新疆一枝蒿提取物及其制备方法和用途技术

一种新疆一枝蒿提取物及其制备方法和用途。所述制备方法包括：(1)将新疆一枝蒿药材用乙醇加热回流提取，收集提取液并回收溶剂后得到新疆一枝蒿粗提取物；(2)将所述新疆一枝蒿粗提取物加水悬浮，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和氯仿萃取，分别收集石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液和氯仿萃取液，回收溶剂后得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和氯仿萃取物，其中乙酸乙酯萃取物即为所述新疆一枝蒿提取物。本发明专利技术可以高效地提取和富集新疆一枝蒿提取物有效成分，含量高、杂质少，并明确了具有抗氧化、抗感染作用的有效成分。

Extract of Artemisia sinensis and its preparation method and Application

The invention relates to an extract of Artemisia sinensis and a preparation method and application thereof. The preparation method includes: (1) heating and refluxing the crude extract of Artemisia sinensis with ethanol, collecting the extract and recovering the solvent to obtain the crude extract of Artemisia sinensis; (2) suspending the crude extract of Artemisia sinensis with water, then extracting with petroleum ether, ethyl acetate, n-butanol and chloroform, respectively, collecting petroleum ether extract, ethyl acetate extract and n-butanol extract. After recovering the solvent, petroleum ether extract, ethyl acetate extract, n-butanol extract and chloroform extract are obtained, of which ethyl acetate extract is the extract of Artemisia sinensis. The invention can efficiently extract and enrich the active ingredients of the extract of Artemisia sinensis with high content and less impurities, and clarifies the effective ingredients with antioxidant and anti-infective effects.

【技术实现步骤摘要】
新疆一枝蒿提取物及其制备方法和用途
本专利技术属于医药领域，具体涉及新疆一枝蒿提取物及其制备方法和用途。
技术介绍
新疆一枝蒿为新疆维吾尔族和哈萨克族民间传统常用药材，来源于菊科(Compositae)蒿属多年生植物岩蒿ArtemisiarupestL.的全草，维吾尔药名一孜伙艾密尼(药名出处：《维吾尔药志》)，其主产于新疆地区，主要分布于新疆维吾尔自治区内的阿尔泰、天山地区，生长于海拔1500～4000米的草原和森林地带，在新疆地区各族民间广泛沿用至今，故名新疆一枝蒿。维医认为新疆一枝蒿性寒，味辛、苦，具有祛风解表，清热解毒，活血散瘀等功效，用于治疗风寒感冒，跌打瘀肿，风疹，解蛇毒等。该药材记载于清代《本草纲目拾遗》(1765年)，记载：“巴里坤出一种药，名一枝蒿。生深山中无枝叶，一枝茁土，气味如蒿。四月间，牧马入山，收草携归，煎膏以售远客，有贩至兰州货卖者。活血解毒，去一切积滞，沉痼阴寒等疾……”。目前已收入《药品标准》维吾尔药分册、《维吾尔药志(上册)》和《中华本草(维吾尔药卷)【1-2】》。现代生物学家认为，由于新疆气候干燥，新疆一枝蒿生长环境严酷，为了适应环境，一枝蒿以减少枝叶(减少蒸发)，呈独一枝的形态顺应自然，故与其它蒿属植物相比，其在新疆地区有较强的生命力。在民间，维吾尔族和哈萨克族牧民对它更有特殊的感情，几乎每个毡房家家户户都备有此药，流传“家有一枝蒿，不怕毒蛇咬”，“家有一枝蒿，百病都除掉”等谚语。维吾尔药志中记载新疆一枝蒿有祛风活血、散瘀消肿、健胃消食、清热解毒、抗过敏、解蛇毒等功效，用于治疗毒蛇咬伤、荨麻疹、消化不良、感冒、肝炎、过敏性疾病等病症。新疆一枝蒿是新疆地区特色民族药，广泛应用于临床，且临床制剂较多，如以新疆一枝蒿为主要原料的单味药制剂一枝蒿冲剂及复方制剂在临床用于感冒和肝炎疗效显著。随着民族药基础研究的深入，其临床应用价值得到更多重视，有很大的开发研究前景。
技术实现思路
为了阐明新疆一枝蒿的有效成分、作用机理和安全性，以便临床更好使用，本专利技术提出了新疆一枝蒿提取物及其制备方法和用途。一方面，本专利技术提出了一种新疆一枝蒿提取物的制备方法，包括：(1)将新疆一枝蒿药材用乙醇加热回流提取，收集提取液并回收溶剂后得到新疆一枝蒿粗提取物；(2)将所述新疆一枝蒿粗提取物加水悬浮，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和氯仿萃取，分别收集石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液和氯仿萃取液，回收溶剂后石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和氯仿萃取物，其中乙酸乙酯萃取物即为所述新疆一枝蒿提取物。所述乙醇的体积浓度为75-85％，优选为79％，加热回流提取时间为1.5-2.5h，优选为2h，乙醇与新疆一枝蒿药材的比例为15-25ml乙醇/g药材，优选为19ml乙醇/g药材，加热回流提取至少为两次。石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和氯仿与水层的体积比为1∶1。所述乙酸乙酯萃取物通过色谱分离得到单体化合物，优选地，所述色谱包括硅胶柱色谱和凝胶柱色谱。另一方面，本专利技术还提出了一种利用所述制备方法制备的新疆一枝蒿提取物。所述新疆一枝蒿提取物包括黄酮类化合物、倍半萜酮酸类化合物和甾醇类化合物。所述黄酮类化合物包括紫花牡荆素、木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷和槲皮素，所述倍半萜酮酸类化合物包括一枝蒿酮酸，所述甾醇类化合物包括胡萝卜苷和β-谷甾醇。又一方面，本专利技术还提出了一种利用新疆一枝蒿提取物制备的抗氧化剂和抗病毒剂。又一方面，本专利技术还提出了一种新疆一枝蒿提取物在制备抗氧化剂和抗病毒剂中的用途。又一方面，本专利技术还提出了一种新疆一枝蒿HPLC指纹图谱的建立方法，包括：(1)将不同批次的新疆一枝蒿道地药材粉碎，将药材粉末加入甲醇加热回流提取，将得到的滤液挥干溶剂，得到样品浸膏，将样品浸膏溶解于甲醇制得供试品溶液；(2)将供试品溶液注入高效液相色谱仪，获得不同批次的新疆一枝蒿标准指纹图谱；(3)通过标准品比对的方法，确定新疆一枝蒿指纹图谱的主要色谱峰，包括tR为27.114的槲皮素、tR为27.586的木犀草素、tR为34.085的一枝蒿酮酸、tR为51.022的紫花牡荆素与tR为51.942的洋艾素。步骤(1)中甲醇的体积浓度为55-95％，优选75％，甲醇与药材粉末的比例为15-25ml甲醇/g药材粉末，加热回流提取时间为1.5-2.5h，优选2h，加热回流提取2次。步骤(2)中的色谱条件为：色谱柱为HydrosphereC18，流动相为乙腈-0.2％甲酸水溶液，波长为254nm，流速为0.8ml/min，柱温为30℃，进样量为20μL。又一方面，本专利技术还提出了一种利用构建的指纹图谱在新疆一枝蒿质量控制中的应用。所述应用还包括利用通过高效液相色谱法建立的标准曲线测定不同批次新疆一枝蒿中木犀草素的含量。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：(1)本专利技术提出了新疆一枝蒿提取物的最佳提取工艺和有效部位的富集纯化工艺，可以高效地提取和富集新疆一枝蒿提取物有效成分，含量高、杂质少；(2)通过对新疆一枝蒿提取物中有效成分的分离和纯化，明确了具有抗氧化、抗感染作用的有效成分，有利于其应用；(3)体外测试表明，本专利技术的提取物具有抗氧化、抗病毒的活性，可以用于抗氧化剂和抗病毒剂的制备；(4)本专利技术提出了一种HPLC指纹图谱的构建方法，结合含量测定可以有效、准确的评价不同批次新疆一枝蒿的质量。附图说明图1A和1B分别为乙醇浓度和提取时间对槲皮素峰面积的等高线图和效应面分析图；图2A和2B分别为乙醇浓度和料液比对槲皮素峰面积的等高线图和效应面分析图；图3A和3B分别为提取时间和料液比对槲皮素峰面积的等高线图和效应面分析图；图4为槲皮素标准品的标准曲线；图5为上样量与洗脱液体积的响应曲面；图6为上样量与洗脱剂浓度响应曲面；图7为洗脱液体积与洗脱剂浓度响应曲面；图8为新疆一枝蒿的对照指纹图谱；图9为各个新疆一枝蒿样品的叠加色谱图；图10为木犀草素的标准曲线；图11为新疆一支蒿提取物的制备方法的流程图。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本专利技术作进一步的详细说明。本专利技术经过大量的工艺筛选实验，利用溶剂法对新疆一枝蒿进行提取，并对其主要有效部位进行纯化富集工艺研究，得到主要有效成分含量较高的有效部位，并分离鉴定其中单体化学成分，包括紫花牡荆素、木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷和槲皮素等化合物，得到了具有明显的抗氧化、抗病毒的药理活性的提取物，同时建立了结合指纹图谱法和含量测定法的模式控制不同批次的新疆一枝蒿质量。实施例1新疆一枝蒿提取工艺的优选1.1单因素考察采用乙醇为提取溶媒，对乙醇浓度、提取时间、料液比和提取次数4个单因素分别进行考察，以槲皮素为考察指标。最终确定的提取率较高的回流提取方法为75vol.％乙醇，回流提取2h，提取2次，最佳料液比为20：1(ml/g)。1.2效应面法优选提取工艺在单因素实验的基础上，确定Box-Behnken效应面法的自变量，以新疆一枝蒿槲皮素峰面积为响应值，以乙醇浓度、提取时间、料液比为影响因素进行三因素三水平的效应面设计，因素水平见表1。以槲皮素峰面积作为响应值，对试验结果进行回归分析，以确定新疆一枝蒿中黄酮槲皮素的提取最本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新疆一枝蒿提取物的制备方法，包括：(1)将新疆一枝蒿药材用乙醇加热回流提取，收集提取液并回收溶剂后得到新疆一枝蒿粗提取物；(2)将所述新疆一枝蒿粗提取物加水悬浮，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和氯仿萃取，分别收集石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液和氯仿萃取液，回收溶剂后石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和氯仿萃取物，其中乙酸乙酯萃取物即为所述新疆一枝蒿提取物。

【技术特征摘要】
1.一种新疆一枝蒿提取物的制备方法，包括：(1)将新疆一枝蒿药材用乙醇加热回流提取，收集提取液并回收溶剂后得到新疆一枝蒿粗提取物；(2)将所述新疆一枝蒿粗提取物加水悬浮，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和氯仿萃取，分别收集石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液和氯仿萃取液，回收溶剂后石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和氯仿萃取物，其中乙酸乙酯萃取物即为所述新疆一枝蒿提取物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述乙醇的体积浓度为75-85％，优选为79％，加热回流提取时间为1.5-2.5h，优选为2h，乙醇与新疆一枝蒿药材的比例为15-25ml乙醇/g药材，优选为19ml乙醇/g药材，加热回流提取至少为两次。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和氯仿与水层的体积比为1∶1，优选地，所述乙酸乙酯萃取物通过色谱分离得到单体化合物，优选地，所述色谱包括硅胶柱色谱和凝胶柱色谱。4.一种利用所述权利要求1-3中任一项所述制备方法制备的新疆一枝蒿提取物。5.根据权利要求4所述的新疆一枝蒿提取物，其特征在于：所述新疆一枝蒿提取物包括黄酮类化合物、倍半萜酮酸类化合物和甾醇类化合物，进一步地，所述黄酮类化合物包括紫花牡荆素、木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷和槲皮素，所述倍半萜酮酸类化合物包括一枝蒿酮酸，所述甾醇类化合物包括胡萝卜苷和β-谷甾醇。6.一种利用权利要求4或5所述新疆一枝蒿提取物制备的抗氧化剂或抗病毒剂。7.权利要求4或5所述新疆一枝蒿提取物在制备抗氧化剂或抗病毒剂中的用途。8.一种新疆一枝...

【专利技术属性】
技术研发人员：寇艳妮，卢雪，万英洁，夏建新，唐丽，
申请(专利权)人：中央民族大学，
类型：发明
国别省市：北京,11