一种底物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一类用于检测α‑葡萄糖苷酶活性的底物‑‑α‑D‑葡萄糖苷，本发明专利技术还公开了该底物的合成工艺：首先将化合物α‑D‑葡萄糖与乙酰氯反应，经纯化得到α‑D‑五乙酰葡萄糖；所得物经N，N‑二甲基‑1，3‑二氨基丙烷催化，酸洗、萃取、干燥、纯化得到2,3,4,6‑四‑O‑α‑D‑乙酰基葡萄糖；所得物在二氯甲烷溶液中经催化与三氯乙腈反应，过滤、纯化得到2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑β‑D‑葡萄糖基三氯乙酰亚胺；所得物在二氯甲烷溶液中经催化与色原或荧光基团反应，萃取，合并有机相，干燥、浓缩、甲醇复溶、4℃养晶过滤，得到2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑α‑D‑葡萄糖苷；所得物在甲醇溶液中催化，反应完成后脱色吸附、过滤、纯化制得。本发明专利技术底物的合成工艺简单，收率高，可提高试剂盒灵敏度，稳定性好，特异性强。

A Substrate and Its Preparation Method and Application

The invention discloses a kind of substrates for detecting the activity of alpha-glucosidase, and also discloses the synthesis process of the substrates: firstly, the compound alpha-D-glucose is reacted with acetyl chloride and purified to obtain alpha-D-pentaacetylglucose; the obtained substance is catalyzed by N, N-dimethyl-1, 3-diaminopropane, acid washing, extraction, drying, purification. 2,3,4,6 O_D_acetyl glucose was obtained by catalytic reaction with Trichloroacetonitrile in dichloromethane solution, filtration and purification, and 2,3,4,6 O_acetyl beta_D_glucosyltrichloroacetylene imide was obtained by catalytic reaction with chromogen or fluorescence group in dichloromethane solution, extraction, drying, concentration and methanol re-disso 2,3,4,6 O_acetyl_D_glucoside was obtained by crystallization filtration at 4 C. The product was catalyzed in methanol solution, decolorized, adsorbed, filtered and purified. The preparation process of the substrate of the invention is simple, the yield is high, the sensitivity of the kit can be improved, the stability is good, and the specificity is strong.

【技术实现步骤摘要】
一种底物及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物化学医药
，尤其是涉及一种底物，本专利技术还涉及该底物的制备方法，以及该底物在检测α-葡萄糖苷酶活性方面的应用。
技术介绍
目前，酶类测定是临床生化检验中常做的项目之一。α-葡萄糖苷酶为水解酶的一种，其活性测定具有重要的临床意义。如羊水细胞、成纤维细胞或尿中α-葡萄糖苷酶活力的下降或缺乏用于判断Ⅱ型糖原积累症，血清中α-葡萄糖苷酶活力下降用于分析男性不育症等。念珠菌和滴虫引起的疾病直接从症状上难以鉴别，往往需要辅以实验室检测手段。而目前能够直接鉴别滴虫和念珠菌的方法有显微镜镜检和免疫学的方法。显微镜镜检受检验人员的经验、观察视野以及标本中其他颗粒的影响大；免疫学的方法受技术所限，特别是病原体受白带包裹，灵敏度会受到影响。利用微生物所具有的特异性酶检测相应微生物的酶化学检测技术是微生物检测的又一大技术方向，事实上越来越多的科技人员正尝试利用该技术检测滴虫和念珠菌，比如通过胱氨酰蛋白酶检测滴虫，通过门冬酰胺蛋白酶检测念珠菌，但其灵敏度和特异性都有待考证。目前可以同时检测并鉴别滴虫和念珠菌的方法有N-乙酰-氨基糖苷酶法，但此法灵敏度和特异本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种底物，其特征在于：所述底物的结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种底物，其特征在于：所述底物的结构式为：，其中，R为吲哚衍生物、硝基苯及其衍生物、萘衍生物、苯胺衍生物或香豆素衍生物中之一。2.根据权利要求1所述的底物，其特征在于：所述R为吲哚衍生物时，其底物的结构式为：，式中的RⅠ-1选自氢、甲基、乙基中其中之一；RⅠ-2~RⅠ-5各自独立选择氢、C1~C3烷基或卤素中其中之一。3.根据权利要求1所述的底物，其特征在于：所述R为硝基苯及其衍生物时，其底物的结构式为：式中的RⅡ-1~RⅡ-5各自独立选择氢、C1~C3烷基或硝基中其中之一。4.根据权利要求3所述的底物，其特征在于：式中的RⅡ-1~RⅡ-5中包含一个硝基。5.根据权利要求1所述的底物，其特征在于：所述R为萘衍生物时，其底物的结构式为：或，式中RⅢ-1~RⅢ-4各自独立选择氢、C1~C3烷基或卤素中其中之一。6.根据权利要求1所述的底物，其特征在于：所述R为苯胺衍生物时，其底物的结构式为：式中RⅣ-1~RⅣ-5各自独立选自氢、C1~C3烷基或氨基中其中之一。7.根据权利要求6所述的底物，其特征在于：所述RⅣ-1~RⅣ-5中包含一个氨基。8.根据权利要求1所述的底物，其特征在于：所述R为香豆素衍生物时，其底物的结构式为：或式中RⅤ-1~RⅤ-5各自独...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱飞飞，杨书彬，马建军，杨红云，张中洲，马沛燃，范围，付光宇，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41