肿瘤细胞，而不损伤正常细胞的可复制病毒。溶瘤病毒疗法(oncolyticvirotherapy)是一种创新的肿瘤靶向治疗策略，它利用天然的或经基因工程改造的病毒选择性的感染肿瘤细胞，并在肿瘤细胞中复制，达到靶向性溶解、杀伤肿瘤细胞的作用，但是对正常细胞没有损伤。M1病毒(AlphavirusM1)属于甲病毒属(Alphavirus)，其在制备抗肿瘤药物方面具有较好的应用效果。例如中国专利技术专利申请201410425510.3公开了M1病毒能选择性引起肿瘤细胞死亡而不影响正常细胞存活，其在抗肿瘤方面具有非常好的应用前景。然而，不同肿瘤对M1病毒的敏感性不一，对于某些肿瘤，M1病毒单独用药时，溶瘤作用还不够理想。例如中国专利技术专利申请201410425510.3所记载的，M1作为抗肿瘤药物使用时，对于结直肠癌、肝癌、膀胱癌和乳腺癌的效果不如胰腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和黑色素瘤明显；而胶质瘤、宫颈癌、肺癌则更其次；而胃癌则最不显著。筛选增加溶瘤病毒肿瘤治疗效果的化合物有望增加溶瘤病毒的抗瘤谱及抗瘤强度。已经报道了现有的多种抗肿瘤药物可以增强溶瘤病毒对肿瘤的杀伤力，然而，在这些众多的现有的抗肿瘤药物中，某些药物本身毒性较大，对正常的细胞可能也产生毒性。虽然抗肿瘤的效果提升了，然而副作用也随之增强，为患者的健康带来不利的影响。因此，本领域一直在孜孜不倦寻找低毒，最好是对正常细胞没有毒性的溶瘤病毒的增效剂。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种溶瘤病毒抗瘤增效剂方面的应用。本专利技术的另一个目的在于提供一种低毒、最好是对正常细胞没有毒性的溶瘤病毒增效剂。本专利技术的另一个目的在于提供一种抗瘤药物组合物，其可以使得溶瘤病毒发挥更好的抗瘤效果。本专利技术的另一个目的在于提供一种抗肿瘤组合物，在发挥抗肿瘤药物效用的同时，尽量小化药物组合物的毒性。本专利技术的另一个目的在于提供一种针对溶瘤病毒不敏感的肿瘤，安全有效的溶瘤病毒增效药物。专利技术通过以下技术方案实现上述目的：专利技术人通过研究、筛选发现，PARP抑制剂出人意料地可以增强溶瘤病毒的溶瘤效果。所述的PARP抑制剂为抑制PARP活性的物质、或降解PARP的物质、或降低PARP水平的基因工具。聚ADP核糖聚合酶(polyADP-ribosepolymerase,PARP)具有保持染色体结构完整性、参与DNA的复制和转录、维持基因组稳定等重要作用。因此PARP抑制剂能够抑制肿瘤细胞DNA损伤修复、增强肿瘤细胞DNA对损伤因素的敏感性。近年来PARP抑制剂的研究收到了越来越多的关注。PARP抑制剂有望在肿瘤治疗领域发挥重要作用。专利技术人通过抑制PARP可以显著增强溶瘤病毒的溶瘤效应。专利技术人采用了抑制PARP活性的化合物Olaparib协同溶瘤病毒尤其是M1病毒作用于肿瘤细胞，实验结果发现，Olaparib可以协同溶瘤病毒增强抗肿瘤效应。本专利技术首次发现，PARP抑制剂可以作为溶瘤病毒的抗瘤增效剂/耐药逆转剂。本专利技术提供了PARP抑制剂在制备溶瘤病毒抗瘤增效剂/耐药逆转剂方面的应用。耐药逆转剂是指，当采用一些溶瘤病毒作为抗肿瘤药物用于治疗肿瘤时，存在着一些肿瘤对溶瘤病毒并不太敏感，或者说这些肿瘤对溶瘤病毒具有抗性，此时，可以采用与PARP抑制剂(作为耐药逆转剂)联用溶瘤病毒的方式，以逆转肿瘤对所述溶瘤病毒的抗性。所述的PARP抑制剂选自化合物。优选地，所述的PARP抑制剂包括但不限于以下化合物或其具有PARP抑制作用的衍生物、或其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、同分异构体：Olaparib(式1)或Veliparib(式2)等抑制PARP活性的化合物。化合物的获取方式可选但不限于：自己化学分离或合成或者从商业途径购买。在本专利技术一优选的实施例中，所述的PARP抑制剂为Olaparib，其结构式如式1所示：在本专利技术另一优选的实施例中，所述的PARP抑制剂为Veliparib，其结构式如式2所示：或者，所述的PARP抑制剂还包括针对PARP基因表达抑制工具，包括但不限于基因干扰、基因沉默以及基因编辑或敲除等工具手段。作为一种可选的实施方式，所述PARP抑制剂选自DNA、RNA、PNA或DNA-RNA-杂合体。它们可以是单链的或双链的。PARP抑制剂可包括一些小的抑制核酸分子，例如短干扰RNA(siRNA)，双链RNA(dsRNA)，microRNA(miRNA)，核酶，以及小发夹RNA(shRNA)，这些都能减弱或消除PARP的表达。或者，所述的PARP抑制剂还包括抗体、抗体功能性片段、肽类、和拟肽类中的一种或几种。其中，所述的抗体可能是单克隆抗体，多克隆抗体，多价抗体，多特异性抗体(例如：双特异性抗体)，和/或连接在PARP上的抗体片段。该抗体可以是嵌合抗体、人源化抗体、CDR移植抗体或人型抗体。抗体片段可以是，例如，Fab，Fab’，F(ab’)2，Fv，Fd，单链Fv(scFv)，具二硫键的FV(sdFv)，或VL、VH结构域。抗体可能是一个共轭的形式，例如，结合一个标签、一个可检测标记，或一种细胞毒性剂。抗体可能是同型IgG(例如：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)、IgA、IgM、IgE或IgD。所述的溶瘤病毒选自甲病毒、腺病毒、牛痘病毒、麻疹病毒、水泡口炎病毒、和单纯性疱疹病毒中的一种或多种；其中，所述的甲病毒选自M1病毒、盖塔病毒。作为优选的实施方式，所述的溶瘤病毒选自M1病毒、盖塔病毒或者它们的组合。本专利技术所说的溶瘤病毒(M1病毒、盖塔病毒、腺病毒、牛痘病毒、麻疹病毒、水泡口炎病毒、和单纯性疱疹病毒)可以尤其地指目前已有的溶瘤病毒，但也不排除一些可能发生的自然变异或者进行了突变(自然突变、强制性突变、或选择性突变)、基因修饰、序列增加或删除或部分替换的病毒。这里所述的溶瘤病毒包括已经进行了上述改变的病毒。最好是上述改变并不影响所说的溶瘤病毒发挥本专利技术所述的作用。所说的PARP抑制剂为能起到敲低或影响PARP基因表达或者降低PARP量或活性的物质(例如化合物、或氨基酸序列、核苷酸序列等)或工具等。本领域技术人员可以对其抑制化合物或者基因工具进行修饰、替换、改变等，但只要起到上述抑制PARP作用的，则属于本专利技术的PARP抑制剂，属于上述物质、化合物或工具等的同质替换。在一些实施例中，甲病毒是保藏编号CCTCCV201423(保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期2014年7月17日)的M1病毒。作为很可能来源于同一毒株的病毒，GenbankAccessionNo.EF011023记录了一株M1的序列。盖塔病毒作为与M1病毒具有高达97.8％(Wenetal.VirusGenes.2007；35(3):597-603)同源性的病毒，两者具有很高的同一性，M1病毒也被一些文献归类为类盖塔病毒。可以预期二者具有相同的效果。单个甲病毒株也可以施用。在其他实施方案中，也可使用多种菌株和/或类型的甲病毒。本专利技术还提供一种用于治疗肿瘤的药物组合物，其包含PARP抑制剂以及溶瘤病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.PARP抑制剂在制备溶瘤病毒抗肿瘤增效剂或耐药逆转剂方面的应用；优选地，所述的溶瘤病毒选自甲病毒、腺病毒、牛痘病毒、麻疹病毒、水泡口炎病毒、和单纯性疱疹病毒中的一种或多种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。

【技术特征摘要】
1.PARP抑制剂在制备溶瘤病毒抗肿瘤增效剂或耐药逆转剂方面的应用；优选地，所述的溶瘤病毒选自甲病毒、腺病毒、牛痘病毒、麻疹病毒、水泡口炎病毒、和单纯性疱疹病毒中的一种或多种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的PARP抑制剂为抑制PARP活性的物质、或降解PARP的物质、或降低PARP水平的基因工具、或它们的任意组合；优选地，所述的PARP抑制剂选自化合物；更优选地，所述的PARP抑制剂选自以下化合物或其具有PARP抑制作用的衍生物、或其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、同分异构体：Olaparib、Veliparib；更优选地，所述的Olaparib的结构式如式1所示：更优选地，所述的Veliparib的结构式如式2所示；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自抗体、抗体功能性片段、肽类、和拟肽类中的一种或几种；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自基因干扰、基因沉默、基因编辑或基因敲除材料；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-杂合体中的一种或几种；更优选地，所述PARP抑制剂选自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一种或几种；更优选地，所述的PARP抑制剂为肿瘤靶向PARP抑制剂。3.一种治疗肿瘤的药物组合物，包含：(a)PARP抑制剂；所述的PARP抑制剂为抑制PARP活性的物质、或降解PARP的物质、或降低PARP水平的基因工具、或它们的任意组合；优选地，所述的PARP抑制剂选自化合物；更优选地，所述的PARP抑制剂选自以下化合物或其具有PARP抑制作用的衍生物、或其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、同分异构体：Olaparib、Veliparib；更优选地，所述的Olaparib的结构式如式1所示：更优选地，所述的Veliparib的结构式如式2所示；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自抗体、抗体功能性片段、肽类、和拟肽类中的一种或几种；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自基因干扰、基因沉默、基因编辑或基因敲除材料；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-杂合体中的一种或几种；更优选地，所述PARP抑制剂选自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一种或几种；更优选地，所述的PARP抑制剂为肿瘤靶向PARP抑制剂；(b)溶瘤病毒；所述的溶瘤病毒选自甲病毒、腺病毒、牛痘病毒、麻疹病毒、水泡口炎病毒、和单纯性疱疹病毒中的一种或多种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。4.一种药品套装，包含：(a)PARP抑制剂；所述的PARP抑制剂为抑制PARP蛋白活性的物质、或降解PARP蛋白的物质、或降低PARP蛋白水平的基因工具、或它们的任意组合；优选地，所述的PARP抑制剂选自化合物；更优选地，所述的PARP抑制剂选自以下化合物或其具有PARP抑制作用的衍生物、或其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、同分异构体：Olaparib、Veliparib；更优选地，所述的Olaparib的结构式如式1所示：更优选地，所述的Veliparib的结构式如式2所示；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自抗体、抗体功能性片段、肽类、和拟肽类中的一种或几种；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自基因干扰、基因沉默、基因编辑或基因敲除材料；或者优选地，所述的PARP抑制剂选自：...

【专利技术属性】
技术研发人员：颜光美，朱文博，龚守芳，贺嵩敏，张海鹏，林园，梁剑开，蔡静，
申请(专利权)人：广州威溶特医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44