双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法技术

双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法，包括步骤：在MoS2纳米层表面原位合成Au NPs，形成Au NPs@MoS2复合纳米材料；标记两种电活性物质的探针碱基互补配对，形成双信号串联体探针；“探针‑甲基化肿瘤抑制基因‑双信号串联体探针”超级三明治结构的形成；构建电化学传感器，分析肿瘤抑制基因的甲基化状态。本发明专利技术的双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法，利用复合纳米材料、双信号导出技术、超级三明治放大策略构建了灵敏高并且快速方便的电化学传感体系，不仅可以识别不同甲基化程度的肿瘤抑制基因，而且可应用于完全甲基化的肿瘤抑制基因的高灵敏检测，可以满足临床样品检测的灵敏性要求。

【技术实现步骤摘要】
双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法
本专利技术涉及DNA电化学传感器，具体涉及双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法。
技术介绍
真核细胞中的DNA甲基化是指在甲基转移酶的催化条件下，CpG岛上的胞嘧啶分子5位碳原子上引入一个甲基的反应。作为一种最重要的表观遗传修饰，基因中CpG岛的异常甲基化状态是许多疾病的征兆，例如与癌症相关的DNA高甲基化通常会控制肿瘤抑制基因的活性表达，与肿瘤细胞的形成和生长有关。因此，DNA甲基化的有效检测对于癌症的早期诊断以及遗传信息控制的机理研究具有重要的意义。作为一种有效的信号放大策略，超级三明治结构在生物传感器的构建领域逐渐受到重视。例如，Yang等发展了一种新型的超级三明治结构，并将其应用于DNA分析，当检测体系中有目标DNA存在时，即使有一个目标DNA，就可以作为“桥梁”，使带有大量信号物质的DNA串联体与组装在电极表面的捕获探针相连，从而增强了电化学信号。[Chem.Commun.AsimpleandultrasensitiveelectrochemicalDNAbiosensorbasedonDNAconcatamer本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法，其特征在于，包括步骤：S1：在MoS2纳米层表面原位合成Au NPs，形成Au NPs@MoS2复合纳米材料；S2：取Au NPs@MoS2纳米复合材料滴涂到玻碳电极表面，干燥后得Au NPs@MoS2纳米复合材料修饰的玻碳电极；S3：将相同浓度的5′端修饰二茂铁的探针probe 1‑Fc和3′端修饰亚甲基蓝的探针probe 2‑MB于水浴中反应，得到双信号串联体探针，其中，所述probe 1‑Fc的序列为5′‑Fc‑CAATTTCCTTCCACTCGTCCGGAGGAAGGTGCCG‑3′，所述probe 2‑MB的序列为5′‑CGAGT...

【技术特征摘要】
1.双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法，其特征在于，包括步骤：S1：在MoS2纳米层表面原位合成AuNPs，形成AuNPs@MoS2复合纳米材料；S2：取AuNPs@MoS2纳米复合材料滴涂到玻碳电极表面，干燥后得AuNPs@MoS2纳米复合材料修饰的玻碳电极；S3：将相同浓度的5′端修饰二茂铁的探针probe1-Fc和3′端修饰亚甲基蓝的探针probe2-MB于水浴中反应，得到双信号串联体探针，其中，所述probe1-Fc的序列为5′-Fc-CAATTTCCTTCCACTCGTCCGGAGGAAGGTGCCG-3′，所述probe2-MB的序列为5′-CGAGTGGAAGGAAATTGCGGCACCTTCCTCCGGA-MB-3′；S4：将步骤S2得到的电极浸泡在捕获探针captureDNA的溶液中，过夜，其中captureDNA的序列为5′-SH-TTTTCATCCAAATACTCCACACG-3′；S5：将电极浸入含有待测甲基化基因的缓冲溶液中；S6：将步骤S5中得到的电极浸入双信号串联体探针溶液中，得双信号超级三明治电化学传感器；S7：将步骤S6得到的双信号超级三明治电化学传感器的工作电极、饱和甘汞电极和铂电极构成三电极体系，置于磷酸盐缓冲溶液和氮气氛围中进行检测。2.根据权利要求1所述的双信号超级三明治电化学传感器检测基因甲基化的方法，其特征在于，所述步骤S1具体包括：在聚乙烯吡咯烷酮环境中，将氯金酸缓慢注入MoS2纳米层悬浮液中，剧烈震荡几分钟，室温下反应得到酒红色AuNPs@MoS2纳米复合材料。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯秋梅，王梦影，王颇，
申请(专利权)人：江苏师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32