血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用制造技术

本发明专利技术公开了血液中circ‑DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，circ‑DLG1分子标志物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1，涉及circ‑DLG1分子标志物的发现、检测、应用，设计并合成出特异性用于实时定量PCR的检测引物。针对目标人群对食管癌内镜筛查依从性差，以及临床上确诊的食管鳞癌患者绝大多数都是中晚期的现状提出，在食管鳞状细胞癌变进程中找到理想的分子预警信号，有针对性的进行内镜检查，病理确诊，以减轻病人痛苦，避免过度医疗，节省医疗资源。

【技术实现步骤摘要】
血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用
本专利技术涉及肿瘤分子生物学领域，具体为一种血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用。
技术介绍
食管癌是严重威胁人类健康的最常见恶性肿瘤之一，主要有两种病理分型：鳞癌和腺癌。90％的食管癌是鳞状细胞癌，其分布具有明显的地域差异。我国ESCC发病率占全世界70％以上，预后较差，5年总体生存率只有15％-25％。2016年临床医师癌症杂志报道，食管癌已经成为中国发病率最高的五种肿瘤之一，其发病率在男性中排第三位，女性中排第五位。环状RNA(circRNAs)是一种新的内源性非编码RNA，在20世纪90年代早期被确定为乱序外显子的转录本，其结构、功能和机制被相继报道，成为后来20年的研究热点。不同于以5'端和3'端为末端的传统线性RNA，circRNAs是缺少5'端帽和3'端poly(A)尾的特殊闭环结构，且与哺乳动物细胞中微小RNA(miRNAs)和长链非编码RNA(lncRNAs)相比，具有更高的稳定性和序列保守性，是因为它们具有核酸酶抗性。近期大量研究报道，在不同物种中circRNAs均有表达。基于生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血液中 circ‑DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，所述circ‑DLG1分子标志物的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。

【技术特征摘要】
1.一种血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，所述circ-DLG1分子标志物的核苷酸序列为SEQIDNO.1。2.如权利要求1所述的血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，其特征在于：用于诊断食管鳞癌分期中的试剂为实时定量PCR试剂盒。3.如权利要求1或2所述的一种血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，其特征在于：根据核苷酸序列为SEQIDNO.1的circ-DLG1分子标志物设计了2对引物用于检测该序列，引物核苷酸序列为SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO.4、SEQIDNO.5。4.如权利要求1所述的一种血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，其特征在于：circ-DLG1分子标志物的检测方法，包括样品总RNA提取、RNA反转录、实时定量PCR扩增。5.如权利要求4所述的一种血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，其特征在于：circ-DLG1分子标志物的检测方法具体步骤包括，血浆总RNA提取使用mirVanaPARISKit试剂盒，组织总RNA提取Trizol法提取组织及细胞总RNA，第二步，使用Prime-Script将RNA逆转录成cDNATM一步法RT-PCR试剂盒，甘油醛3-磷酸脱氢酶用作内部对照，使用ABI7500系统和SYBRGreenPCRMasterMix进行所有qRT-PCR反应。6.如权利要求5所述的一种血液中circ-DLG1分子标志物在诊断食管鳞癌分期中的应用，其特征在于：具体步骤包括，第一步，总RNA提取，a.血浆总RNA提取，血浆、血清总RNA提取使用mirVanaPARISKit，Ambion1566,USA试剂盒，具体步骤如下：所有试剂均需恢复到室温下使用，取出血浆/血清样本冰面上融化备用，洗脱液95℃预热备用；400μl血浆/血清样本加入已经添加等体积的2XDenaturingSolution的EP管中，充分震荡混匀；加入等体积的Acid-Phenol:Chloroform，震荡混匀1min，随后室温下10000g离心5min；转移上层水相至新的EP管，并记录转移水相体积，随后添加1.25倍体积100%乙醇至EP管中，充...

【专利技术属性】
技术研发人员：康宁，朱桂芳，曹秀峰，
申请(专利权)人：江苏万成生物医学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32