一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法技术

技术编号:21240505 阅读:27 留言:0更新日期:2019-06-01 03:25
一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法,将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,培养温度28℃‑35℃,时间为24h,作为发酵种子液,接种到种子罐中,用发酵培养基进行种子培养,发酵温度28℃‑35℃,发酵培养30h‑36h,发酵培养后收集种子液,接种至发酵罐中,用发酵培养基进行发酵培养,发酵结束,收集罐内发酵液,得到木聚糖酶和其它辅酶。优点是:以黑曲霉进行发酵制备木聚糖酶,工艺合理,发酵工艺稳定,产品活菌数高,酶活力高,市场应用前景广,辅酶包括中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、真菌淀粉酶、纤维素酶、β‑葡聚糖酶、果胶酶、糖化酶、中性甘露聚糖酶、酸甘甘露聚糖酶,适合工业化生产。

An industrial fermentation method for co-production of xylanase and other Coenzymes

An industrial fermentation method for co-production of xylanase and other coenzymes was introduced. Aspergillus niger was inoculated in seed culture medium and cultured in eggplant bottle. The culture temperature was 28 35 and the time was 24 hours. As fermentation seed liquid, it was inoculated into seed pot and cultured in fermentation medium. The fermentation temperature was 28 35 and the fermentation culture time was 30 hours. After fermentation, the seed liquid was collected and connected. Seed to fermentation tank, fermentation medium was used for fermentation culture. After fermentation, fermentation broth was collected and xylanase and other coenzymes were obtained. The advantages are as follows: fermentation with Aspergillus Niger to prepare xylanase has reasonable technology, stable fermentation process, high number of viable bacteria, high enzyme activity and wide market application prospect. Coenzymes include neutral protease, alkaline protease, acidic protease, fungal amylase, cellulase, beta glucanase, pectinase, saccharifying enzyme, neutral mannanase and acid mannanase, which are suitable. It is suitable for industrial production.

【技术实现步骤摘要】
一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法
本专利技术涉及一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法。
技术介绍
木聚糖酶属于水解酶类,是专一降解木聚糖的酶,可将木聚糖分解为木寡糖。木聚糖酶是植物半纤维素的主要成分,存在于植物细胞壁中,占植物细胞干重的15%-35%。大多数木聚糖是一种结构复杂的、具有高度分枝的异质多糖,含有许多不同的取代基。木聚糖酶在饲料、食品、纺织、造纸和日用化工等行业都有着极其广泛的用途。可添加到饲料中,可促进果汁和啤酒的澄清,可作为食品添加剂,在烘烤食品中代替卵磷脂而提高烘烤物品的质量;可用于造纸工业无氯生物制浆和预漂白,可增加纸张的亮度而不影响纸张的强度,市场容量很大。目前国内生产木聚糖酶的厂家较少,酶活力单位较低,质量不稳定。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法,工艺合理,成本低廉,产品活菌数高,酶活性高,辅酶种类多,适合工业化生产。本专利技术的技术解决方案是:一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法,其具体步骤如下:(1)培养基组成种子培养基,1L:葡萄糖2-6%,蛋白胨1-1.5%,麸皮2-5%,消泡剂0.03%,余量水,pH值5.5;固体发酵培养基,1L:麸皮90%,硫酸铵1%,葡萄糖3-5%,吐温-800.08%,余量水;(2)三角瓶培养将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,接种量为3%-5%,培养条件为:温度28℃-35℃,时间为24h,作为发酵种子液;(3)种子培养将发酵种子液接种到种子罐中,用发酵培养基进行种子培养,接种量为3%-5%,发酵温度28℃-35℃,罐压0.08Mpa,发酵培养30h-36h,转速140r/min-160r/min、风量60m3/h,发酵培养后收集种子液;(4)发酵培养将种子液接种至发酵罐中,用发酵培养基进行发酵培养,接种量为3%-5%,接种后控制含水量60vol%,发酵温度为28℃-35℃,培养时间为100h-140h,发酵结束,收集罐内发酵液,得到木聚糖酶和其它辅酶。本专利技术的有益效果:以Aspergillusniger(黑曲霉)进行发酵制备木聚糖酶,经优化菌种活化条件,发酵工艺优化控制,确立了稳定的产业化发酵生产工艺,工艺合理,产品活菌数高,采用本方法发酵后制备的木聚糖酶活力可达8500u/mL,辅酶多,活力高,市场应用前景广,辅酶包括中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、真菌淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、果胶酶、糖化酶、中性甘露聚糖酶、酸甘甘露聚糖酶,适合工业化生产。具体实施方式实施例1(1)培养基组成种子培养基,1L:葡萄糖2%,蛋白胨1.5%,麸皮2%,消泡剂0.03%,余量水,pH值5.5;固体发酵培养基,1L:麸皮90%,硫酸铵1%,葡萄糖3%,吐温-800.08%,余量水;(2)三角瓶培养发酵菌种:Aspergillusniger(黑曲霉);将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,接种量为3%,培养条件为:温度28℃,时间为24h,作为发酵种子液;(3)种子培养将发酵种子液接种到种子罐中,用发酵培养基进行种子培养,接种量为3%,发酵温度28℃,罐压0.08Mpa,发酵培养30h,转速140r/min、风量60m3/h,发酵培养后收集种子液;(4)发酵培养将种子液接种至发酵罐中,用发酵培养基进行发酵培养,接种量为3%,接种后控制含水量60vol%,发酵温度为28℃,培养时间为100h,发酵结束,收集罐内发酵液,得到木聚糖酶和其它辅酶,辅酶包括中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、真菌淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、果胶酶、糖化酶、中性甘露聚糖酶、酸甘甘露聚糖酶。实施例2(1)培养基组成种子培养基,1L:葡萄糖6%,蛋白胨1%,麸皮5%,消泡剂0.03%,余量水,pH值5.5;固体发酵培养基,1L:麸皮90%,硫酸铵1%,葡萄糖5%,吐温-800.08%,余量水;(2)三角瓶培养将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,培养条件为:温度35℃,时间为24h,作为发酵种子液;(3)种子培养将发酵种子液接种到种子罐中,用发酵培养基进行种子培养,接种量为5%,发酵温度35℃,罐压0.08Mpa,发酵培养36h,转速160r/min、风量60m3/h,发酵培养后收集种子液;(4)发酵培养将种子液接种至发酵罐中,用发酵培养基进行发酵培养,接种量为5%,接种后控制含水量60vol%,发酵温度为35℃,培养时间为140h,发酵结束,收集罐内发酵液,得到木聚糖酶和其它辅酶,辅酶包括中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、真菌淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、果胶酶、糖化酶、中性甘露聚糖酶、酸甘甘露聚糖酶。实施例3(1)培养基组成种子培养基,1L:葡萄糖4%,蛋白胨1.2%,麸皮3%,消泡剂0.03%,余量水,pH值5.5;固体发酵培养基,1L:麸皮90%,硫酸铵1%,葡萄糖4%,吐温-800.08%,余量水;(2)三角瓶培养将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,培养条件为:温度32℃,时间为24h,作为发酵种子液;(3)种子培养将发酵种子液接种到种子罐中,用发酵培养基进行种子培养,接种量为4%,发酵温度30℃,罐压0.08Mpa,发酵培养32h,转速150r/min、风量60m3/h,发酵培养后收集种子液;(4)发酵培养将种子液接种至发酵罐中,用发酵培养基进行发酵培养,接种量为4%,接种后控制含水量60vol%,发酵温度为30℃,培养时间为120h,发酵结束,收集罐内发酵液,得到木聚糖酶和其它辅酶,辅酶包括中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、真菌淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、果胶酶、糖化酶、中性甘露聚糖酶、酸甘甘露聚糖酶。实施例3的检测结果:木聚糖酶(国标)8500u/mL水分40%;其他辅酶:以上仅为本专利技术的具体实施例而已,并不用于限制本专利技术,对于本领域的技术人员来说,本专利技术可以有各种更改和变化。凡在本专利技术的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法,其特征是:具体步骤如下:(1)培养基组成种子培养基,1L:葡萄糖2‑6%,蛋白胨1‑1.5%,麸皮2‑5%,消泡剂0.03%,余量水,pH值5.5;固体发酵培养基,1L:麸皮90%,硫酸铵1%,葡萄糖3‑5%,吐温‑80 0.08%,余量水;(2)三角瓶培养将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,接种量为3%‑5%,培养条件为:温度28℃‑35℃,时间为24h,作为发酵种子液;(3)种子培养将发酵种子液接种到种子罐中,用发酵培养基进行种子培养,接种量为3%‑5%,发酵温度28℃‑35℃,罐压0.08Mpa,发酵培养30h‑36h,转速140r/min‑160r/min、风量60m

【技术特征摘要】
1.一种联产木聚糖酶和其它辅酶的工业发酵方法,其特征是:具体步骤如下:(1)培养基组成种子培养基,1L:葡萄糖2-6%,蛋白胨1-1.5%,麸皮2-5%,消泡剂0.03%,余量水,pH值5.5;固体发酵培养基,1L:麸皮90%,硫酸铵1%,葡萄糖3-5%,吐温-800.08%,余量水;(2)三角瓶培养将黑曲霉接种于种子培养基在茄子瓶中进行培养,接种量为3%-5%,培养条件为:温度28℃-35℃,时间为24h,作为发酵种子液;(3)种子培养...

【专利技术属性】
技术研发人员:韩国宝梁爱民张天航
申请(专利权)人:朝阳华星生物工程有限公司
类型:发明
国别省市:辽宁,21

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