基于蛋白质-无机杂化纳米花的乙酰胆碱检测试剂盒及其制备方法技术

一种基于蛋白质‑无机杂化纳米花的乙酰胆碱活性的定量检测试剂盒及其制备方法，属于生物传感器技术领域。该试剂盒负载蛋白质‑无机杂化纳米花、乙酰胆碱酯酶、胆碱氧化酶以及显色剂。根据乙酰胆碱酯酶可以催化乙酰胆碱水解产生胆碱，胆碱被胆碱氧化酶进一步氧化产生过氧化氢，所形成的过氧化氢被羟基催化氧化产生羟基自由基进而使显色剂显色。本发明专利技术基于上述原理建立的试剂盒能够快速检测乙酰胆碱，为乙酰胆碱的识别提供了直接的定量工具其具有操作简便、灵敏度高、成本低廉等优势，为乙酰胆碱的活性的即时测试提供便携式的现场检测试剂盒将满足频繁筛查和诊断跟踪的需要。

Acetylcholine detection kit based on protein-inorganic hybrid nanoflowers and its preparation method

A quantitative detection kit for acetylcholine activity based on protein-inorganic hybrid nanoflowers and its preparation method belong to the field of biosensor technology. The kit was loaded with proteins, inorganic hybrid nanoflowers, acetylcholinesterase, choline oxidase and chromogenic reagents. Acetylcholinesterase can catalyze the hydrolysis of acetylcholine to produce choline. Choline is further oxidized by choline oxidase to produce hydrogen peroxide. The hydrogen peroxide formed is oxidized by hydroxyl to produce hydroxyl radicals, which can color the developer. The kit based on the above principle can quickly detect acetylcholine, and provides a direct quantitative tool for the identification of acetylcholine. It has the advantages of simple operation, high sensitivity and low cost, and provides a portable on-site detection kit for the immediate detection of acetylcholine activity, which will meet the needs of frequent screening and diagnostic tracking.

【技术实现步骤摘要】
基于蛋白质-无机杂化纳米花的乙酰胆碱检测试剂盒及其制备方法
本专利技术属于生物传感器
，具体涉及一种基于蛋白质-无机杂化纳米花(BSA-Cu3(PO4)2·3H2O)的乙酰胆碱(ACh)活性的定量定性检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
乙酰胆碱作为传递信号的神经递质，一直参与中枢和外周神经系统的神经传递，在学习、记忆、运动、情绪等生物领域发挥着重要作用。乙酰胆碱水平异常可导致胆碱能突触神经传递终止会导致阿尔茨海默病、帕金森病、进行性痴呆、精神分裂症、运动功能障碍等疾病。在上述事实的驱动下，乙酰胆碱的高敏感度测定和现场筛查在疾病预防领域受到越来越多关注，以识别疾病的早期。同时，生物样本中乙酰胆碱的分析对于神经紊乱的功能和生理方面的研究具有重要意义。为了诊断和筛选疾病检测乙酰胆碱的方法应运而生，如高效液相色谱、光学检测和电化学。然而，这些检测方法的弊端是资源要求相对较高，例如成本高、操作复杂等。因此，开发简便、快速、高灵敏地检测乙酰胆碱酯酶的方法显得尤为重要。虽然这些方法很有前途，但它们总是费时费钱，尤其是需要技术工人在设备精良的实验室进行这些实验，无法满足现场检测和简化实验步骤以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于蛋白质‑无机杂化纳米花BSA‑Cu3(PO4)2·3H2O的乙酰胆碱ACh活性检测试剂盒的制备方法，其步骤如下：(1)将Na2HPO4和NaH2PO4溶于PBS缓冲液，配制成pH值在6.5～7.0之间的PBS缓冲液溶液；将CuSO4溶于水，配制150～250mmol L

【技术特征摘要】
1.一种基于蛋白质-无机杂化纳米花BSA-Cu3(PO4)2·3H2O的乙酰胆碱ACh活性检测试剂盒的制备方法，其步骤如下：(1)将Na2HPO4和NaH2PO4溶于PBS缓冲液，配制成pH值在6.5～7.0之间的PBS缓冲液溶液；将CuSO4溶于水，配制150～250mmolL-1的CuSO4水溶液；将20～30μL上述制备的pH值在6.5～7.0之间的PBS缓冲液溶液和10～30μL上述制备得到的CuSO4水溶液混合后震荡1～3分钟，得到混合溶液；将0.8～1.2mgmL-1、80～120μL的牛血清白蛋白BSA水溶液加入到上述混合溶液中，静止12～18小时后离心3～5分钟；向所得沉淀中加入去离子水100～150μL，得到蛋白质-无机杂化纳米花BSA-Cu3(PO4)2·3H2O水溶液，最后将蛋白质-无机杂化纳米花BSA-Cu3(PO4)2·3H2O水溶液用去离子水稀释至BSA-Cu3(PO4)2·3H2O浓度为4mgmL-1...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢革宇，孔德帅，闫旭，刘方猛，刘晓敏，孙鹏，高原，梁喜双，刘凤敏，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22