源于牦牛皮的降压肽及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种源于牦牛皮的降压肽的制备方法，包括以下步骤：将脱毛后洁净的牦牛皮切割成块状或条状，然后在100～150℃下煮浆处理0.5～3h；按每10～25g组织加入1～2g酶的量，向得到的处理液中加入酶，在20～50℃下酶解1～5h，离心后取上清液，得到胶原蛋白肽浆，其中，所述酶中至少包括菠萝蛋白酶；使用孔径为1kDa～5kDa的过滤膜对所述胶原蛋白肽浆进行超滤分离，向得到的滤出液中接种植物乳杆菌进行发酵，接种量为1％～5％，发酵结束后灭菌，得到所述降压肽。本发明专利技术通过联合应用酶解与发酵法制备牦牛皮来源的降压肽，所制备的降压肽能够辅助降低血压。

Antihypertensive Peptide Derived from Yak Skin and Its Preparation Method

The present invention relates to a preparation method of antihypertensive peptide derived from yak hide, which includes the following steps: cutting the clean Yak Hide after depilation into blocks or strips, then boiling at 100-150 ~C for 0.5-3 h; adding 1-2 g of enzymes per 10-25 g tissue, adding enzymes to the obtained solution, enzymatic hydrolysis at 20-50 ~C for 1-5 h, centrifuging and extracting supernatant to obtain collagen peptide. Pulp, in which bromelain is at least included in the enzyme; the collagen peptide pulp is separated by ultrafiltration with a pore size of 1 kDa to 5 kDa, and fermented by inoculating Lactobacillus plantarum into the filtrate. The inoculation amount is 1%-5%. After the fermentation, the antihypertensive peptide is sterilized and obtained. The antihypertensive peptide from Yak Hide is prepared by combining enzymatic hydrolysis and fermentation, and the prepared antihypertensive peptide can assist in lowering blood pressure.

【技术实现步骤摘要】
源于牦牛皮的降压肽及其制备方法
本专利技术涉及食品保健和医药领域，尤其涉及一种源于牦牛皮的降压肽及其制备方法。
技术介绍
近年来，随着环境污染的加剧和生活水平的提高，高血压已成为一种常见的代谢疾病，患病率日益增高，是世界公认的健康问题之一。目前服用哌唑嗪、特拉唑嗪等抗血压药物是控制这类疾病的主要手段，但是这些药物均有不同程度的副作用，因此，寻求一种有效且安全的方法来预防和治疗高血压具有极其重要的意义。牦牛是青藏高原的特有牛种，是典型的高寒动物，具有耐寒、耐高海拔、抗缺氧、抗紫外线等优点。研究表明，牦牛皮胶原具有含量多，生物活性强等诸多优点。近年来，随着西部开发和一代一路的战略实施，藏区牦牛养殖和加工产业发展较快。利用牦牛皮生产胶原或活性胶原肽可实现牦牛皮高值化利用。目前的胶原肽下游产品大部分是围绕美容的食品、日化产品进行开发，典型的，如一种鱼皮胶原肽面膜液的生产方法(申请号CN201310445990.5)，通过酶解鱼皮制备了一种无臭、安全性高、无刺激的胶原肽面膜液。又如一种含鳕鱼皮胶原肽的皮肤修复肥皂的制备方法(申请号CN201710568451.9)，采用动物油脂、植物油脂、NaOH、水、鳕鱼皮胶原肽和精油制备了一种对皮肤具有多重保护作用的肥皂，可以修复皮肤损伤，补充皮肤中的胶原蛋白。而以胶原蛋白肽为主成分开发保健功能产品的报道较少，现有的公开资料中有保护骨关节(申请号CN201710359491.2)、辅助组织再生(申请号CN201710976345.4)、抗氧化(申请号CN201511014857.X)、降血糖(申请号CN200710157641.8)等功能，而具有降血压保健功能的胶原肽则未见到报道。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术的目的是提供一种源于牦牛皮的降压肽及其制备方法，本专利技术通过联合应用酶解与发酵法制备牦牛皮来源的降压肽，所制备的降压肽能够辅助降低血压。本专利技术的第一个目的是提供一种源于牦牛皮的降压肽的制备方法，包括以下步骤：(1)将脱毛后洁净的牦牛皮切割成块状或条状，然后在100～150℃下煮浆处理0.5～3h；(2)按每10～25g组织加入1～2g酶的量，向步骤(1)得到的处理液中加入酶，在20～50℃(优选为30～40℃)下酶解1～5h，离心后取上清液，得到胶原蛋白肽浆，其中，所述酶中至少包括菠萝蛋白酶；(3)使用孔径为1kDa～5kDa(优选为1kDa)的过滤膜对所述胶原蛋白肽浆进行超滤分离，向得到的滤出液中接种植物乳杆菌，接种量为1％～5％(w/v)(优选地，接种量为5％(w/v))，在25～45℃，pH值为5.0～7.0条件下发酵2～5h，发酵结束后灭菌，得到所述降压肽。进一步地，在步骤(1)之前，还包括将牦牛皮洗净，去除皮下脂肪和皮毛的步骤。进一步地，在步骤(1)中，所述牦牛皮为新鲜牦牛皮或干牦牛皮。进一步地，在步骤(1)中，采用机械切割或人工切割方法将牦牛皮切割成块状或条状。在步骤(1)中，牦牛皮来源于西藏特有牛种牦牛wildyak，为藏族地区的特色牦牛资源。进一步地，在步骤(2)中，酶解在pH值为6～8条件下进行。进一步地，在步骤(2)中，所述酶为菠萝蛋白酶或含菠萝蛋白酶的复合蛋白酶。酶优选为商品化的菠萝蛋白酶制品，包括含有菠萝蛋白酶的复合蛋白酶。在步骤(2)中，组织指的是经步骤(1)煮浆后获得的牦牛皮胶。进一步地，在步骤(3)中，在pH值为6.0～7.0条件下进行发酵。进一步地，在步骤(3)中，灭菌温度为90～95℃。进一步地，在步骤(3)中，灭菌后还包括浓缩和干燥的步骤。进一步地，浓缩方法为离心浓缩、超滤浓缩或旋蒸浓缩，所述超滤浓缩所使用的超滤膜孔径为40kDa～100kDa。进一步地，干燥方法为冷冻干燥法或喷雾干燥法。本专利技术的第二个目的是要求保护一种采用上述制备方法所制备的降压肽。本专利技术的降压肽对血管紧张素转化酶的抑制率最高为85％～90％。借由上述方案，本专利技术至少具有以下优点：本专利技术通过联合应用酶解与发酵法制备牦牛皮来源的降压肽，工艺简单，适合工业化大规模生产。本专利技术所制备的降压肽能够辅助降低血压，对血管紧张素转化酶的抑制率较高。上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例并配合附图详细说明如后。附图说明图1是本专利技术实施例1所制备的牦牛降压肽分子量分布的GPC测试结果。具体实施方式下面结合附图和实施例，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。实施例1牦牛来源降压胶原蛋白肽的制备一种源于牦牛皮的降压肽的制备方法，处理步骤为：脱毛、煮浆、酶解、分离、发酵、精制，其具体步骤如下：(1)脱毛：将牦牛皮去污并反复清洗干净，用刀剃去皮下脂肪，褪毛器退去长毛，或用喷火枪将毛烧尽，脱毛后反复清洗。(2)煮浆：将洗净的牦牛皮机械切割或人工切割成块状，150℃下高温煮浆，冷却。(3)酶解：按每25g组织加入2g菠萝蛋白酶的量，向步骤(2)得到的浆液中加入菠萝蛋白酶，在50℃下酶解2h，离心分离上清与皮质残渣，得到胶原蛋白肽浆。(4)分离：将步骤(3)获得的胶原蛋白肽浆通过1kDa孔径的过滤膜进行超滤分离，收集滤出液。(5)乳酸菌发酵：向步骤(4)得到的滤出液中接种5％(w/v)的植物乳杆菌进行发酵，发酵5h，发酵温度为35℃，发酵pH值为6.5，发酵结束后95℃灭菌。(6)降压肽精制：将灭菌后的溶液进一步浓缩和喷雾干燥，得到无臭的白色粉末，即为牦牛降压肽。浓缩方法为离心浓缩、超滤浓缩或旋蒸浓缩，优选为超滤浓缩，超滤浓缩所使用的超滤膜孔径为40kDa～100kDa。对上述制得的牦牛降压肽分子量进行检测，结果见图1和表1。表1中，Mn表示数均分子量，Mw表示重均分子量，MP表示峰位分子量。表1牦牛降压肽的分子量分布保留时间MnMwMP面积％面积110.9611402014195146604456280.43213.0685541557649982322780.22314.06835933658299922443132.17414.86223752407200045001334.34516.1751321137310231648848415.91617.3356636895663048492629.41718.8322913142634074439539.31819.5828910918085188978.22实施例2不同工艺产物降压效果的比较采用不同工艺制备牦牛胶原肽，并采用体外血管紧张素转化酶抑制活性进行降压效果的评价，方法分别如下：方法一：按照实施例1的方法制备牦牛胶原肽。方法二：按照实施例1的方法制备牦牛胶原肽，不同之处在于：步骤(4)中的分离步骤所采用的过滤膜的孔径为3kDa。方法三：按照实施例1的方法制备牦牛胶原肽，不同之处在于：在步骤(4)收集滤出液后，直接进行浓缩和喷雾干燥。方法四：按照实施例1的方法制备牦牛胶原肽，不同之处在于：在步骤(3)中，按每25g组织加入2g中性蛋白酶的量，向步骤(2)得到的浆液中加入中性蛋白酶进行酶解。方法五：按照实施例1的方法制备牦牛胶原肽，不同之处在于：在步骤(5)中，接种5％的动物乳杆菌进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种源于牦牛皮的降压肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将脱毛后洁净的牦牛皮切割成块状或条状，然后在100～150℃下煮浆处理0.5～3h；(2)按每10～25g组织加入1～2g酶的量，向步骤(1)得到的处理液中加入酶，在20～50℃下酶解1～5h，离心后取上清液，得到胶原蛋白肽浆，其中，所述酶中至少包括菠萝蛋白酶；(3)使用孔径为1kDa～5kDa的过滤膜对所述胶原蛋白肽浆进行超滤分离，向得到的滤出液中接种植物乳杆菌，接种量为1％～5％(w/v)，在25～45℃下发酵2～5h，发酵结束后灭菌，得到所述降压肽。

【技术特征摘要】
1.一种源于牦牛皮的降压肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将脱毛后洁净的牦牛皮切割成块状或条状，然后在100～150℃下煮浆处理0.5～3h；(2)按每10～25g组织加入1～2g酶的量，向步骤(1)得到的处理液中加入酶，在20～50℃下酶解1～5h，离心后取上清液，得到胶原蛋白肽浆，其中，所述酶中至少包括菠萝蛋白酶；(3)使用孔径为1kDa～5kDa的过滤膜对所述胶原蛋白肽浆进行超滤分离，向得到的滤出液中接种植物乳杆菌，接种量为1％～5％(w/v)，在25～45℃下发酵2～5h，发酵结束后灭菌，得到所述降压肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤(1)之前，还包括将牦牛皮洗净，去除皮下脂肪和皮毛的步骤。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述牦牛皮...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱康，闻献，蒋敏，许正宏，史劲松，
申请(专利权)人：西藏央金生态农牧科技有限公司，
类型：发明
国别省市：西藏,54