The invention discloses a RAA fluorescence method for detecting Giardia lamblia with primers, probes and detection methods. The method has strong specificity, high sensitivity and good repeatability, and can conveniently, quickly and accurately identify Giardia lamblia with simple operation, short detection time and complete detection within 15 minutes. The detection method of the invention is fast, easy to realize high throughput, greatly reduces the detection cost, and has high sensitivity, and the detection sensitivity of each reaction reaches 100 Copies/reaction.
【技术实现步骤摘要】
一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的引物、探针及检测方法
本专利技术涉及分子生物学检测
，更具体的说是涉及一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的引物、探针及检测方法。
技术介绍
蓝氏贾第鞭毛虫是一种主要寄生于人和某些哺乳动物的小肠的顶复门寄生原虫，任何年龄人群均可感染，儿童、老年、体弱和免疫功能缺陷者尤其容易感染。蓝氏贾第鞭毛虫经繁殖后形成包囊并随粪便排出体外，人或动物摄入被活的包囊污染的饮用水或食物而被感染，引起以腹泻和消化不良为主要症状的蓝氏贾第鞭毛虫病。蓝氏贾第鞭毛虫以包囊的形态存在于水中，大小约8～10μm。包囊在25℃的水中可保持感染性2周，而在4℃水中可保持感染性长达11周之久，蓝氏贾第鞭毛虫对人体的致病剂量为10～25个活包囊。蓝氏贾第鞭毛虫病流行遍布全世界，以热带和亚热带最多，发展中国家感染人数约为2.5亿；在中国分布也很广泛，各地感染率在0.48％～10％之间，夏秋季节发病率较高。蓝氏贾第鞭毛虫的流行爆发与当地的经济及社会发展水平、受教育的程度、生活方式及卫生意识等有密切的关系。据世界卫生组织估计，全世界人群蓝氏贾第鞭毛虫感染率为1％～30％...
【技术保护点】
1.一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的引物，其特征在于，所述引物序列如下：上游引物：5’‑TCAGGAAGGAGGCCCTCAAGAGCCTGAACG‑3’；SEQ ID NO.3；下游引物：5’‑AGCTTCGTGTTTGTGAGCGCTTCTGTCGTG‑3’；SEQ ID NO.5。
【技术特征摘要】
1.一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的引物，其特征在于，所述引物序列如下：上游引物：5’-TCAGGAAGGAGGCCCTCAAGAGCCTGAACG-3’；SEQIDNO.3；下游引物：5’-AGCTTCGTGTTTGTGAGCGCTTCTGTCGTG-3’；SEQIDNO.5。2.根据权利要求1所述的一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的引物，其特征在于，所述上游引物和下游引物的使用浓度为5～20μM。3.根据权利要求2所述的一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的引物，其特征在于，所述上游引物和下游引物的使用浓度为10μM。4.一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的探针，其特征在于，所述探针序列如下：5’-TYGCCACGGAGAACGCMGARAGGAAGAAGATGTAYGACCAGCTCAACG-3’；SEQIDNO.8；所述探针采用荧光报告基团和荧光淬灭基团进行修饰，荧光报告基团修饰在探针序列离5’端碱基数31bp的位置上；荧光淬灭基团修饰在探针序列离5’端碱基数33bp的位置上，荧光报告基团与淬灭基团之间间隔1个碱基G，其中离5’端碱基数32bp的位置上的G用四氢呋喃残基替换。5.根据权利要求4所述的一种RAA荧光法检测蓝氏贾第鞭毛虫的探针，其特征在于，所述荧光报告基团为FAM、HEX、...
【专利技术属性】
技术研发人员：戴洋，倪碧娴，曹俊，王晓婷，羊海涛，郭利川，刘燕红，王智宏，应清界，
申请(专利权)人：江苏省血吸虫病防治研究所，江苏奇天基因生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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