一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤和人源脐带间充质干细胞注射液的制备步骤；所述人源脐带间充质干细胞注射液的制备步骤包括采用复方电解质注射液重悬Pe代人源脐带间充质干细胞，反复吹洗，待Pe代人源脐带间充质干细胞悬液均匀后，补充复方电解质注射液，调节人源脐带间充质干细胞浓度为4×10

Preparation of human umbilical cord mesenchymal stem cell injection for the treatment of osteoarthritis by lacunar injection

The present invention relates to a preparation method of human umbilical cord mesenchymal stem cell injection for the treatment of osteoarthritis by lacunar injection, including the steps of obtaining umbilical cord tissue block, primary culture of stem cells, subculture of stem cells and preparation of human umbilical cord mesenchymal stem cell injection. Human umbilical cord mesenchymal stem cells (HUCMSCs) were suspended with compound electrolyte injection and washed repeatedly. When the suspension of human umbilical cord mesenchymal stem cells (HUCMSCs) was homogeneous, compound electrolyte injection was supplemented to regulate the concentration of HUCMSCs by 4 x 10.

【技术实现步骤摘要】
一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法
本专利技术涉及生物医药
，更具体的说，它涉及一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液及其制备方法。
技术介绍
在许多国家中，骨关节炎(OA)是越来越普遍的关节疾病。已知，可使用一些抗发炎药物、镇痛剂、或润滑补充剂治疗OA。另可选择地，还可以一种包括钻孔、微骨折和自体骨软骨镶嵌移植术(mosaicplasty)的手术，进行缺损部位的修复或重建以治疗OA，但这种方式仅能暂时改善症状，无法永久治愈或使退化组织再生。近来已发展出一种细胞治疗方法，包括移植细胞或组织工程的软骨，藉以协助关节软骨缺损的修复。据报导，可通过移植在单层细胞培养条件下的自体软骨细胞而成功地治疗膝盖软骨缺损。在最近的报导中也说明，能自我更新并分化成各种间充质组织的间充质干细胞(MSCs)成为临床应用的一个有效的工具。举例而言，用于成骨不全的细胞治疗与软骨及骨的组织工程。来自健康捐赠者的同种异体MSCs可作为“全适捐赠细胞”而用于治疗患有肌肉骨骼疾病的患者。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种用于腔隙注射治本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于，包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤和人源脐带间充质干细胞注射液的制备步骤；所述人源脐带间充质干细胞注射液的制备步骤包括采用复方电解质注射液重悬Pe代人源脐带间充质干细胞，反复吹洗，待Pe代人源脐带间充质干细胞悬液均匀后，补充复方电解质注射液，调节人源脐带间充质干细胞浓度为4×10

【技术特征摘要】
1.一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于，包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤和人源脐带间充质干细胞注射液的制备步骤；所述人源脐带间充质干细胞注射液的制备步骤包括采用复方电解质注射液重悬Pe代人源脐带间充质干细胞，反复吹洗，待Pe代人源脐带间充质干细胞悬液均匀后，补充复方电解质注射液，调节人源脐带间充质干细胞浓度为4×104-6×104个/mL，加入软骨分化诱导剂，得到人源脐带间充质干细胞注射液；其中，e=6、7、8、9、10。2.根据权利要求1所述的一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于，所述软骨分化诱导剂包括青霉素、链霉素、TGF-β1、铁蛋白、抗坏血酸、地塞米松和丙酮酸钠，青霉素的用量为100U/mL，链霉素的用量为100μg/mL，TGF-β1的用量为10ng/mL，转铁蛋白的用量为5μg/mL，抗坏血酸的用量为50μg/mL，地塞米松的用量为10-7mol/L，丙酮酸钠的用量为6.25μg/mL。3.根据权利要求1所述的一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于，还包括干细胞的冻存步骤以及干细胞的复苏与培养步骤；所述干细胞的冻存步骤包括待Pm代人源脐带间充质干细胞达80-90%汇合度时，弃去上清液，加入0.5wt%的Tryple-Express消化液，待消化完全后，加入完全培养液终止消化，离心并弃去上清液，用生理盐水对Pm代人源脐带间充质干细胞清洗，并在无血清间充质干细胞冻存液中重悬，将Pm代人源脐带间充质干细胞悬液分装于冻存管中并封口，立即将冻存管放置于程序降温盒后并立即将程序降温盒放置于-80℃的冰箱中冻存12-24小时，之后将冻存管取出并立即放置于液氮中冻存。4.根据权利要求3所述的一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于，所述无血清间充质干细胞冻存液包括以质量份数计的无血清培养基80份、二甲基亚砜10份、L-薄荷基吡喃糖苷5份、甘油4份、N-乙酰葡萄糖胺1份。5.根据权利要求3所述的一种用于腔隙注射治疗骨关节炎的人源脐带间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于，所述干细胞的复苏与培养步骤包括从液氮中取出待复苏的Pm代人源脐带间充质干细胞冻存管，放入温度为37℃水...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵进军，谷广其，杨桂花，赵宇飞，李张鹏，
申请(专利权)人：和携科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11