检测TRIM2、TRIM4、TRIM32和/或TRIM46基因或蛋白产品的用途制造技术

本发明专利技术提供了一种检测TRIM2、TRIM4、TRIM32和/或TRIM46基因或蛋白产品的用途，所述产品应用于制备鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的产品；所述基因为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种；所述蛋白为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种基因所表达的蛋白。本发明专利技术检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品用于制备鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的产品时，使该产品能够区分潜伏感染者和活动性结核病人，并且标本容易获得，具有快速，高效，高敏感度，高准确度，操作相对简便，易于推广的特点。

【技术实现步骤摘要】
检测TRIM2、TRIM4、TRIM32和/或TRIM46基因或蛋白产品的用途
本专利技术涉及生物
，特别涉及检测TRIM2、TRIM4、TRIM32和/或TRIM46基因或蛋白产品的用途。
技术介绍
结核病是由结核分枝杆菌感染引起的一种慢性传染性疾病。虽然人类与结核病的斗争从未停止过，但它依然严重威胁着全球的公共健康。据世界卫生组织最新报告，2015年，全球新发结核病病例约为1040万，大约180万人死于结核病，中国的新发病人数为91.8万，死亡人数为3.8万，发病总人数位居世界第四位，流行形势十分严峻。近年来，随着耐多药结核病和广泛耐药结核病的出现，以及HIV的共感染，使结核病的控制面临严峻挑战。控制结核病流行的重要措施之一是切断传染源，而活动性结核病患者是主要的传染源，因此及早的、准确的诊断出活动性结核病人，并给予及时的治疗，便可有效降低结核病的蔓延。目前，临床上结核病诊断方法均存在显著缺陷，如痰涂片抗酸染色检查—灵敏度较低；传统结核分枝杆菌培养法—操作繁琐、阳性率低且耗时长；自动化快速培养法—需要昂贵的仪器设备；胸部X线检测—肺结核病特征性改变不明显且无法早期及时的发现；结核菌素皮试—不能区分自然感染和卡介苗接种；IFN-r释放试验(IGRAs)—不能区分潜伏感染者和活动性结核病人；GeneXpertMTB/RIF法—直接从痰标本进行的基因检测，在敏感性方面没有显著提高，且存在一定的假阴性率和假阳性率。血清学抗体检测—特异性和敏感性均不理想。因此，迫切需要开发出新的诊断标记物，建立快速、高效、敏感的诊断方法。人感染结核分枝杆菌后，大约仅有5％～10％的人最终会发展成活动性结核病，而大部分人处于一种无临床症状的潜伏感染状态。然而，大约5％～10％的潜伏感染者，当其免疫力低下时，结核分枝杆菌会再次活化而发展成活动性结核病。结核分枝杆菌感染机体后，宿主细胞的免疫状态在结核病的发病过程中扮演着至关重要的作用，其中，免疫反应中的调节子，如细胞因子，趋化因子、细胞表面受体等，一直都是研究的重点。而近年来研究发现三结构域蛋白(TRIM)家族可以作为宿主的限制因子，参与天然免疫应答反应，因此而备受关注。TRIM蛋白家族由众多成员构成，几乎存在于所有多细胞动物体内，其可作为免疫调节蛋白和E3泛素连接酶，参与机体的固有免疫应答。随着研究的不断深入，人们发现TRIM蛋白家族不仅可以维持机体的正常生理功能，如细胞生长，细胞分化，膜修复，信号通路和细胞凋亡等，还能参与多种疾病的调控过程。此外，TRIM蛋白在人类不同疾病中具有特征表达谱，对于疾病的发展、诊断或预后都具有重要的提示作用。如Kosaka等发现TRIM29在胃癌患者中表达上调，且可以作为一个标志物用来指示淋巴结的转移。Yamada等发现在睾丸生殖细胞肿瘤(TGCT)患者中TRIM44表达上调，有望成为一个新的预后因子。此外，Nenasheva等通过诱导帕金森(PD)患者和健康人的多功能干细胞，比较转录组发现TRIM6和TRIM24基因在两组人群中的表达量有明显差异，提示这些基因可以作为疾病发展和免疫系统失调的预警基因。然而，目前关于TRIM基因在结核病中的表达情况与调节作用的研究还有很多未知之处，若能找到与结核病相关的特征TRIM基因，就有可能为制备结核病的预防、诊断和治疗的产品提供新的靶点和思路。因此，亟待对与结核病感染相关的TRIM基因进行研究，寻找新的诊断标志物，建立一种更快速、高效、敏感的鉴别、诊断、筛查活动性结核病的方法。
技术实现思路
本专利技术的一个方面是针对现有技术中缺少更快速、高效、敏感地鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的方法，提供了一种检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品的用途。为了解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案为：检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品的用途，所述产品应用于制备鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的产品；所述基因为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种；所述蛋白为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种基因所表达的蛋白。在本专利技术中，任意合适的检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品均能够实现本专利技术的目的，包括但不限于定量和/或定性产品。但作为优选，在本专利技术的一个实施方式中，上述检测样本中TRIM基因和/或蛋白水平的产品为定量检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品。更优选地，上述检测样本中TRIM基因和/或蛋白水平的产品为选自基因扩增引物、探针、基因芯片、抗体、蛋白质芯片或抗体中的一种或几种。更优选地，上述为用于扩增TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种基因的PCR引物。进一步优选地，PCR引物为选自SEQIDNo.1-8中的一对或几对PCR引物。上述PCR引物优选为实时荧光定量PCR(qRT-PCR)引物。作为优选，在本专利技术的一个实施方式中，专利技术人使用以下方法来筛选目标靶点：1.提供一组目标TRIM基因，其中包括TRIM2、TRIM4、TRIM32和TRIM46基因；2.收集活动性结核病患者和潜伏感染者的外周血，裂解外周血红细胞，提取RNA，保存备用；3.优化实验条件，针对目标基因设计引物，采用qRT-PCR的方法检测两组人群中TRIM2、TRIM4、TRIM32和TRIM46基因的表达水平；4.采用2-ΔΔCt法对数据进行分析，通过决策树分析TRIM2、TRIM4、TRIM32和TRIM46基因分别用于鉴别活动性结核病的诊断效果。本专利技术的另一个方面是提供了一种用于鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的试剂盒，上述试剂盒包括检测样本中TRIM基因和/或蛋白水平的产品。作为优选，上述试剂盒中包括选自基因扩增引物、探针、基因芯片、抗体、蛋白质芯片或抗体中的一种或几种的产品。更优选地，上述试剂盒中包括用于扩增TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种基因的PCR引物。进一步优选地，上述试剂盒中包括选自SEQIDNo.1-8中的一对或几对PCR引物。上述PCR引物优选为qRT-PCR引物。通常地，上述试剂盒中还包括任意必须的组成部分，如试剂盒说明书等。本专利技术的另一个方面是提供了一种上述试剂盒在制备鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病中的应用。本专利技术的有益效果：由于IFN-r释放试验(IGRAs)具有快速，敏感度高等特点，目前在临床上应用较为广泛，但是此方法最大的缺陷是不能区分潜伏感染者和活动性结核病人，而本专利技术的最大优点是弥补这一缺陷。此外，本专利技术标本容易获得，具有快速，高效，高敏感度，高准确度，操作相对简便，易于推广的特点。附图说明图1为TRIM基因在潜伏感染者和活动性结核患者中相对表达水平的散点图，其中图1A为TRIM2，图1B为TRIM4，图1C为TRIM32，图1D为TRIM46，其中，LTBI为潜伏感染者，TB为活动性结核病患者；图2为TRIM基因的决策树分析示意图，其中图2A为TRIM2，图2B为TRIM4，图2C为TRIM32，图2D为TRIM46，其中N为样本数，LTBI为潜伏感染者，TB为活动性结核病患者。序列说明SEQIDNo.1-2分别为本专利技术中TRIM2的上、下游PCR引物序列；SEQIDNo.3-4分别为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品的用途，其特征在于，所述产品应用于制备鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的产品；所述基因为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种；所述蛋白为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种基因所表达的蛋白。

【技术特征摘要】
1.检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品的用途，其特征在于，所述产品应用于制备鉴别、诊断和/或筛查活动性结核病的产品；所述基因为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种；所述蛋白为选自TRIM2、TRIM4、TRIM32或TRIM46中的一种或几种基因所表达的蛋白。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测样本中TRIM基因和/或蛋白水平的产品为定量检测TRIM基因和/或蛋白水平的产品。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述检测样本中TRIM基因和/或蛋白水平的产品为选自基因扩增引物、探针、基因芯片或抗体中的一种或几种。4.根据权利要求3所述的用途...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈艳清，曹树辉，李传友，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京胸科医院，
类型：发明
国别省市：北京,11