用于在哺乳动物中增加母体子宫的胚胎植入率的方法技术

本发明专利技术涉及用于在哺乳动物中增加母体子宫的胚胎植入率的方法：通过将有效量的β‑半乳糖苷‑结合凝集素或其衍生物、以及包含所述凝集素的产品给予哺乳动物子宫。

A method for increasing the implantation rate of maternal uterus in mammals

【技术实现步骤摘要】
用于在哺乳动物中增加母体子宫的胚胎植入率的方法本申请是申请日为2011年12月9日，申请号为201180068131.8，专利技术名称为“用于在哺乳动物中增加母体子宫的胚胎植入率的方法，有效量的β-半乳糖苷-结合凝集素或其衍生物、β-半乳糖苷-结合凝集素或衍生物和产品的用途”的专利技术专利的分案申请。专利
本专利技术涉及在哺乳动物中增加母体子宫的胚胎植入率的方法，即通过给予所述哺乳动物子宫有效量的β-半乳糖苷-结合凝集素或其衍生物、以及包含所述凝集素的产品。相关技术的描述农业产业在巴西经济中起到关键作用，因为它在国民生产总值中占有相当大的份额并对贸易平衡作出积极贡献。为了确保其在农业市场上的利润率，农业所有物(agriculturalproperty)应当维持最高的牲畜生殖效力，以满足消费者对高质量产品的需要。在这个意义上说，维持足够的出生率是导致有利可图的农业所有物的事件链上的关键性因素。然而，在大多数情况下，维持最佳生殖水平是一项困难的任务，因为早期妊娠胚胎的丧失率高。生殖可被定义为在一系列生理事件之后从某一物种中孕育出同种活体，这继而取决于多个因素。在农业领域使用现有技术水平的生殖技术在牲畜的遗传改进中可具有关键性作用，增加妊娠潜力(将胚胎植入母体子宫内)，以确保动物工作寿命期间的最大生产率。然而，在全世界范围内，对养殖者的经济损失而言，胚胎丧失是最常见原因之一；因此，考虑到妊娠诊断和妊娠维持中所涉及到的复杂机制，预防早期胚胎丧失仍然是一个挑战。鉴别哺乳动物母体子宫中的胚胎植入率的早期诊断是农业程序(agriculturalprocedure)的关键性工具，因为它允许养殖者采取预防性措施并使最终的经济损失减至最小。因此，根据牛(cattle)卵巢的生殖生理学的改进的知识，已经开发出新的技术，以达到更好的生殖结果并降低处理成本。与牛的体外受精类似，辅助生殖技术变得越来越普及，因为有市场需求。牛的有效生殖性能直接涉及到来自奶牛品种的大量小母牛和来自肉牛品种的小公牛的出生，因而为农业所有物获得经济利益。其它的市场特征，例如全球消费者对质量的要求，动物来源产品的规模和标准化，以及对繁育、农业和生物能源领域的空间争夺，都刺激了对更高生产率的探索，使生殖生物技术得以快速改善。与全球初级市场的生产和消费需求相符合，巴西的农业生产依赖于辅助生殖技术，以增加牛群的平均生产率，因为所述技术显著增加了遗传上优良动物的出生。用于农业所有物的主要生殖技术包括:(i)经自然方式交配或生殖；(ii)人工授精；(iii)体内产生，然后胚胎移植；和(iv)体外产生，然后胚胎移植。无论所选技术如何，生殖方法的主要目标是允许繁殖物种的最大性能，得到积极结果。交配是一项广泛使用的技术，因为对于养殖者而言是较不昂贵的，但它对性传播疾病而言具有有限的控制并且对兽群提供较缓慢的遗传改良。在该程序中，胚胎包含50%来自父本的遗传物质(因此，不同于来自母本的遗传物质)，这可引起形成大量的同种异体抗原(alloantigen)并导致胚胎丧失，因为缺乏母-胎耐受。同种异体抗原是由来自属于相同物种的其它生物体的遗传物质所编码的任何分子。因为所述分子是不同的分子并被引入到另一生物体，后者的免疫系统被诱导而产生针对该“外源”物质的一系列反应。一个实例是一半遗传物质来自母本、一半遗传物质来自父本的新受精的胚胎；后一半对于母本的免疫系统而言可为外源的，因此它可能被母本的机体所排斥。母-胎免疫耐受(母本机体识别/接受胎儿，而不触发针对它的免疫应答的过程)的缺乏是早期流产(precociousabortion)的主要原因之一。在农业领域中广泛使用的另一项生殖技术是人工授精(AI)，其在于通过适合于各雌性解剖特性的特定技术，将精液(精子/雄配子和精浆)人工放入雌性生殖道。根据已授精雌性数量，通过妊娠率-或受孕雌性数量来测定AI的成功。在该程序中，所产生的胚胎也包含50%来自父本的遗传物质(因此，不同于来自母本的遗传物质)，因此这也可导致形成大量的同种异体抗原并导致胚胎丧失，因为缺乏母-胎耐受。另外，体内产生，然后胚胎移植(ET)，是这样的生殖技术：其中若干胚胎在供体雌性(其供给遗传物质)的生殖道中产生并被移植到同一物种的受体雌性的子宫，其将妊娠至足月。胚胎产生进入供体子宫涉及超数排卵(superovulation)、人工授精和胚胎冲洗(embryoflushing)技术。冲洗之后，评价胚胎并可将有活力的胚胎移植或冷冻保存。将体内产生的胚胎移植(放置)到受体的子宫或子宫角，取决于动情期的同步化过程(即，以将受体的子宫调整到胚胎发育的相同阶段)。在该程序中，移植到受体的机体内的胚胎包括至多100%同种异体抗原(alloantigen)(不同遗传物质)，因为它们完全由来自供体和来自父本的遗传物质组成，这暗示具有较高的胚胎丧失风险，因为缺乏母-胎耐受。另一方面，体外受精，然后胚胎移植，涉及到在实验室内产生胚胎，并且将所述胚胎移植到同一物种的受体雌性子宫，其将妊娠至足月。胚胎的实验室产生取决于以下：(i)通过超声引导的卵泡穿刺，从供体卵巢吸取卵母细胞；(ii)IVM–卵母细胞的体外成熟，然后体外诱导卵母细胞的细胞质和卵母细胞核成熟，从而制备卵，用于受精；(iii)IVF-体外受精或成熟卵母细胞和有能力的精子的配子配合过程；(iv)IVC–受精后的胚胎体外培养，直到5-7天培养之后，所述胚胎到达合适阶段(桑椹胚和/或胚泡)，用于移植；(v)胚胎移植，当培养期之后，应当评价胚胎并可将具有良好活力的那些进行移植、冷冻保存和/或玻璃化。体外产生的胚胎向受体的子宫或子宫角的移植，也取决于动情期的同步化过程(即，以将受体的子宫调整到胚胎发育的相同阶段)。在该程序中，在受体机体内生长(ovulated)的胚胎包括至多100%同种异体抗原(不同遗传物质)，因为它们完全由来自供体和来自父本的遗传物质组成，这暗示具有较高的胚胎丧失风险，因为缺乏母-胎耐受。如上所述，母-胎耐受是一个免疫过程，其调节母本机体针对胚胎或胎儿的反应。机体的免疫系统负责针对可能损害其常规生理状态的外来因子和/或侵略者(aggressor)的一系列复杂反应。妊娠期间的免疫调节反应为排卵、联合突和受精所致的事件，其首要目标在于孕体(胚胎或胎儿和有关的膜)的生长和发育。在这个意义上，Lewis,S.K.等,2007(Galectin-15[LGALS15]:AGeneUniquelyExpressedintheUteriofSheepandGoatsthatFunctionsinTrophoblastAttachment)观察到，在反刍动物中，处于MO期的胚胎(桑椹胚，介于4-6天之间)进入子宫并持续发育直至BL期(胚泡，介于6-7天之间)，其含有单层细胞，称为滋养外胚层细胞。绵羊在直至D12天(第12天)、或山羊在直至D15天(第15天)，其透明带破裂之后，胚胎停留在延伸期。在所述时期期间，滋养外胚层产生干扰素-tau(IFNT)，其继而负责抑制黄体溶解(黄体退化)。当黄体(卵泡)具有活性时，则维持孕酮(P4)的产生，然后准备子宫内膜(包被子宫壁的粘膜)用于最终的妊娠。该项研究也表明，P4和IFNT调节子宫内膜上皮中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于非治疗目的的增加哺乳动物子宫中的胚胎植入率的方法，所述方法的特征在于其包括在植入前时期之前，将有效量的对于每千克体重的所述哺乳动物为1 x 10

【技术特征摘要】
2010.12.21 BR PI1005702-11.用于非治疗目的的增加哺乳动物子宫中的胚胎植入率的方法，所述方法的特征在于其包括在植入前时期之前，将有效量的对于每千克体重的所述哺乳动物为1x10-7mg至1mg的活性形式β-半乳糖苷-结合凝集素或其烷基化形式给予哺乳动物子宫，所述β-半乳糖苷-结合凝集素或其烷基化形式选自半乳凝素-1、半乳凝素-3、半乳凝素-9、半乳凝素-13、半乳凝素-15，所述植入前之前的时期开始于排卵后第7天。2.权利要求1的方法，其特征在于所述哺乳动物是牛。3.权利要求1的方法，其特征在于活性形式β-半乳糖苷-结合凝集素或烷基化形式呈无菌的、稳定的、无内毒素的、等渗缓冲液的形式，其pH介于6.8至7.4之间。4.权利要求3的方法，其特征在于所述缓冲液选自盐水磷酸缓冲液或生理血清。5.权利要求1的方法，其特征在于将所述β-半乳糖苷-结合凝集素或其烷基化形式与精液、卵母细胞或非人胚胎混合提供给所述哺乳动物子宫。6.权利要求1的方法，其特征在于将所述β-半乳糖苷-结合凝集素或其烷基化形式，以及精液、卵母细胞或非人胚胎，或分开和同时提供给所述哺乳动物子宫。7.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：M迪亚斯巴鲁菲，E达斯尔瓦卡瓦霍莫拉尼，M龙科勒塔，CdC安德拉德，L卡塔迪罗德里古伊斯，
申请(专利权)人：因普伦哈生物科技先进开发有限公司，圣保罗大学，
类型：发明
国别省市：巴西,BR