假链状双歧杆菌及牛奶中抗生素残留的检测方法及应用技术

技术编号:21537710 阅读:59 留言:0更新日期:2019-07-06 18:33
本发明专利技术公开了一种假链状双歧杆菌DSQL‑1,于2016年2月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.12067。并公开了其在筛检牛奶中残留四环素、青霉素和红霉素中的应用,并公开了具体的检测方法。本发明专利技术方法的筛检方法操作简单,可直接通过观察指示剂颜色变色判读结果,不需特殊精密仪器,判断方法简便、准确,灵敏度和精确度高,适合食品质量安全检查,实用性强。

Detection method and application of antibiotic residues in pseudo-chain Bifidobacterium and milk

【技术实现步骤摘要】
假链状双歧杆菌及牛奶中抗生素残留的检测方法及应用
本专利技术属于于生命科学和食品安全领域,更具体的涉及一种假链状双歧杆菌DSQL-1及利用该菌株快速检测牛奶中残留抗生素的方法。
技术介绍
牛奶中抗生素残留是牛奶安全的一个重要问题。牛奶中抗生素残留不仅会对人体产生各种不利影响,如导致人体产生耐药性,并出现肠道菌群失调、过敏反应、致畸、致突变等诸多反应。另外,还可抑制乳酸菌生长,导致发酵失败,给企业带来经济损失,以及影响牛奶及相关产品的出口和贸易。抗生素被广泛应用于治疗和预防奶牛疾病,不可避免造成牛奶中抗生素残留。此外,在应用抗生素治疗奶牛疾病在取得效果的同时,不规范使用抗生素,如加大使用剂量、延长治疗期,甚至给泌乳期奶牛长期应用抗生素预防疾病的行为,甚至不法生产者在生鲜牛奶中加入抗生素防腐等,使得牛奶中抗生素残留超标。抗生素残留检测是牛奶食品安全控制和管理的重要措施。目前我国食品卫生标准(GB/T4789.27-2008)中规定的利用微生物学方法筛检牛奶中抗生素残留的检测方法有TTC法和嗜热脂肪杆菌芽孢抑制法。其中TTC法设备简单、费用低,适合大样本的筛选和基层实验室操作而被广泛使用,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种假链状双歧杆菌DSQL‑1,于2016年2月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.12067。

【技术特征摘要】
1.一种假链状双歧杆菌DSQL-1,于2016年2月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.12067。2.权利要求1所述的假链状双歧杆菌DSQL-1在筛检牛奶中残留四环素、青霉素和红霉素中的应用。3.一种牛奶中抗生素残留的检测方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)菌株活化:将权利要求1所述的假链状双歧杆菌DSQL-1菌株接种于TPY固体培养基,37℃培养24-48h;(2)菌悬液制备:取步骤(1)所得的假链状双歧杆菌DSQL-1TPY菌落,用PBS调整配制菌悬液并调整至OD600的值为0.10-0.12,4℃保存;(3)检测用培养基制备:以重量计,水解酪蛋白10g,胰化大豆蛋白胨5.0g,氯化钠5.0g,葡萄糖20.0g,酵母提取物2.0g,L-半胱氨酸0.5g,可溶性淀粉0.5g,低聚果糖2g,氯化镁0.5g,氯化钙0.1g,硫酸锌0.2g,K2HPO42.0g,吐温-801.0ML,蒸馏水1000mL,调节pH至6.5-6.8,加热煮沸5分钟,定性滤纸过滤,包装后115℃高压灭菌15-20分钟,冷却后置4℃保存、备用;(4)0.2‰甲基红溶液制备:称取0.02g甲基红,用100mL无水乙醇或95%乙醇溶解;(5)无抗牛奶制备:称取无抗奶粉,用无菌蒸馏水配制10%的溶液;或用蒸馏水配制10%溶液后,121℃高压灭菌后,4℃保存备用;(6)定量标准管制备:取四环素、红霉素和青霉素标准储备液,用无抗乳配制抗生素标准工作液;四环素500μg/L、450μg/L、400μg/L、350μg/L、300μg/L、250μg/L、200μg/L、150μg/L、100μg/L、50μg/L、0μg/L的标准工作液的标准工作液;红霉素100μg/L、80μg/L、60μg/L、40μg/L、20μg/L、10μg/L、0μg/L的标准工作液;青霉素100μg/L、50μg/L...

【专利技术属性】
技术研发人员:杜季梅刘佳明楼永良叶盛
申请(专利权)人:温州医科大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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