【技术实现步骤摘要】
一种黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡及其制备方法和使用方法
本专利技术涉及微流控技术和免疫荧光微球免疫层析技术相结合的
，具体涉及一种黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡及其制备方法以及定量检测黑色素肿瘤细胞的方法。
技术介绍
黑色素瘤，又称恶性黑色素瘤，是来源于黑色素细胞的一类恶性肿瘤，常见于皮肤，亦见于黏膜、眼脉络膜等部位。在亚洲人和有色人种中，原发于皮肤的黑色素瘤占50％～70％，最常见的原发部位为肢端(约占所有黑色素瘤的50％)，即足底、足趾、手指末端及甲下等部位，其次为粘膜黑色素瘤(约占20％左右)，而欧美白种人这两种亚型仅占所有黑色素瘤的5％。欧美白种人中过度的紫外线照射是明确病因之一。紫外线可致使皮肤灼伤，并诱导DNA突变，进而诱导黑色素瘤发生。此外，光敏型皮肤、存在大量普通痣或发育异常痣以及皮肤癌家族史者均为高危人群。不恰当的处理有可能诱发色素痣恶变和迅速生长，如刀割、绳勒、盐腌、激光和冷冻等局部刺激。内分泌、化学、物理因素对黑色素瘤的发生是否有影响还不得而知。黑色素瘤是皮肤肿瘤中恶性程度最高的瘤种，容易出现远处转移。早期诊断和治疗因而显得尤为重要。目前...
【技术保护点】
1.一种黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡，包括底卡和面卡，其特征在于，所述底卡上设有：加样区，与加样区连接的多个结合区，通过时间阀与结合区一一对应连接的多个检测区；通过微通道与加样区连接的废液区；通过微通道与废液区连接的收集区；所述结合区、检测区、废液区、收集区的底部均并联有微通道；结合区及检测区底部并联的微通道均连接时间阀；所述面卡上设有加样孔和观察孔，加样孔的位置与底卡加样区对应，观察孔的位置与底卡检测区对应。
【技术特征摘要】
1.一种黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡，包括底卡和面卡，其特征在于，所述底卡上设有：加样区，与加样区连接的多个结合区，通过时间阀与结合区一一对应连接的多个检测区；通过微通道与加样区连接的废液区；通过微通道与废液区连接的收集区；所述结合区、检测区、废液区、收集区的底部均并联有微通道；结合区及检测区底部并联的微通道均连接时间阀；所述面卡上设有加样孔和观察孔，加样孔的位置与底卡加样区对应，观察孔的位置与底卡检测区对应。2.根据权利要求1所述的黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡，其特征在于，所述结合区和检测区均为5个，结合区A、B、C、D、E分别喷涂有荧光微球A标记的抗S100抗体、荧光微球B标记的抗TA90-IC抗体、荧光微球C标记的抗LDH抗体、荧光微球D标记的抗NSE抗体、荧光微球E标记的抗BRAF抗体；检测区A、B、C、D、E分别包被有抗S100抗体、抗TA90-IC抗体、抗LDH抗体、抗NSE抗体、抗BRAF抗体。3.根据权利要求1或2所述的黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡，其特征在于，所述加样区覆盖圆形滤纸；所述圆形滤纸直径为1.5-2.0cm、孔径为1-3μm；所述收集区覆盖滤纸。4.根据权利要求1或2所述的黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡，其特征在于，所述微通道通过软光刻技术和微流控芯片技术制备，所述微通道孔径为10-15μm；所述时间阀孔径为8μm。5.根据权利要求1或2所述的黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡，其特征在于，所述的底卡和面卡材质为PDMS；所述底卡和面卡的背面扣合连接。6.根据权利要求1-5任意一项所述的黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)底卡的制备：(1-1)制图；(1-2)掩模；(1-3)光刻；(1-4)再铸模；(1-5)软光刻；(2)在底卡的结合区分别喷涂荧光微球标记的抗体；(3)在底卡的检测区分别包被抗体；(4)滤纸覆盖加样区和收集区；(5)将所述底卡和面卡的背面扣合连接。7.根据权利要求6所述的黑色素肿瘤细胞联合定量检测卡的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)具体包括以下步骤：(1-1)制图：微通道图形按照设计通过绘图软件绘制掩膜版图；(1-2)掩模：制成掩膜版图后，打印在透明胶片上制得光刻掩膜板,利用此掩膜板通过光刻工艺制作硅片模具；(1-3)光刻：在基片...
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