一种从白鲜皮中提取梣皮酮的方法技术

本发明专利技术采用超滤和纳滤组合膜技术来改进梣皮酮和黄柏酮的提取工艺，以达到初步分离、高效浓缩、节约能耗、减少污染的效果，并且，利用其具有内酯结构的特点，通过碱溶酸沉的方法对浓缩液进行处理，以得到内酯富集粗品，最后基于大孔树脂的分离方法进行梣皮酮和黄柏酮的分离制备。本发明专利技术的提取分离方法操作简便、收率较高、纯度较好、可应用于大规模工业化生产。

A Method for Extracting Eupatorone from Fresh Peel

Ultrafiltration and nanofiltration combined membrane technology is used to improve the extraction process of berberone and phellodendrone in order to achieve the effect of preliminary separation, high efficiency concentration, energy saving and pollution reduction. Moreover, the concentrated liquid is treated by alkali-soluble acid precipitation method with the characteristics of lactone structure to obtain lactone enriched crude products, and finally based on the separation method of macroporous resin. Separation and preparation of berberone and berberone. The extraction and separation method of the invention has the advantages of simple operation, high yield, good purity and can be applied to large-scale industrial production.

【技术实现步骤摘要】
一种从白鲜皮中提取梣皮酮的方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种从白鲜皮中提取梣皮酮和黄柏酮的方法。
技术介绍
传统中药白鲜皮是芸香科白鲜属植物白鲜(DictamnusdasycarpusTurcz.)或狭叶白鲜(D.angustifoliusG.Doc)的干燥根皮，具有清热燥湿、祛风解毒的功能，可用于治疗湿热疮毒，黄水淋漓，湿疹，风疹，疥癣疮癞，风湿热痹，黄疸尿赤等病症。白鲜皮中含有多种化学成分，主要有挥发油类、生物碱类、柠檬苦素类、倍半萜及苷类、甾体类及多糖类等，现代药理学研究表明白鲜皮中的多种成分具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗细菌、抗肿瘤等生物活性。梣酮和黄柏酮是白鲜皮中主要的内酯类化合物，梣酮(fraxinellone)又名梣皮酮、白蜡树酮，其作为新型的肝病治疗药物，具有良好的保肝降酶及抑制肝纤维化等活性，并具有抑菌、杀虫、止痒等作用。黄柏酮(Obacunone)具有抑菌、治疗血管疾病及抗癌等多种药理功效，在抑制结肠癌、胰腺癌、乳腺癌和前列腺癌等方面具有潜在开发价值。因此，分离制备梣皮酮和黄柏酮单体对于进一步研究梣皮酮和黄柏酮的药理活性、开发保肝、抑菌、杀虫、抗癌等药物具有重要意义。然而，由于白鲜皮中梣皮酮和黄柏酮的含量较少，梣皮酮约含0.1～0.2％，黄柏酮约含0.3～0.6％，并且现有技术关于梣皮酮和黄柏酮单体分离制备的方法主要采用硅胶柱层析结合重结晶的方法，例如：专利CN108690041A、CN101228871A、李翔等，“从白鲜皮中同时制备梣酮、白鲜碱、黄柏酮单体的方法”等，这些方法步骤繁琐、收率较低，只适合于实验室少量分离，而无法满足工业生产需求；此外，在提取过程中需要消耗大量溶剂，而提取液一般采取传统的真空加热方式浓缩，能耗大、成本高，且长时间高温浓缩可能会破坏有效成分，从而影响产品的品质。近年来，膜分离技术正逐步应用于天然产物的提取纯化领域，本专利技术采用超滤和纳滤组合膜技术来改进梣皮酮的提取工艺，以达到初步分离、高效浓缩、节约能耗、减少污染的效果，并且，利用梣皮酮和黄柏酮具有内酯结构的特点，通过碱溶酸沉的方法对浓缩液进行处理，以得到内酯富集粗品，最后基于大孔树脂的分离方法进行梣皮酮和黄柏酮的分离制备。本专利技术的提取分离方法操作简便、收率较高、纯度较好、可应用于大规模工业化生产。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的不足，提供一种从白鲜皮中分离制备梣皮酮和黄柏酮单体的方法，操作简便、收率较高、纯度较好、节约能耗、适合于在工业生产中应用。本专利技术是通过以下技术方案得以实现：一种从白鲜皮中分离制备梣皮酮和黄柏酮的方法，包括如下步骤：步骤(1)提取：将白鲜皮粉碎，向粉碎物中加入95％乙醇，在30～50℃下超声提取2～3次，合并提取液，压滤，离心，收集上清液；步骤(2)超滤：将上清液进入超滤膜组件进行处理，收集超滤透过液；步骤(3)纳滤：将超滤透过液进入纳滤膜组件进行处理，分离得到浓缩液和透析液，当浓缩液的体积达到超滤透过液的10～15％时，将浓缩液移入反应罐；步骤(4)碱溶酸沉：向反应罐中加入1～3倍浓缩液体积的水，用碱将溶液pH值调节至10～12，搅拌，低温静置，过滤，用酸调节滤液pH值至6～8，低温析晶，过滤，收集固体。步骤(5)大孔树脂分离：将固体用丙酮溶解，为上样液，以D101型大孔树脂为分离介质，湿法装柱，以石油醚-丙酮为流动相，进行梯度洗脱分离(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1～2∶1)，分段收集洗脱液，检测每段洗脱液中梣皮酮和黄柏酮的含量，分别合并各个成分的洗脱液，浓缩，干燥，得梣皮酮和黄柏酮产品；优选地，步骤(1)中的95％乙醇与白鲜皮的体积质量比为3～5L∶1Kg；优选地，步骤(2)中的超滤膜组件为卷式膜组件，超滤膜材质为聚砜醚(PES)，截留分子量为5000～8000Da，操作温度为25～40℃，操作压力为0.4～0.6MP；进一步优选的，在超滤处理过程中，在截留侧添加渗滤水。优选地，步骤(3)中的纳滤膜组件为卷式膜组件，纳滤膜材质为复合聚酰胺(PA)，截留分子量为200～300Da，操作温度为30～50℃，操作压力为0.6～0.8MP；优选地，步骤(2)或(3)的超滤膜和纳滤膜在膜处理之后依次用去离子水和清洗剂溶液清洗；优选地，清洗温度为35～40℃，清洗时间为30～60min；进一步优选地，清洗剂的pH值为11～12；优选地，步骤(4)中的析晶温度为4～6℃；优选地，步骤(4)中的碱为NaCO3、NaOH或氨水中的一种；优选地，步骤(5)中的树脂柱径高比为1∶10；拌样树脂为树脂总量的1/10。本专利技术采用超滤和纳滤组合膜技术来改进梣皮酮和黄柏酮的提取工艺，可以达到初步分离、高效浓缩、节约能耗、减少污染的效果，首先，利用孔径较大的超滤膜除去多糖、蛋白质等大分子杂质，再经纳滤分离之后，除去寡糖、盐等小分子杂质，同时可以达到高效浓缩的效果，基本上可以保留全部有效成分：然后，利用梣皮酮和黄柏酮具有内酯结构的特点，通过碱溶酸沉的方法对浓缩液进行处理，得到粗品，其中主要含有梣皮酮、黄柏酮、柠檬苦素等内酯成分；经过上述操作，可以使得内酯有效成分富集，以便于进一步利用大孔树脂的分离方法进行梣皮酮和黄柏酮的分离制备。本专利技术的分离制备方法操作简便、收率较高、纯度较好、适于工业化生产。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不局限于这些实施例。仪器与材料白鲜皮，购自济宁，产地辽宁清源；梣酮：纯度＞99％，黄柏酮：纯度＞99％，北京伊诺凯科技有限公司；95％乙醇、石油醚、丙酮，国药集团化学试剂有限公司；Agilent1200高效液相色谱仪：安捷伦科技有限公司；VGT-1018S超声波清洗机，广州固特超声股份有限公司；BONA-GM-UF409超滤纳滤系统，济南博纳生物技术有限公司；超滤膜、纳滤膜，济南博纳生物技术有限公司。实施例1步骤(1)提取：将10kg白鲜皮粉碎，向粉碎物中加入50L95％乙醇，在30℃下600W超声提取3次，每次120min，合并提取液。用800目滤布预涂硅藻土，将合并得到的提取液进行板框过滤，滤液5000r/min离心30min，收集上清液；步骤(2)超滤：将上清液进入超滤膜组件进行处理，处理过程中在截留侧添加1倍体积的渗滤水，收集超滤透过液；超滤膜材质为聚醚砜(PES)，截留分子量为5000Da，操作温度为30℃，操作压力为0.6MP；步骤(3)纳滤：将超滤透过液进入纳滤膜组件进行纳滤浓缩，纳滤膜为复合聚酰胺(PA)膜，截留分子量为200Da，操作温度为50℃，操作压力为0.8MP；分离得到浓缩液和透析液，当浓缩液的体积达到超滤透过液的15％时，将浓缩液移入反应罐；超滤膜和纳滤膜在膜处理之后依次用去离子水和碱性清洗剂(pH＝11～12)溶液洗，温度为40℃，清洗时间为60min；步骤(4)碱溶酸沉：向反应罐中加入2倍浓缩液体积的水，开启搅拌，用Na2CO3溶液将溶液pH值调节至10，4℃静置，过滤，用酸调节滤液pH值至6.5，4℃析晶，过滤，收集固体，洗涤，干燥。步骤(5)大孔树脂分离：将固体用丙酮溶解，为上样液，以D101型大孔树脂为分离介质，湿法装柱，树脂柱径高比为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从白鲜皮中分离制备梣皮酮和黄柏酮的方法，包括如下步骤：步骤(1)提取：将白鲜皮粉碎，向粉碎物中加入95％乙醇，在30～50℃下超声提取2～3次，合并提取液，压滤，离心，收集上清液；步骤(2)超滤：将上清液进入超滤膜组件进行处理，收集超滤透过液；步骤(3)纳滤：将超滤透过液进入纳滤膜组件进行处理，分离得到浓缩液和透析液，当浓缩液的体积达到超滤透过液的10～15％时，将浓缩液移入反应罐；步骤(4)碱溶酸沉：向反应罐中加入1～3倍浓缩液体积的水，用碱将溶液pH值调节至10～12，搅拌，低温静置，过滤，用酸调节滤液pH值至6～8，低温析晶，过滤，收集固体。步骤(5)大孔树脂分离：将固体用丙酮溶解，为上样液，以D101型大孔树脂为分离介质，湿法装柱，以石油醚‑丙酮为流动相，进行梯度洗脱分离(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1～2∶1)，分段收集洗脱液，检测每段洗脱液中梣皮酮和黄柏酮的含量，分别合并各个成分的洗脱液，浓缩，干燥，得梣皮酮和黄柏酮产品。

【技术特征摘要】
1.一种从白鲜皮中分离制备梣皮酮和黄柏酮的方法，包括如下步骤：步骤(1)提取：将白鲜皮粉碎，向粉碎物中加入95％乙醇，在30～50℃下超声提取2～3次，合并提取液，压滤，离心，收集上清液；步骤(2)超滤：将上清液进入超滤膜组件进行处理，收集超滤透过液；步骤(3)纳滤：将超滤透过液进入纳滤膜组件进行处理，分离得到浓缩液和透析液，当浓缩液的体积达到超滤透过液的10～15％时，将浓缩液移入反应罐；步骤(4)碱溶酸沉：向反应罐中加入1～3倍浓缩液体积的水，用碱将溶液pH值调节至10～12，搅拌，低温静置，过滤，用酸调节滤液pH值至6～8，低温析晶，过滤，收集固体。步骤(5)大孔树脂分离：将固体用丙酮溶解，为上样液，以D101型大孔树脂为分离介质，湿法装柱，以石油醚-丙酮为流动相，进行梯度洗脱分离(石油醚∶乙酸乙酯＝15∶1～2∶1)，分段收集洗脱液，检测每段洗脱液中梣皮酮和黄柏酮的含量，分别合并各个成分的洗脱液，浓缩，干燥，得梣皮酮和黄柏酮产品。2.根据权利要求1所述的从白鲜皮中分离制备梣皮酮和黄柏酮的方法，其中，步骤(1)中的95％乙醇与白鲜皮的体积质量比为3～5L∶1Kg。3.根据权利要求1所述的从白鲜皮中分离制备梣皮酮和黄柏酮...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓灿，王承，
申请(专利权)人：山东笑康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37