The invention discloses an indirect ELISA antibody detection kit for porcine coronavirus D N protein, which comprises a coated enzyme label plate with recombinant N protein as the coated antigen. Accordingly, the corresponding ELISA detection method is established, which provides a valuable diagnostic tool for detecting PDCoV. The invention can establish a method for identifying antibodies produced by infection of swine T-type coronavirus, and has high specificity and sensitivity. The method is simple in operation, short in time and low in cost, and can be used for mass detection. It is of great significance for prevention and control of the disease.
【技术实现步骤摘要】
猪丁型冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法及其试剂盒
本专利技术属于猪丁型冠状病毒
，尤其涉及一种猪丁型冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法及其试剂盒。
技术介绍
猪的丁型冠状病毒(porcinedeltacoronavirus,PDCoV)最早发现于2012年，香港大学的Woo等从死亡哺乳动物中检测到猪丁型冠状病毒。冠状病毒分为甲、乙、丙、丁四个亚群，感染猪的丁型冠状病毒(PDCoV)是唯一一种感染非禽类的丁型冠状病毒。此后，在美国、中国、韩国等许多国家相继报道了PDCoV的流行。与PEDV和TGEV类似，PDCoV主要引起猪的肠道疾病，导致感染猪腹泻、呕吐和脱水，发病率和死亡率可高达50％-100％，尤以哺乳阶段仔猪发病最为严重，严重威胁着猪群健康，给养猪业带来了巨大的经济损失。PDCoV全长25.4kb，其基因组结构与一般冠状病毒(Coronavirus,CoV)相似，基因组结构从5’-3’末端依次为复制酶开放阅读框lab(replicaseORFlab),S糖蛋白基因(spike,S)、小膜蛋白基因(envelope,E)、膜蛋白基因(mem...
【技术保护点】
1.一种猪丁型冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测试剂盒，包括包被酶标板，其特征在于：所述包被酶标板以重组N蛋白作为包被抗原。
【技术特征摘要】
1.一种猪丁型冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测试剂盒，包括包被酶标板，其特征在于：所述包被酶标板以重组N蛋白作为包被抗原。2.根据权利要求1所述的ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述重组N蛋白由序列表SEQ.ID.No.1的基因碱基序列编码或者具有SEQ.ID.No.2的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的ELISA检测试剂盒，其特征在于还包括阴性血清、阳性血清、HRP标记的山羊抗猪IgG抗体、洗涤液、稀释液、包被液、封闭液、底物液、终止液；所述洗涤液为PBS+0.05％Tween-20；所述稀释液为PBS+2％脱脂奶粉+0.05％Tween-20；所述包被液为采用0.05MPH9.6Na2CO3-NaHCO3缓冲液；所述底物液为单组份TMB底物显色液；所述封闭液为PBS+5％脱脂奶粉；所述终止液为2MH2SO4溶液。4.一种猪丁型冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法，其特征在于按以下操作进行：包被抗原：将重组N蛋白以包被液稀释后加入酶标板中包被，100μL/孔，得包被酶标板；洗涤：弃去包被液并用洗涤液...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘磊，卢冰霞，秦毅斌，陈忠伟，赵武，何颖，李斌，梁家幸，周英宁，段群棚，蒋冬福，卢敬专，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45
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