一种脐带组织运输液及制备方法技术

本发明专利技术涉及一种脐带组织运输液及其制备方法，运输液包括DMEM培养液：100ml；青霉素：0.014～0.026g；氨基糖苷类抗生素：0.014～0.026g；多烯类抗生素：0.49～0.51mg。制备方法包括步骤1、按份制备运输液；制作每份运输液时分别按量称取组分中的药物；步骤2、将药物溶于DMEM培养液中，得到运输液；步骤3、将每份运输液分装、真空封口并低温保存。本发明专利技术所述的运输液中加入了多烯类抗生素、氨基糖苷类抗生素以及青霉素，可针对性的防止脐带组织在运输过程中被微生物感染，具有更好的抗菌效果。

A Umbilical Cord Tissue Transport Fluid and Its Preparation Method

The present invention relates to a umbilical cord tissue transport solution and its preparation method. The transport solution includes DMEM culture medium: 100ml; penicillin: 0.014-0.026g; aminoglycoside antibiotics: 0.014-0.026g; polyene antibiotics: 0.49-0.51mg. The preparation method includes step 1, preparation of transport solution by portion, weighing the drugs in each transport solution by volume, step 2, dissolving the drugs in DMEM culture medium to obtain transport solution, step 3, packaging, vacuum sealing and cryopreservation of each transport solution. Polyene antibiotics, aminoglycoside antibiotics and penicillin are added to the transportation solution of the invention, which can prevent the umbilical cord tissue from being infected by microorganisms during transportation and has better antimicrobial effect.

【技术实现步骤摘要】
一种脐带组织运输液及制备方法
本专利技术涉及细胞运输液，具体涉及一种脐带组织运输液及制备方法。
技术介绍
脐带是胎儿和胎盘之间的连系结构。脐带组织在医学上有很广阔的应用前景。例如储存所遗弃的脐带组织可以为实现个体化的基因治疗及细胞治疗提供丰富的细胞和组织资源储备。脐带组织中还存在有脐带间充质干细胞(MesenchymalStemCells，MSCs)，是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。保存和运输脐带组织的最大障碍在于，脐带组织在体外运输的过程中，为了后续培养以及应用，其组织/细胞在制备培养的全过程中都需要处于无菌状态。为保证采集好的脐带在运输和贮存过程中能保持无菌，传统采用将脐带组织浸没在PBS采集液里进行保存。但是PBS的配制复杂，自行配制时，在大批量制备上会增加大量的工作量，若购买成品，则因其价格昂贵，使用成本较高。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术公开了一种脐带组织运输液及制备方法。本专利技术所采用的技术方案如下：一种脐带组织运输液，每份运输液包括：DMEM培养液：100ml；青霉素：0.014～0.026g；氨基糖苷类抗生素：0.014～0.026g；多烯类抗生素：0.49～0.51mg。其进一步的技术方案为：DMEM培养液；100ml；青霉素：0.018～0.022g；氨基糖苷类抗生素：0.018～0.022g；多烯类抗生素：0.5～0.51mg。其进一步的技术方案为：所述多烯类抗生素为两性霉素B或者制霉菌素。优选的，所述多烯类抗生素为两性霉素B。其进一步的技术方案为：所述氨基糖苷类抗生素为链霉素、庆大霉素、卡那霉素的一种或者几种。优选的：所述氨基糖苷类抗生素为链霉素。其进一步的技术方案为：所述青霉素为青霉素G钠盐。多烯类抗生素：多烯类抗生素又称多烯大环内酯类抗生素(polyenemacrolideantibiotics,PEM，是由某些放线菌和真菌所产生而含有共轭双键和抗真菌抗生素。都呈现多烯化合物的特征，多烯类抗生素主要抑制真菌细胞膜的胆固醇，例如真菌与支原体的细胞膜。氨基糖苷类抗生素：氨基糖苷类抗生素(Aminoglycosides)是由氨基糖与氨基环醇通过氧桥连接而成的苷类抗生素，其对于细菌的作用主要是抑制细菌蛋白质的合成，妨碍初始复合物的合成，诱导细菌合成错误蛋白以及阻抑已合成蛋白的释放，从而导致细菌死亡。青霉素：青霉素(Penicillin)是抗菌素的一种，是指分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是由青霉菌中提炼出的抗生素。根据如上任意一项所述的脐带组织运输液的制备方法，包括：步骤1、按份制备运输液；制作每份运输液时分别按量称取组分中的药物；步骤2、将药物溶于DMEM培养液中，得到运输液；步骤3、将每份运输液用125ml储液瓶分装，每瓶储液瓶存储100ml运输液。之后拧紧瓶盖，用封口膜进行封口，装入自封袋后，再装入真空封口袋中，进行真空封口。其进一步的技术方案为，在所述步骤2中，先将将药物溶于40ml的质量百分浓度为0.9％的DMEM培养液中；之后使用0.22μm滤器过滤得到过滤液；然后将过滤液稀释至500ml得到运输液；最后进行分装，每瓶100ml，真空封口保存。。以上制备步骤均需在无菌环境中操作。本专利技术的有益效果如下：(1)本专利技术所述的运输液中加入了多烯类抗生素、氨基糖苷类抗生素以及青霉素，可针对性的防止脐带组织在运输过程中被微生物感染，具有更好的抗菌效果。(2)本专利技术使用DMED培养液为基础，假如了各种抗生素，通过控制各个成分的含量，可以在运输过程中对脐带组织起到很好的保护作用，维持脐带组织的形态结构和生物活性，延长脐带组织的保存时间，提高脐带组织的存活率。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述。以下实施例中所使用的脐带组织取自健康产妇正常分娩或剖腹产后的脐带。实施例1～3均是制作了一份运输液，也可以根据比例制作不到一份(如半份、四分之一份等)或者多份运输液。实施例1～3的运输液组份见表1表1成分实施例1实施例2实施例3DMEM培养液(ml)100100100青霉素G钠盐(g)0.010.0140.026链霉素(g)0.020.0260.014两性霉素B(mg)0.50.490.51上述实施例1～3中的脐带组织运输液的制备方法，具体包括以下步骤：步骤1、按照各个药物的组份重量称取各个药物；步骤2、将药物溶于40ml、浓度为0.9％的DMEM培养液中，得到初制溶液；步骤3、将初制溶液使用进行0.22μm滤器过滤得到过滤液；再将过滤溶液稀释至500ml，得到运输液。步骤4、将运输液分装，具体的，将运输液用125ml的储液瓶分装，每个储液瓶装有100ml的运输液。步骤5、真空低温保存，将分装后的运输液拧紧瓶盖，用封口膜进行封口，装入自封袋后，再装入真空封口袋中，进行真空封口。最后将封口的运输液放置于-20℃保存。将脐带组织保存于上述脐带组织运输液中的方法是：步骤A、将置于-20℃的温度下保存的运输液解冻至4℃。步骤B、将健康产妇正常分娩或者剖腹产后的脐带，离体后立刻置于4℃的脐带清洗液中初步保存。步骤C、将初步保存的脐带无菌条件下取脐带组织，用脐带清洗液冲洗。之后将脐带组织置于步骤A中得到的4℃的运输液中。步骤D、对装有脐带组织的运输液降温保存于4℃环境的冷链运输箱中模拟运输过程。步骤E、将步骤D处理后的脐带组织取出、培养，观察脐带组织细胞的培养情况。根据以上保存方法，设置一对照例如下：对照例1：制备对照例1的样品：步骤A、取四组，每组100份运输液，之后将置于-20℃的温度下保存的运输液解冻至4℃。步骤B、将健康产妇正常分娩或者剖腹产后的脐带，离体后立刻置于4℃的脐带清洗液中初步保存。步骤C、将初步保存的脐带无菌条件下取脐带组织，剥离内皮层，用脐带清洗液冲洗，分为四组；每组包括100份。之后将其中三组溶液分别置于步骤A中得到的4℃的运输液中，另外一组置于DMED培养液中。步骤D、对装有脐带组织的运输液4℃冷链运输箱中模拟运输过程，保存5个小时。步骤E、将步骤D处理后的脐带组织最后是对脐带组织取出、培养，观察脐带组织细胞的培养情况，计数活细胞比例。对照例1的结果见表2：表2DMEM培养液实施例1运输液实施例2运输液实施例3运输液运输总数100100100100成活总数48979495成活率48％97％94％95％如表2所示，脐带组织在运输液中保存之后，其结果均比在DMEM培养液中保存的存活率高。其中实施例1中的条件为最优的配置方法。实施例4～6均是制作了一份运输液，也可以根据比例制作不到一份(如半份、四分之一份等)或者多份运输液。实施例4～6的运输液组份见表3表3成分实施例4实施例5实施例6DMEM培养液(ml)100100100青霉素G钠盐(g)0.0240.0140.026庆大霉素(g)0.0220.0140.026制菌霉素(mg)0.5020.490.51上述实施例4～6中的脐带组织运输液的制备方法以及将脐带组织保存于脐带组织运输液中的方法是与实施例1～3相同。根据以上保存方法，设置一对照例如下：对照例2：制备对照例本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脐带组织运输液，其特征在于，每份运输液包括：DMEM培养液：100ml；青霉素：0.014～0.026g；氨基糖苷类抗生素：0.014～0.026g；多烯类抗生素：0.49～0.51mg。

【技术特征摘要】
1.一种脐带组织运输液，其特征在于，每份运输液包括：DMEM培养液：100ml；青霉素：0.014～0.026g；氨基糖苷类抗生素：0.014～0.026g；多烯类抗生素：0.49～0.51mg。2.根据权利要求1所述的脐带组织运输液，其特征在于：每份运输液包括：DMEM培养液；100ml；青霉素：0.018～0.022g；氨基糖苷类抗生素：0.018～0.022g；多烯类抗生素：0.5～0.51mg。3.根据权利要求1或者2所述的脐带组织运输液，其特征在于：所述多烯类抗生素为两性霉素B或者制霉菌素。4.根据权利要求3所述的脐带组织运输液，其特征在于：所述多烯类抗生素为两性霉素B。5.根据权利要求1或者2所述的脐带组织运输液，其特征在于：所述氨基糖苷类抗生素为链霉素、庆大霉素、卡那霉素的一种或者几种。6.根据权利要求5所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱迪·德瓦库玛，焦阳，王铁，杨丽华，李靖，
申请(专利权)人：江苏瑞思坦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32